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    什么是引物?

    引物,是指在核苷酸聚合作用起始時,刺激合成的,一種具有特定核苷酸序列的大分子,與反應物以氫鍵形式連接,這樣的分子稱為引物。引物通常是人工合成的兩段寡核苷酸序列,一個引物與靶區域一端的一條DNA模板鏈互補,另一個引物與靶區域另一端的另一條DNA模板鏈互補,其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點,核酸聚合酶可由其3'端開始合成新的核酸鏈。體外人工設計的引物被廣泛用于聚合酶鏈反應、測序和探針合成等。......閱讀全文

    什么是引物?

    引物,是指在核苷酸聚合作用起始時,刺激合成的,一種具有特定核苷酸序列的大分子,與反應物以氫鍵形式連接,這樣的分子稱為引物。引物通常是人工合成的兩段寡核苷酸序列,一個引物與靶區域一端的一條DNA模板鏈互補,另一個引物與靶區域另一端的另一條DNA模板鏈互補,其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點,核酸聚合酶

    什么是上游引物和下游引物

    雖然這個問題很簡單,但我怎么發覺挺難回答的......上游引物就是和要擴增基因片斷上游序列結合的引物(引物就是單鏈寡聚核苷酸,基因擴增需要從引物開始),同理,下游引物指與目的基因片斷下游序列結合者。具體示意如下:(上下兩條長線代表DNA模板)5'-----------------------

    什么是特異引物?

    ?多數情況下,我們要研究的基因序列都能在數據庫中找到現成的序列。如果你要得到某一段序列的話,針對這個序列設計引物就行了。這樣得到的引物每一個位置上的堿基都是確定的,這樣的引物就叫“特異引物”。特異引物由于堿基是確定的,所以由這個序列所計算出的Tm值以及PCR退火溫度都是確定的。一般特異引物的退火溫度

    什么是簡并引物?

    簡并引物是指代表編碼單個氨基酸所有不同堿基序列可能性引物的混合物。PCR為了增加特異性,可以參考密碼子使用表,根據不同生物的堿基使用偏好,減少簡并性。簡并度越低,產物特異性越強,設計引物時應盡量選擇簡并性小的氨基酸,并避免引物3'末端簡并。

    什么是錨定引物

    錨定引物是在擴未知序列(RACE或genome walking)時,與未知序列一側結合的引物,基本都是試劑盒里自帶的

    什么是引物延伸分析?

    引物延伸分析(primer extension analysis)主要用于mRNA 5′端作圖。poly(A)+RNA首先與過量5′端標記的且與靶RNA互補的單鏈寡核苷酸引物雜交,然后用反轉錄酶延伸這個引物。產生的cDNA與RNA模板互補且長度與引物5′端和RNA 5′端之間的距離相等。該法在mRN

    什么是引物?有什么功能特點?

    引物,是指在核苷酸聚合作用起始時,刺激合成的,一種具有特定核苷酸序列的大分子,與反應物以氫鍵形式連接,這樣的分子稱為引物。引物通常是人工合成的兩段寡核苷酸序列,一個引物與靶區域一端的一條DNA模板鏈互補,另一個引物與靶區域另一端的另一條DNA模板鏈互補,其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點,核酸聚合酶

    什么是上下游引物

    引物(Primer)在聚合作用的起始時,可以刺激合成另一種大分子,并與反應物以共價鍵形式連接的序列。在核酸化學中,引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段,可結合在核酸鏈上與之互補的區域,其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點,核酸聚合酶可由其3′端開始合成新的核酸鏈。體外人工設計的引物被廣泛用于聚合酶鏈反

    什么是上下游引物?

    引物(Primer)在聚合作用的起始時,可以刺激合成另一種大分子,并與反應物以共價鍵形式連接的序列。在核酸化學中,引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段,可結合在核酸鏈上與之互補的區域,其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點,核酸聚合酶可由其3′端開始合成新的核酸鏈。體外人工設計的引物被廣泛用于聚合酶鏈反

    什么是上下游引物

    引物(Primer)在聚合作用的起始時,可以刺激合成另一種大分子,并與反應物以共價鍵形式連接的序列。在核酸化學中,引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段,可結合在核酸鏈上與之互補的區域,其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點,核酸聚合酶可由其3′端開始合成新的核酸鏈。體外人工設計的引物被廣泛用于聚合酶鏈

    什么是引物二聚體

    1、引物二聚體是引物的3端間相互錯配擴增形成的。2、引物二聚體的出現是必然的,只是或多或少的問題,電泳時看不到引物二聚體帶也不代表沒有二聚體出現,只是含量低我們 的肉眼看不到而已。提高PCR嚴謹性(包括提高退火溫度,降低引物濃度等)可大大降低二聚體的濃度。

    什么是引物二聚體

    1、引物二聚體是引物的3端間相互錯配擴增形成的。2、引物二聚體的出現是必然的,只是或多或少的問題,電泳時看不到引物二聚體帶也不代表沒有二聚體出現,只是含量低我們 的肉眼看不到而已。提高PCR嚴謹性(包括提高退火溫度,降低引物濃度等)可大大降低二聚體的濃度。

    什么是引物二聚體,它對PCR反應有什么影響

    是在pcr反應中,兩條引物上的互補堿基相結合形成的聚合體,這種聚合體出現了,就相當于原本可以擴增的原料鏈減少了,即會導致擴增的效率降低,所以最好能避免這種物質的出現.

    引物是如何合成的?

    目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。DNA合成儀有很多種, 主要都是由ABI/PE 公司生產,無論采用什么機器合成,合成的原理都相同,主要差別在于合成產率的高低,試劑消耗量的不同和單個循環用時的多少。亞磷酰胺三酯法合成DNA片段,具有高效、快速的偶聯以及起始反應物比較穩定的特點。亞磷酰胺三酯法是

    引物是如何合成的?

