福林酚試劑法如何測定蛋白質含量
lowry法一般測量含量少于5微克的物質,耗費時間長約40-60分鐘.操作要嚴格計時;顏色深淺隨不同蛋白質變化,靈敏度高biuret法適用于1-20mg.用于快速測定.約20-30分鐘,但不太靈敏;由于不同蛋白質顯色相似,因此靈敏度比folin-酚試劑法差的很遠......閱讀全文
福林酚試劑法如何測定蛋白質含量
lowry法一般測量含量少于5微克的物質,耗費時間長約40-60分鐘.操作要嚴格計時;顏色深淺隨不同蛋白質變化,靈敏度高biuret法適用于1-20mg.用于快速測定.約20-30分鐘,但不太靈敏;由于不同蛋白質顯色相似,因此靈敏度比folin-酚試劑法差的很遠
蛋白質的定量測定——福林酚法(Folin—酚試劑法)
實驗原理 Folin—酚試劑法最早是由Lowry確定的測定蛋白質濃度的基本方法。以后在生物化學領域得到廣泛的應用。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這個方法的優點是靈敏度高,比雙縮脲法靈敏得多,缺點是費時較
蛋白質含量測定法福林酚法(Lowry法)
本法系依據蛋白質分子中含有的肽鍵在堿性溶液中與Cu2+螯合形成蛋白質-銅復合物,此復合物使酚試劑的磷鉬酸還原,產生藍色化合物,同時在堿性條件下酚試劑易被蛋白質中酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸還原呈藍色反應。在一定范圍內其顏色深淺與蛋白質濃度呈正比,以蛋白質對照品溶液作標準曲線,采用比色法測定供試品中蛋
植物組織中可溶性蛋白質含量的測定(福林-酚試劑法)
一、原理 福林(Folin)-酚試劑法結合了雙縮脲試劑和酚試劑與蛋白質的反應,其中包括兩步反應:第一步是在堿性條件下,與銅試劑作用生成蛋白質-銅絡合物;第二步是此絡合物將磷鉬酸、磷鎢酸試劑還原,生成磷鉬藍和磷鎢藍的深藍色混合物,顏色深淺與蛋白含量成正相關。在650nm比色測定的靈敏度比雙縮脲法高1
蛋白質含量測定實驗——folin—酚試劑法
蛋白質含量測定實驗可以用于:(1)測定蛋白質濃度;(2)檢測所提取的蛋白質含量。實驗方法原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(現在已可以訂購),近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即f
植物體內可溶性蛋白質含量的測定(福林-酚法)
該方法是雙縮脲法的發展,包括兩步反應:(1)在堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質—銅絡合物。(2)此絡合物將試劑磷鉬酸—磷鎢酸(FolIn試劑)還原,混合物深藍色(磷鉬藍和磷鎢藍混合物),顏色深淺與蛋白質含量成正比。此方法操作簡便,靈敏度比雙縮脲法高100倍,定量范圍為5~100μg蛋白質。Fol
福林酚法定量測定蛋白質
實驗概要本實驗用福林酚法(Folin—酚試劑法)測定了蛋白質的含量。實驗原理Folin—酚試劑法最早是由Lowry確定的測定蛋白質濃度的基本方法。以后在生物化學領域得到廣泛的應用。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏
olin—酚試劑法(lowry法)測蛋白質含量
一、實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(現在已可以訂購),近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生
蛋白質含量的測定:Folin酚試劑法(Lowry法)和考馬斯...
