關于細胞轉染實驗的材料器材介紹
(1)材料 293T細胞、MyoD表達質粒和EGFP表達質粒、DMEM培養基、鏈霉素/青霉素(雙抗)、FCS(小牛血清)、PBS(磷酸鹽緩沖溶液)、胰酶/EDTA消化液、轉染試劑(TransFast) (2)器材 20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip頭酒精燈、廢液缸、血球計數板、渦旋振蕩器、恒溫水浴箱、臺式離心機、35mm培養皿、轉染管、15ml離心管、觀察用倒置顯微鏡熒光顯微鏡和CCD......閱讀全文
關于細胞轉染實驗的材料器材介紹
(1)材料 293T細胞、MyoD表達質粒和EGFP表達質粒、DMEM培養基、鏈霉素/青霉素(雙抗)、FCS(小牛血清)、PBS(磷酸鹽緩沖溶液)、胰酶/EDTA消化液、轉染試劑(TransFast) (2)器材 20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip頭酒精燈、廢液缸、血球計數板、
細胞轉染實驗的材料器材
(1)材料293T細胞、MyoD表達質粒和EGFP表達質粒、DMEM培養基、鏈霉素/青霉素(雙抗)、FCS(小牛血清)、PBS(磷酸鹽緩沖溶液)、胰酶/EDTA消化液、轉染試劑(TransFast)(2)器材20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip頭酒精燈、廢液缸、血球計數板、渦旋振蕩器、恒溫
細胞轉染實驗的實驗材料和器材
(1)材料293T細胞、MyoD表達質粒和EGFP表達質粒、DMEM培養基、鏈霉素/青霉素(雙抗)、FCS(小牛血清)、PBS(磷酸鹽緩沖溶液)、胰酶/EDTA消化液、轉染試劑(TransFast)(2)器材20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip頭酒精燈、廢液缸、血球計數板、渦旋振蕩器、恒溫
細胞轉染實驗所需材料和器材
(1)材料293T細胞、MyoD表達質粒和EGFP表達質粒、DMEM培養基、鏈霉素/青霉素(雙抗)、FCS(小牛血清)、PBS(磷酸鹽緩沖溶液)、胰酶/EDTA消化液、轉染試劑(TransFast)(2)器材20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip頭酒精燈、廢液缸、血球計數板、渦旋振蕩器、恒溫
細胞轉染實驗介紹
一、實驗目的學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法——脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。二、實驗原理上圖所示是脂質體介導轉染的示意圖,它顯示了外源質粒進入細胞的一般過程。外源基因進入細胞主要有四種方法:電擊法、磷酸鈣法和脂質體介
細胞凍存的實驗器材介紹
(一)儀器1.?凈化工作臺2. 離心機3.?恒溫水浴箱4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)5.?倒置相差顯微鏡6. 培養箱7. 液氮冰箱(二)玻璃器皿1. 吸管(彎頭、直頭)2. 培養瓶3. 玻璃瓶(250ml、100ml)4. 廢液缸(三)塑料器皿1. 吸頭2. 槍頭3. 膠塞4. 移液管(10
細胞轉染實驗的實驗步驟細胞轉染
1)轉染試劑的準備A.將400ul去核酸酶水加入管中,震蕩10秒鐘,溶解脂狀物。B.震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存,使用前還需震蕩。2)選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質體體積:DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的DNA,震蕩
細胞凍存的所需儀器材料介紹
(一)儀器1. 凈化工作臺2. 離心機3. 恒溫水浴箱4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)5. 倒置相差顯微鏡6. 培養箱7. 液氮冰箱(二)玻璃器皿1. 吸管(彎頭、直頭)2. 培養瓶3. 玻璃瓶(250ml、100ml)4. 廢液缸(三)塑料器皿1. 吸頭2. 槍頭3. 膠塞4. 移液管(10
細胞轉染實驗的步驟介紹
一、細胞傳代 (1)試驗準備:200ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養皿,離心管。 (2)棄掉培養皿中的培養基,用1ml的PBS溶液洗滌兩次。 (3)用Tip頭加入1mlTrypsin液,消化1分鐘(37。C,5%CO2)
關于細胞轉染實驗的基本原理介紹
外源基因進入細胞主要有四種方法:電擊法、磷酸鈣法、脂質體介導法和病毒介導法。電擊法是在細胞上短時間暫時性的穿孔讓外源質粒進入;磷酸鈣法和脂質體法是利用不同的載體物質攜帶質粒通過直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因進入細胞;病毒法是利用包裝了外源基因的病毒感染細胞的方法使得其進入細胞。但是由于電擊
關于細胞轉染的技術介紹
國際上推出了一些陽離子聚合物基因轉染技術,以其適用宿主范圍廣,操作簡便,對細胞毒性小,轉染效率高受到研究者們的青睞。其中樹枝狀聚合物(Dendrimers)和聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的轉染性能最佳,但樹枝狀聚合物的結構不易于進一步改性,且其合成工藝復雜。聚乙烯亞胺是
關于細胞轉染的基本介紹
轉染(transfection)是細胞在一定條件下主動或被動導入外源DNA片段而獲得新的表型的過程。 [1] 從本質上講,和轉化沒有根本的區別。無論是轉染還是轉化,其關鍵因素都是用氯化鈣處理大腸桿菌細胞,以提高細胞膜的通透性,從而使外源DNA分子能夠容易進入細胞內部。所以在習慣上,人們往往也通稱
關于轉染細胞篩選的介紹
1、確定抗生素作用的最佳濃度: 不同的細胞株對各種抗生素有不同的敏感性,因此在篩選前要做預試驗,確定抗生素對所選擇細胞的最低作用濃度。 1) 提前24 小時在96 孔板或24 孔板中接種細胞8 孔,接種量以第二天長成25%單層為宜,置CO2 孵箱中37℃培養過夜。 2) 將培養液換成含抗生
巨噬細胞培養常用的實驗器材介紹
