中科院大連化物所開發蛋白質復合物原位解析新技術
近日，中科院大連化物所生物技術研究部生物分子高效分離與表征研究組（1810組）張麗華研究員團隊研制了一種基于糖苷鍵的質譜可碎裂型交聯劑，顯著地提高了交聯信息的檢索通量和鑒定準確度，同時具有良好的兩親性和生物兼容性，實現了活細胞內蛋白質復合物原位交聯和規模化精準解析。作為生命活動的執行者，蛋白質通過相互作用形成復合物等形式行使其特定的生物學功能，其中，細胞內的限域效應、擁擠效應和細胞器微環境等對于維持蛋白質復合物結構和功能至關重要。化學交聯技術（Chemical cross-linking mass spectrometry, CXMS），尤其是原位化學交聯質譜技術（in-vivo CXMS）具有規模化分析蛋白復合物原位構象和相互作用界面的優勢，已成為活細胞內蛋白質復合物解析的重要技術。然而，目前活細胞原位交聯面臨著細胞擾動大、交聯肽段譜圖復雜程度高等問題。因此，如何實現活細胞低擾動下的原位快速交聯是蛋白質原位構象和相互作用精......閱讀全文
線粒體原位膜蛋白的高分辨結構解析首次實現
3日，記者從南京中醫藥大學獲悉，該校醫學院朱家鵬教授和耶魯大學張凱教授聯合研究團隊突破了蛋白質純化的傳統概念，直接以線粒體成像，首次實現了線粒體原位膜蛋白的高分辨結構解析，得到呼吸鏈超級復合體的最真實最清晰的三維結構，為氧化磷酸化這一最基本的生命過程的研究提供了堅實的理論基礎。相關科研成果發表在
線粒體原位膜蛋白的高分辨結構解析首次實現
3日，記者從南京中醫藥大學獲悉，該校醫學院朱家鵬教授和耶魯大學張凱教授聯合研究團隊突破了蛋白質純化的傳統概念，直接以線粒體成像，首次實現了線粒體原位膜蛋白的高分辨結構解析，得到呼吸鏈超級復合體的最真實最清晰的三維結構，為氧化磷酸化這一最基本的生命過程的研究提供了堅實的理論基礎。相關科研成果發表在國際
研究人員實現纖維小體原位關鍵酶的純化及解析
纖維小體是細菌分泌的高效降解木質纖維素的多酶復合體，其高效降解機制及產纖維小體細菌的遺傳改造是木質纖維素降解利用研究中的重要方向之一。熱纖梭菌的Cel48S是其纖維小體的主要外切葡聚糖酶，是其纖維小體中含量最高的組分，在纖維素降解過程中起關鍵作用。但Cel48S的內在性質使得對Cel48S的純化
原位PCR和原位RT
（一）、儀器設備?英國Thermo Hybaid原位PCR儀?。（二）、操作流程1、原位PCR?步驟1）預處理：（1）切片常規脫蠟；（2）0.2mol/L HCl處理10min；（3）5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10min；（4）Nase消化組織37℃ 30min；（5）梯度酒精脫水，室溫干燥
科學家開發蛋白質復合物原位解析新技術
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/5/500192.shtm作為生命活動的執行者，蛋白質通過相互作用形成復合物等形式行使其特定的生物學功能。近日，中國科學院大連化學物理研究所研究員張麗華、研究員趙群等研制了一種基于糖苷鍵的質譜可碎裂型交聯劑，顯
我所實現反應性金屬—載體相互作用的原位結構解析
原文地址：http://www.dicp.cas.cn/xwdt/kyjz/202303/t20230328_6718304.html 近日，我所催化與新材料研究室楊冰副研究員等與中國科學技術大學路軍嶺教授團隊合作，在低溫反應性金屬—載體相互作用（RMSI）的原位結構解析及高性能合金相結構創制方面
德國應用化學：蛋白質復合物原位解析新技術
作為生命活動的執行者，蛋白質通過相互作用形成復合物等形式行使其特定的生物學功能。近日，中國科學院大連化學物理研究所研究員張麗華、研究員趙群等研制了一種基于糖苷鍵的質譜可碎裂型交聯劑，顯著地提高了交聯信息的檢索通量和鑒定準確度，同時具有良好的兩親性和生物兼容性，實現了活細胞內蛋白質復合物原位交聯和
間接原位PCR（原位雜交PCR）
與直接原位PCR所不同的是，靶基因在擴增時不進行標記基團的摻入，而是標記一段與擴增片段互補的探針，在擴增結束后，應用此探針進行原位雜交。因此，此處主要介紹原位雜交，其余方法同原位PCR。實驗材料組織或細胞樣品試劑、試劑盒SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脫脂奶粉Denhardt’s 液SDS變性的鮭魚精DNAR
間接原位PCR（原位雜交PCR）
間接原位PCR（原位雜交PCR） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 組織或細胞樣品 試劑、試劑盒
間接原位PCR（原位雜交PCR）
與直接原位PCR所不同的是，靶基因在擴增時不進行標記基團的摻入，而是標記一段與擴增片段互補的探針，在擴增結束后，應用此探針進行原位雜交。因此，此處主要介紹原位雜交，其余方法同原位PCR。一、預雜交1. 試劑與配制2×SSC50%去離子甲酰胺：用4×SSC配制（v/v）預雜交液：2×SSC，5%硫酸葡
中科院大連化物所開發蛋白質復合物原位解析新技術
近日，中科院大連化物所生物技術研究部生物分子高效分離與表征研究組（1810組）張麗華研究員團隊研制了一種基于糖苷鍵的質譜可碎裂型交聯劑，顯著地提高了交聯信息的檢索通量和鑒定準確度，同時具有良好的兩親性和生物兼容性，實現了活細胞內蛋白質復合物原位交聯和規模化精準解析。作為生命活動的執行者，蛋白質通
原位解析界面PdHx誘導負載型PdZn/ZnO催化劑動態形成獲進展
近期，中國科學院金屬研究所沈陽材料科學國家研究中心聯合研究部研究員張炳森、蘇黨生與吉林大學教授張偉、中科合成油技術有限公司博士劉晰，以透射電鏡“氣體-加熱原位樣品臺”（DENSsolutions Climate）結合自制的控氣裝置為主要研究手段，并結合原位X射線衍射（in-situ XRD）和程
原位PCR
About in situ PCR?(Applied Biosystems)Basic information about in situ PCR and its applications.The?In Situ?PCR: Amplification and Detection in a Cellu
原位PCR
實驗概要原位PCR技術自上世紀90年代初建立至今，科學家就一直對原位PCR的技術和應用進行研究，目前該項技術已日臻完善。原位PCR既能分辨帶有靶序列的細胞又能標出靶序列在細胞內的位置，在分子和細胞水平上研究疾病的發病機理、臨床過程以及病理的轉歸，其特異性和敏感性均高于一般PCR技術。在病毒學、病理學
間接原位PCR（原位雜交PCR）實驗