蛋白質含量的測定—Folin-酚試劑法(Lowry法)和考馬斯亮藍法 1.學習Folin-酚法測定蛋白質含量的原理和方法。 2. 進一步掌握分光光度法——求標準曲線、準確測定未知樣品、正確使用儀器。 ? 原理 ? 蛋白質濃度可以從它們
Folin酚試劑法測定蛋白質含量
一、 目的 掌握Folin-酚法測定蛋白質含量的原理和方法,熟悉分光光度計的操作。 二、原理 Folin-酚試劑法包括兩步反應:第一步是在堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質-銅絡合物;第二步是此絡合物將磷鉬酸-磷鎢酸試劑(Folin 試劑)還原,產生深藍色(磷鉬藍和磷鎢
福林酚法檢測提取物的總酚含量的原理
多酚類化合物在堿性溶液中,鎢鉬酸可以將多酚化合物定量氧化,自身被還原(使W6+變為W5+)生成藍色的化合物,藍色的深淺程度與含酚基團的數目成正比。如果試樣中含有其它分類化合物或其他還原物質,也會被同時測定。
酚試劑(Lowry)法測血清蛋白質含量
一、 相關理論1、 血清(漿)蛋白質是血清(漿)固體成分中含量最多、組成復雜、功能廣泛的一類化和物。2、 血清(漿)蛋白質的分類:目前已研究的有300 余種,已分離提純的有100 余種,大部分在肝臟合成。1) 鹽析法可將血漿蛋白分為白蛋白(Albumin, Alb 或A)和球蛋白(Globulin,
蛋白質含量的測定實驗——OLIN酚法
實驗方法原理FOLIN 酚法所用的試劑有兩部分組成。試劑甲可與蛋白質中的肽鍵起顯色反應, 試劑乙在堿性條件下極不穩定, 易被酚類化合物還原成藍色(蛋白質中的酚基將磷鉬酸-磷鎢酸還原成藍色復合物)。在一定條件下, 藍色強度與蛋白質的量成正比, 范圍約在25~250 μg/ ml 蛋白質濃度。實驗材料蛋
folin酚試劑法測定蛋白質含量的原理
此法的顯色原理與雙縮脲法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深藍色的原因是:在堿性條件下,蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物。 Folin—酚試劑中的磷鉬酸鹽—磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原,產生深藍色(
福林試劑的測定方法
將1ml標準蛋白溶液和5ml0.025mol/lPH7.5的磷酸緩沖液加入試管中,在40℃保溫10min,迅速加入1ml酶液,保溫15min后加入3ml10%的三氯乙酸中止反應。取濾液1ml加入0.55M的碳酸鈉溶液5ml和福林試劑0.5ml,40℃水浴10min顯色,在OD680處比色。
folin酚試劑法測定蛋白質含量的注意事項
進行測定時,加Folin—酚試劑時要特別小心,因為該試劑僅在酸性pH條件下穩定,但上述還原反應只在pH=10的情況下發生,故當Folin一酚試劑加到堿性的銅—蛋白質溶液中時,必須立即混勻,以便在磷鉬酸—磷鎢酸試劑 被破壞之前,還原反應即能發生。 此法也適用于酪氨酸和色氨酸的定量測定。[1]
植物體內可溶性的測定(福林-酚法)
實驗概要本文介紹了福林-酚法測定植物體內可溶性蛋白質含量的原理及操作步驟等。實驗原理該方法是雙縮脲法的發展,包括兩步反應:1. 在堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質—銅絡合物。2. ? 此絡合物將試劑磷鉬酸—磷鎢酸(FolIn試劑)還原,混合物深藍色(磷鉬藍和磷鎢藍混合物),顏色深淺與蛋白質含量成
蛋白質定量檢測方法——酚試劑法
取6支試管分別標號,前5支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,最后一支試管加待測蛋白質溶液,不加標準蛋白溶液,在室溫下放置30分鐘,以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照,于650nm波長處測定各管中溶液的吸光度值。優點:靈敏度高,對水溶性蛋白質含量的測定很有效。缺點:①費時,要精確控制操作時間;
蛋白測定方法之Folin—酚試劑法(Lowry法)
(一)實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(現在已可以訂購),近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產
蛋白測定方法介紹Folin—酚試劑法(Lowry法)
(一)實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(現在已可以訂購),近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產