1、超凈工作臺:也稱凈化工作臺,側流式、直流式和外流式三大類。2、無菌操作間:一般由衣間,緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒好的無菌物品等。3、操作間:普通培養箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4
細胞轉染實驗的實驗原理
外源基因進入細胞主要有四種方法:電擊法、磷酸鈣法、脂質體介導法和病毒介導法。電擊法是在細胞上短時間暫時性的穿孔讓外源質粒進入;磷酸鈣法和脂質體法是利用不同的載體物質攜帶質粒通過直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因進入細胞;病毒法是利用包裝了外源基因的病毒感染細胞的方法使得其進入細胞。但是由于電擊法和
細胞轉染實驗的實驗步驟
細胞傳代(1)試驗準備:200ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養皿,離心管。(2)棄掉培養皿中的培養基,用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3)用Tip頭加入1mlTrypsin液,消化1分鐘(37。C,5%CO2)。用手輕拍培養瓶壁,
細胞轉染實驗的實驗目的
學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法—脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。
細胞轉染實驗的原理
外源基因進入細胞主要有四種方法:電擊法、磷酸鈣法、脂質體介導法和病毒介導法。電擊法是在細胞上短時間暫時性的穿孔讓外源質粒進入;磷酸鈣法和脂質體法是利用不同的載體物質攜帶質粒通過直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因進入細胞;病毒法是利用包裝了外源基因的病毒感染細胞的方法使得其進入細胞。但是由于電擊法和
細胞轉染實驗的目的
學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法—脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。
細胞轉染實驗的步驟
細胞傳代(1)試驗準備:200ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養皿,離心管。(2)棄掉培養皿中的培養基,用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3)用Tip頭加入1mlTrypsin液,消化1分鐘(37。C,5%CO2)。用手輕拍培養瓶壁,
細胞轉染實驗目的
學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法—脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。
昆蟲細胞轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒
昆蟲細胞轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒
昆蟲細胞轉染實驗
實驗材料昆蟲細胞試劑、試劑盒胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟1. ?接種2x106個Sf9細胞于60 mm 培養皿,在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養,于27℃培養30~60 min,讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿,吸取40 ul 無菌
真核細胞轉染實驗
學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法——脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。實驗材料真核細胞試劑、試劑盒脂質體 轉染液儀器、耗材CO2孵箱 離心管 6孔板
昆蟲細胞轉染實驗
實驗材料 昆蟲細胞試劑、試劑盒 胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材 培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟 1. ?接種2×106個Sf9細胞于60 mm 培養皿,在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養,于27℃培養30~60 min,讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿,吸取40
真核細胞轉染實驗
真核細胞的轉染 實驗材料 真核細胞 試劑、試劑盒 脂質體 轉染液
細胞轉染實驗的實驗步驟細胞傳代
(1)試驗準備:200ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養皿,離心管。(2)棄掉培養皿中的培養基,用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3)用Tip頭加入1mlTrypsin液,消化1分鐘(37。C,5%CO2)。用手輕拍培養瓶壁,觀察到細
關于涂布平板法的實驗原理和器材介紹
一、涂布平板法的實驗原理: 在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養基表面形成單個的菌落。 二、涂布平板法的實驗器材: 1.活材料:蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)菌劑。 2.培養基:牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基 3.器材:90
體細胞雜實驗的器材和方法
實驗材料儀器1.實驗材料:煙草或其它植物無菌苗的葉片。胡蘿卜肉質根誘導的松軟愈傷組織或懸浮培養細胞。2.試劑2.1酶液及洗滌液,同植物原生質體的分離和培養實驗。2.2PEG溶液2.3高pH高鈣稀釋液2.4DPD培養基同植物原生質體的分離和培養實驗。實驗方法所有操作均在超凈工作臺上進行。1.原生質體的