關于異硫氰酸胍的提取介紹
異硫氰酸胍法提取制備模板核酸此法主要用于RNA的提取.標本為組織細胞及血清等. 1、異硫氰酸胍消化液 異硫氰酸胍4mol/L 檸檬酸鈉(PH7.0)25mmol/L 十二烷基肌酸鈉0.5% β-巰基乙醇0.1mol/L 2、消化方法:用50~100ul細胞懸液及血清,加等體積的異硫氰酸胍消化液振混勻后,或65℃1小時,或室溫放置數分鐘,然后加1/10體積的3mmol/LpH5.2的醋酸鈉緩沖液,再加等體積的酚:氯仿,用力振搖約10s,10000r/min,離心5min,取上清加等體積異丙醇-20℃放置3h后,14000r/min離心15min,沉定用75%冰冷乙醇離心洗滌1~2次,真空干燥,沉淀用TE緩沖液溶解即可用于逆轉錄PCR擴增,或放-20℃保存。......閱讀全文
關于異硫氰酸胍的提取介紹
異硫氰酸胍法提取制備模板核酸此法主要用于RNA的提取.標本為組織細胞及血清等. 1、異硫氰酸胍消化液 異硫氰酸胍4mol/L 檸檬酸鈉(PH7.0)25mmol/L 十二烷基肌酸鈉0.5% β-巰基乙醇0.1mol/L 2、消化方法:用50~100ul細胞懸液及血清,加等體積的異硫氰
用異硫氰酸胍和有機溶劑提取RNA
收集細胞,離心5000r/min ,5分鐘,棄上清,加入異硫氰酸胍變性液(異硫氰酸胍4mol/L;檸檬酸鈉25mmol/L,Sarkosy10.5%,β-巰基乙醇0.1mol/L)500ml,混勻,振蕩10秒,加2 mol/L醋酸鈉50ml,水飽和酚500m?l和氯仿/異戊醇(49:1)100m?l
用異硫氰酸胍(guanidinium-isothiocyanate)和有機溶劑提取RNA
收集細胞,離心5000r/min ,5分鐘,棄上清,加入異硫氰酸胍變性液(異硫氰酸胍4mol/L;檸檬酸鈉25mmol/L,Sarkosy10.5%,β-巰基乙醇0.1mol /L)500ml,混勻,振蕩10秒,加2 mol/L醋酸鈉50ml,水飽和酚500m l和氯仿/異戊醇(49:1)1
異硫氰酸胍的基本信息介紹
簡稱 GITC 外觀:白色結晶 熔點:115-120℃ PH(4%水溶液):4.5-7.0 紫外吸收(300nm,6M):≤0.1 abs unit 紫外吸收(410nm,6M):≤0.05abs unit 干燥失重:≤0.5% 用途:用于變性裂解細胞;提取RNA和DNA。無RNA
動物組織細胞總RNA的提取(異硫氰酸胍法和TRIzol法)1
一、實驗原理RNA是基因表達的中間產物,存在于細胞質與核中。對RNA進行操作在分子生物學中占有重要地位。獲得高純度和完整的RNA 是很多分子生物學實驗所必需的,如Northern雜交、cDNA合成及體外翻譯等實驗的成敗,在很大程度上取決于RNA的質量。由于細胞內的大部分RNA是以核蛋白復合體的形
動物組織細胞總RNA的提取(異硫氰酸胍法和TRIzol法)2
(二)TRIzol試劑提取RNA1.取新鮮動物組織0.1~0.2g置于組織勻漿器中,加入預冷的Trizol液 1ml 于玻璃勻漿器中,在冰浴中迅速勻漿15~30s,以充分研碎組織。然后將細胞懸浮液吸入另一1.5ml Ep管中,于室溫下靜置5min。2.加入200μl氯仿,劇烈振搖15s混勻后,室溫靜
關于香菇多糖的提取的提取方法介紹
香菇多糖屬于極性大分子化合物,其特定的結構與免疫活性密切相關。一般認為:增加多糖溶解度有利于提高其生理活性;中等相對分子質量多糖的活性超過過高的或過低的相對分子質量多糖;可溶于熱水的多糖被證實有抗腫瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用熱水及稀堿溶液,避免在強酸、堿溶液中進行,否則極易造成多糖中糖苷鍵
關于碳醇提取的要求和提取介紹
1、碳-醇提取的要求: 質量能保證的純工業用醇,可用于提取乙醇。如沒有乙醇,也可以用試劑純的甲醇。要取1升溶劑蒸餾并蒸干,來檢查它的雜質含量。只要殘渣小于5毫克,這種溶劑就可以用。 2、碳-醇提取的乙醇提取: 從碳中除去殘存的氯仿的方法,是往碳上吹入已預凈化的溫熱空氣(在索氏提取器內)并通
關于溶劑提取法的介紹