LoWry法對可溶性蛋白含量檢測原理
LoWry法是雙縮脲法(Biuret)和福林酚法(Folin-酚)的結合與發展。其原理是蛋白質溶液用堿性銅溶液處理后,堿性銅試劑與蛋白質中的肽鍵作用產生雙縮脲反應,形成銅—蛋白質的絡合鹽。再加入酚試劑后,在堿性條件下,這種被作用的蛋白質上的酚類基團極不穩定,很容易還原酚試劑中的磷鎢酸和磷鉬酸,使
凱氏定氮法如何測定蛋白質的含量
(一)消化 1、準備6個凱氏燒瓶,標號。1、2、3號燒瓶中分別加入適當濃度的蛋白溶液1.0mL,樣品要加到燒瓶底部,切勿沾在瓶口及瓶頸上。再依次加入硫酸鉀-硫酸銅接觸劑0.3g,濃硫酸2.0mL,30%過氧化氫1.0mL。4、5、6號燒瓶作為空白對照,用以測定試劑中可能含有的微量含氮物質,對樣品測
鹽酸地匹福林的含量測定方法
照高效液相色譜法(通則0512)測定。供試品溶液取本品適量,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液。對照品溶液取鹽酸地匹福林對照品,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液。色譜條件與系統適用性要求見有關物質項下測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別
植物體內可溶性蛋白質含量的測定:LoWry法(勞里法)
【原理】 LoWry法是雙縮脲法(BIureT)和福林酚法(FolIn-酚)的結合與發展。其原理是蛋白質溶液用堿性銅溶液處理后,堿性銅試劑與蛋白質中的肽鍵作用產生雙縮脲反應,形成銅—蛋白質的絡合鹽。再加入酚試劑后,在堿性條件下,這種被作用的蛋白質上的酚類基團極不穩定,很容易還原酚試劑中的磷鎢酸和
Folin—酚試劑法(Lowry法)
實驗概要本文介紹了Folin—酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質的實驗原理、操作步驟及注意事項等。實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難,近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Fol
蛋白測定方法介紹Folin—酚試劑法所需試劑與器材
1.試劑(1)試劑甲:(A)10克Na2CO3,2克NaOH和0.25克酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸餾水中。(B)0.5克硫酸銅(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸餾水中,每次使用前,將50份(A)與1份(B)混合,即為試劑甲。(2)試劑乙:在2升磨口回流瓶中
福林酚比色法原理
原理蛋白質與福林(Folin)-酚試劑反應,產生藍色復合物。作用機理主要是蛋白質中的肽鍵與堿性銅鹽產生雙縮脲反應,同時也由于蛋白質中存在的酪氨酸與色氨酸同磷鉬酸-磷鎢酸試劑反應產生顏色。呈色強度與蛋白質含量成正比,是檢測可溶性蛋白質含量最靈敏的經典方法之一。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加
Bradford法蛋白質含量的測定
原理:這一方法基于考馬斯亮藍G-250 有紅藍兩種不同的形式。在一定濃度的乙醇及酸性條件下,可配成淡紅色的溶液,當與蛋白質結合后,產生藍色化合物,反應迅速而穩定。反應化合物在 465-595nm處有最大的光吸收值,化合物顏色的深淺與蛋白濃度的高低成正比關系,因此可檢測595nm的光吸收值的大
蛋白質含量測定實驗——Bradford法
蛋白質含量測定實驗可以用于:(1)測定蛋白質濃度;(2)檢測所提取的蛋白質含量。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒牛血清NaCl考馬斯亮藍儀器、耗材分光光度計離心機實驗步驟1. ?分別在兩組微量離心管中各加入0.5 mg/ml 牛血清白蛋白,以 0.15 mmol/l NaCl補足至100 ul,同時以兩管
抗壞血酸含量測定(-2,6-一二氯酚靛酚法)
一、目的學習維生素 C 的生理功能和性質,掌握用 2 , 6 一二氯酚靛酚法測定維生素 C 的原理和方法。二、原理維生素 C 是一種水溶性維生素,是人類營養中最重要的維生素之一,人體缺乏維生素 C 時會出現壞血病,因此它又被稱為抗壞血酸。此外維生素 C 還具有預防和治療感冒以及抑制致癌物質產生的作用