實驗材料 組織或細胞樣品試劑、試劑盒 SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脫脂奶粉Denhardt’s 液SDS變性的鮭魚精DNARnaseDTT乙醇儀器、耗材 玻片石蠟膜橡皮泥濕盒實驗步驟 一、預雜交?1. ? 試劑與配制?2×SSC?50%去離子甲酰胺：用4×SSC配制（v/v）?預雜交液：2×SSC，5%硫
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針，使用非放射檢測系統或放射自顯影系統，在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法，具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一，廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH) 是用標記的核酸探針，使用非放射檢測系統或放射自顯影系統，在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法，具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一，廣泛應
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針，使用非放射檢測系統或放射自顯影系統，在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法，具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一，廣泛
熒光原位雜交的熒光原位雜交
熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization，FISH）是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術，以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。探針首先與某種介導分子（reporter molecule）結
原位雜交儀原位雜交的意義
原位雜交：在研究DNA分子復制原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，能過氫鍵結合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點，應用帶有標記的（有放射性同位素，如3H、35S、32P、熒光素生物素、地高辛等非放射性物質）DNA或R
原位雜交儀—原位雜交實驗（二）
原位雜交第二天 1. 1）將探針回收，放于－20C保存（通常探針可重復使用十次左右）。 2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復一次。 3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。 4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復一次。
原位雜交儀—原位雜交試驗（一）
收集斑馬魚的胚胎，在Holfretor水中培養，到達所需要的發育時期時，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃保存，二十四小時后用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗，然后換成甲醇，在-20C 保存，待用（兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧水處理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養，可阻斷色素的形成）
原位雜交儀—原位雜交實驗（三）
原位雜交第三天 1） 用1ml含10%熱滅活血清的MABT溶液置換抗體溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時以上，最后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。 2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置
直接原位PCR
實驗方法原理 原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。實驗材料 細胞或組織樣品試劑、試劑盒 福爾馬林二甲苯PB
原位PCR定義
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術，就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR既能分辨鑒定帶有靶序列的細胞，又能標出靶序列在細胞內的位置，于分子和細胞水平上研究疾
原位PCR配置
主機一臺，個人存儲卡一張，原位PCR適配器 1.適用于96×0.2ml PCR管或77×0.5ml PCR管或8×12PCR板不需要更換模塊； 2.反應槽溫控范圍：4-99℃； 3.控溫精度：±0.2℃； 4.模塊均一性：≤±0.5℃； 5.溫控速率：升3℃/秒,降2℃/秒，速率可調；
直接原位PCR
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法
原位PCR儀
用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀，如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性，使PCR反應體系滲透到組織和細胞中，在細胞的靶DNA所在的位置上進行基因擴增，不但可以檢測到靶DNA，又能標出靶序列在細胞內的位置，于分子和細胞水平上研究疾病的發病機
原位分離技術
近幾年來,原位分離技術(in situ product removal,簡稱ISPR)在乳酸發酵中的應用引起了世界范圍內的廣泛關注,溶劑萃取發酵法(油酸、叔胺等為萃取劑)、吸附法(離子交換樹脂、活性炭、高分子樹脂等)、膜法發酵(滲析、電滲析、中空纖維超濾膜、反滲透膜等)等,這些方法的使用都是基于在發
原位PCR技術
除了經典的原位雜交外。原位雜交可與其他組織化學技術相結合，或與其他分子生物學技術相結合，使其應用范圍擴大，成為更有應用價值的技術。PCR技術是根據生物體內DNA復制的特點而建立的在體外經酶促反應將特定DNA序列進行高效和快速擴增的技術，它可將單一拷貝或低拷貝的待測核酸以指數形式擴增而達到用常規方法可