一般指從 中草藥中提取有效部位的方法,根據中草藥中各種成分在溶劑中的 溶解性,選用對活性成分溶解度大、對不需要溶出成分溶解度小的溶劑,而將有效成分從藥材組織內溶解出來的方法叫溶劑提取法。當溶劑加到中草藥原料中時,溶劑由于擴散。 滲透作用通過細胞壁透入細胞內,溶解可溶性物質,而造成細胞內外的濃度差
關于碳醇提取的內容介紹
碳-醇提取,用碳吸收法測量水中總有機污染物,當大量水樣在一定條件下通過活性碳裝置后,取出含有吸附物的活性碳,干燥后用氯仿提取,再用蒸餾法除去氯仿后稱量污染物殘渣,此值稱為碳—氯仿提取物(CCE)。在氯仿提取以后再用乙醇提取,然后蒸餾除去乙醇、稱重,可測得另一些有機物,此值叫碳—醇提取物(CAE)
關于核蛋白的提取方法介紹
細胞和動物組織核蛋白的提取方法 產品組成 310001 310002 規格 50 assays 100 assays Buffer A (Cytoplasmic Extraction Reagent) 10ml 20ml Buffer B (Nuclear Extraction Reag
關于葉黃素的提取方法介紹
1、干燥法 有一種新型的滾筒烘干機,烘干和重擊金盞花和葉黃素。當擺錘的波動率在70%~90%時,葉黃素的含量由干燥時長決定;當干燥的時長一致時,70℃下所得葉黃素的量要比60℃干燥條件下少 。 2、有機溶劑抽提法 有機溶劑抽提法是應用最多的提取葉黃素方法。存在于萬壽菊中的葉黃素在乙醇中溶解
關于超聲提取法的優點介紹
1、超聲提取法— 提取效率高 超聲波獨具的物理特性能促使植物細胞組織破壁或變形,使中藥有效成分提取更充分,提取率比傳統工藝顯著提高達50—500%; 2、超聲提取法—?提取時間短 超聲波強化中藥提取通常在24—40分鐘即可獲得最佳提取率,提取時間較傳統方法大大縮短2/3以上,藥材原材料處理
關于蔗糖酶的提取方法介紹
1、酵母提純 酵母離心(8 000 r/min)15 min后收集菌體。將收集到的菌體用蒸餾水洗滌,離心,再洗滌,重復數次,直到菌體呈白色,傾出上清液,將不含雜質的干凈的酵母保存待用。? 2、粗酶液的制備 準確稱取離心分離后的酵母10 g,加入60 mL 0.5 mmol/L的SDS溶液溶
關于黃芩苷的提取工藝介紹
將黃芩投入12倍(8倍)熱水中煮沸30分鐘,合并兩次煎液,用鹽酸調節pH l~2,在80℃下保溫30分鐘,放置,過濾,收集沉淀,加95%乙醇洗2~3次.抽濾,60℃下干燥,得黃芩甙粗品。將粗品混懸予10倍量水中,40%氫氧化鈉調節pH至6.5-7.0,加活性炭,80℃保溫30分鐘,加等量乙醇,抽
關于磁珠法核酸提取的介紹
磁珠法核酸提取試劑盒,是生物科學和納米材料科學二者合一的高新技術產品,是我國核酸提取純化技術的一次大的突破,它徹底的解決了我國核酸提取純化長期依賴進口的局面。 自沃森、克里克的DNA雙螺旋模型誕生,生物學進入到了一個全新的時代,在生物學界言必DNA,論必中心法則,對DNA的提取成為生物醫藥領域
關于索氏提取器的優點介紹
從固體物質中萃取化合物的一種方法是,用溶劑將固體長期浸潤而將所需要的物質浸出來,即長期浸出法。此法花費時間長、溶劑用量大、效率不高。 在實驗室多采用脂肪提取器(索氏提取器)來提取。脂肪提取器(如圖1《索氏提取器》所示) 就是利用溶劑回流及虹吸原理,使固體物質連續不斷地被純溶劑萃取,既節約溶劑,
關于蝦青素的提取方法介紹
目前蝦青素的生產主要有化學合成和天然提取兩種方式,化學合成的蝦青素不僅價格昂貴,而且分子結構生物學功能、應用效果及生物安全性能方面和天然蝦青素存在顯著差異,進而促使天然蝦青素的提取逐漸占據主導地位。 隨著對蝦青素提取方法研究不斷深入,蝦青素生產工藝得到不斷優化和升級,尤其是在蝦青素的分離和提純
關于檸檬酸的提取過程介紹
發酵結束后,要對發酵醛進行處理。表面發酵要即時把菌蓋和發酵液分開,再用少量水洗滌菌蓋和淺盤,發酵液和洗水合并;固體發酵中的檸檬酸要用水浸出,水溫80℃,浸出2~3次,浸水合并。發酵酸用壓濾機過濾,濾液和洗水合并,打入濾液槽。檸檬酸與鈣鹽和鈣堿反應生成檸檬酸鈣從液相中沉淀出來,與可溶性雜質分開。酸
關于人參皂苷的提取方法介紹