    目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。DNA合成儀有很多種,無論采用什么機器合成,合成的原理都相同,主要差別在于合成產率的高低,試劑消耗量的不同和單個循環用時的多少。(1)??? 去保護:加入Deblocking脫去堿基上5'- OH的保護基團DMT,獲得游離的5'- OH;(2)

    PCR引物是什么

    聚合酶鏈式反應簡稱PCR(Polymerase Chain Reaction) (又稱:多聚酶鏈式反應) PCR是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火(復性)及適溫延伸等反應組成一個周期,循環進行,使目的DNA得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。它不僅可

    PCR引物和測序引物有什么區別

    一、定義不同:PCR是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火(復性)及適溫延伸等反應組成一個周期,循環進行,使目的DNA得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。測序引物分自帶引物和通用引物,自帶引物為客戶自行設計的PCR擴增引物或者載體及目的片段上設計的引物進

    上游引物和下游引物有什么區別

    簡單的說上游引物就是和要擴增基因片斷上游序列結合的引物,下游引物指與目的基因片斷下游序列結合者.上游引物:DNA分子兩端不一樣,因為核苷酸分子不是對稱的,5'位有個磷酸,3'位是-OH 就是:磷酸端和羥基端。DNA復制總是從5’端到3’端,因為DNA聚合酶只能往3’端加核苷酸。下游引

    通用引物和隨機引物是一個意思嗎

    不是一回事。隨機引物:我們在不知道研究目標任何信息情況下,利用合成好了的任意序列的引物(可以買得到),可能擴增出來的產物條帶數目不定;隨機引物可能會在全基因組范圍內有結合位點。通用引物:一般是指某基因外圍保守序列。雖然這個基因可能是序列多變的,(如同功酶),但兩側翼序列則是保守的。利用倆側翼保守序列

    設計引物時需要避免引物之間形成什么而造成引物自連。

    設計引物時需要避免引物之間形成_堿基互補配對。而造成引物自連。相同末端或相同黏性末端或相同平末端。末端特指雙鏈DNA分子的端位堿基,是專用名詞,不可以用在單鏈引物上。且引物之間的堿基互補配對不一定是所有堿基都能夠互補配對,少量配對也會使兩種引物結合在一起,從而不能獲得特異性DNA產物。

    測序引物是怎么設計的

    在互補鏈設計的dna引物序列。一般是pcr產物的下游引物,如果連接到載體上可以使用載體通用的下游測序引物。

    chip實驗的input的引物是目的基因的引物嗎

    引物(primer),又名引子。是一小段單鏈DNA或RNA,作為DNA復制的起始點,在核酸合成反應時,作為每個多核苷酸鏈進行延伸的出發點而起作用的多核苷酸鏈,在引物的3′-OH上,核苷酸以二酯鏈形式進行合成,因此引物的3′-OH,必須是游離的。之所以需要引物是因為在DNA合成中DNA聚合酶僅僅可以把

    PCR引物濃度是如何設定的

    >>> 一般都稀釋成應用液,常用濃度是10uM/L也就是10pM/L.這樣的話,20ul體系加1ul,50ul體系加2ul,方便使用!至于引物會不會降解的問題,估計高濃度比低濃度保存時間長說法是對的。但是,通常引物在20度放半年都沒有問題,如果不是經常用,可以先取出一部分來用,其余都放-80度保存,

    PCR技術是如何合成引物的

    目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。亞磷酰胺三酯法合成DNA片段,具有高效、快速的偶聯以及起始反應物比較穩定的特點。亞磷酰胺三酯法是將DNA固定在固相載體上完成DNA鏈的合成的,合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的,相鄰的核苷酸通過3′→5′磷酸二酯鍵連接。第一步是將預先連接在固相載體

    引物的Tm值是什么

    負責引物合成的公司會給你引物的詳細信息,其中有理論tm值,應該是和這個公式tm=2*(a+t)+4*(g+c)計算的一樣,你在進行調整優化即可。

    溶解引物需要什么水

    先離心!然后加入適量的水或TE溶解。一般配制成較高濃度的母液(約100μM),保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。引物濃度不宜偏高,濃度過高有兩個弊端:一是容易形成引物二聚體(primer-dimer),二是當擴增微量靶序列并且起始材料又比較粗時,容易產

    拿到引物之后先做什么?

    一般由公司合成好的引物,最終發貨的都是干粉形式。由于干粉是很細微的干燥粉末,肉眼幾乎不可見,同時又很容易飛揚起來。所以在接到引物管以后,切記不要急于打開管蓋。而是要先保持蓋住狀態、把管子放到離心機里做短暫離心,使干粉收集到管底。然后才可開蓋、進行下一步的溶解。

    需要什么級別的引物?

    根據實驗需要,確定訂購引物的純度級別。應用引物長度要求純度級別要求一般PCR擴增< 60baseHEPD>60 basePAGE診斷PCR擴增< 40baseHEPD, PAGEDNA測序20base左右HEPD亞克隆,點突變等根據實驗要求定HEPD, PAGE,HPLC基因構建(全基因合成)根據實

    用什么溶解引物最合適?

    常用的溶劑是水或者TE緩沖液(pH7.4——8.0),兩者在實際實驗中都是常用的。一般認為,TE緩沖液比較穩定,能提供穩定的pH環境,適合于保存引物(以及質粒或基因組DNA)。但也有人認為,TE中的EDTA分子會影響后續PCR的效率。如果您很注重PCR效率的話就要考慮到這一點。而雙蒸水很易得,操作方

    引物的化學本質是什么?

    引物是一小段DNA或RNA,在PCR中是DNA,細胞內一般是RNA。

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