一、一般取法 水提取法,有機溶劑提取法,滲漉法,蒸餾法,超聲浸漬法。 二、萃取法 超臨界流體萃取技術是近代化工分離中的一種新型分離技術,超臨界CO2萃取是采用CO2作溶劑,超臨界狀態下的CO2流體密度和介電常數較大,對物質溶解度很大,并隨壓力和溫度的變化而急劇變化,因此,不僅對某些物質的溶
關于魚精蛋白的提取和純化介紹
1、魚精蛋白的提取: 成熟精巢組織——均漿——硫酸酸解——NACL溶液提取——四層紗布過濾——加乙醇沉淀雜蛋白——離心——上清液——加TCA溶液沉淀——離心——魚精蛋白硫酸鹽 [1] 2、魚精蛋白的純化: 分離提取后的魚精蛋白必須純化。利用魚精蛋白的電荷和分子大小,分別采用聚丙烯酰胺等電聚
關于柚皮苷的提取方法的介紹
柚苷易溶于酒精和堿液,也能溶于熱水,根據這一特性,通常采用堿法和熱水法提取。其生產工藝流程如下:柚皮→粉碎→浸石灰水或熱水浸提→過濾→冷卻沉淀→分離→干燥和粉碎→成品。 1、熱水法 熱水法提取過程如下:柚皮粉碎后,加3~4倍的水,加熱煮沸30min,壓榨得濾液。此步驟可重復2~3次。將濾液濃
關于青蒿素的提取純化的介紹
分離純化工藝主要有溶劑外加能量協助提取法、提取重結晶法、超臨界CO2萃取法和溶劑提取層析法。 溶劑提取重結晶法一般采用的溶劑汽油法,乙醇法和堿水提取酸沉淀法進行生產,此類方法明顯增加了青蒿素植物的有效利用率。 堿水提取酸沉淀法:取一定量的青蒿枝葉干粉加入乙醇攪拌浸提,得到乙醇提取液,減壓干燥
關于膠原蛋白的堿法提取的介紹
堿法提取即利用一定濃度的堿在一定的外界條件下提取膠原蛋白,堿處理法中常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等,用氫氧化鈉浸提時效果較好。一般的是把樣品勻漿后,用堿溶液多次溶脹后,再離心提取。但由于易引起蛋白質變性,如膠原肽鍵水解,含羥基、疏基的氨基酸全部被破壞;所得產物等電點pH值較低,天冬酞胺和
關于甾體皂甙的提取分離的介紹
皂甙是一類極性較強的大分子化合物,不容易結晶,易溶于水和醇,難溶于有機溶劑,而且在同一植物中往往有很多結構相近的皂甙共存,更增加了分離純化的困難。一般采取先用甲醇或含水乙醇提取,然后將醇浸膏懸浮于水,用水飽和的正丁醇萃取,即得到總皂甙。粗皂甙的分離除使用常規的正相硅膠柱層析外,還可選用反相硅膠、
組織和細胞RNA的制備——(異硫氰酸胍法)
[試劑主要]1.CSB緩沖液:42mM檸檬酸鈉;0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基,N甲基甘氨酸鈉);0.2 mM β-巰基乙醇。2.變性液:異硫氰酸胍(終濃度 4 M)25g、CSB緩沖液 33ml,混合直至完全溶解,可在65℃助溶。4℃保存備用。3.2 M乙酸鈉:pH 4
關于提取胡蘿卜素的鑒定介紹
1、制備濾紙條:取18cm×30cm濾紙條,于距底端2cm處劃基線,取ABCD四個點。 2、點樣:用最細注射器針頭分別吸取標準樣品和提取樣品在A、D和B、C點樣,吹干。 3、層析:將濾紙卷成筒狀并固定,放到盛有1cm深石油醚的密封容器中層析。 4、觀察:取出濾紙條,使石油醚充分揮發后觀察層
關于萃取法提取白藜蘆醇的介紹
1、微波萃取 微波萃取是由于植物細胞在微波場中吸收微波能后溫度迅速上升,膨脹破裂,從而有利于萃取出植物中的有效成分的方法。此種方法在實驗室研究中比較常用。 2、超臨界二氧化碳萃取 超臨界CO2萃取是一種以超臨界狀態下的CO2流體為溶劑來提取或分離混合物中的某些組分的過程,超臨界CO2的特點
關于環烯醚萜的提取分離介紹
提取:環烯醚萜苷類成分一般采用溶劑法提取,常選用的提取溶劑為水、甲醇、乙醇、丙酮等溶劑。用水作提取溶劑時,需在藥材中拌入碳酸鈣或氫氧化鋇,以防止酶和有機酸的影響。 分離:提取液減壓濃縮后預先用乙醚或石油醚脫脂,再用正丁醇萃取出環烯醚萜苷類成分;或將除脂后的水提液通過活性炭或大孔吸附樹脂柱,先用
關于超聲波提取法的優點介紹
1、超聲波提取法— 提取效率高:超聲波獨具的物理特性能促使植物細胞組織破壁或變形,使中藥有效成分提取更充分,提取率比傳統工藝顯著提高達50—500%; 2、超聲波提取法—?提取時間短:超聲波強化中藥提取通常在24—40分鐘即可獲得最佳提取率,提取時間較傳統方法大大縮短2/3以上,藥材原材料處理