適配體的篩選方法
適配體靶標范圍廣,靶標的大小與可溶性均不同,因此應用 SELEX 技術篩選核酸適配體可以采用不同的具體操作方法。離心沉淀法常用于針對細胞、細菌與病毒的適配體篩選,固相吸附與洗脫技術可以用于可溶性小分子的適配體篩選。適配體篩選的具體方法包括以下幾個方面。基于不同固定介質的篩選方法。硝酸纖維素膜過濾法是一種常用于蛋白質適配體篩選的方法。Joshi 等基于硝酸纖維素膜設計了一種橫向流動色譜裝置,結合應用該裝置與 SELEX 篩選技術,作者經過7輪正篩和3輪反篩獲得了針對鼠傷寒沙門氏菌外膜蛋白(Omp)的高親和力適配體33和45序列,檢出限為10-40 cfu/mL。凝膠柱亦是適配體篩選常見的固定介質。Tang等基于瓊脂糖凝膠樹脂應用SELEX 技術篩選獲得對紅豆毒素具有高特異性與高親和力的適配體,其解離常數低至幾nmoL范圍。近些年來,以微孔板為固定介質篩選適配體應用廣泛。王立峰等基于微孔板技術篩選獲得能與癌胚抗原(CEA)特異性結合......閱讀全文
適配體的篩選方法
適配體靶標范圍廣,靶標的大小與可溶性均不同,因此應用 SELEX 技術篩選核酸適配體可以采用不同的具體操作方法。離心沉淀法常用于針對細胞、細菌與病毒的適配體篩選,固相吸附與洗脫技術可以用于可溶性小分子的適配體篩選。適配體篩選的具體方法包括以下幾個方面。基于不同固定介質的篩選方法。硝酸纖維素膜過濾法是
適配體的篩選方法
適配體靶標范圍廣,靶標的大小與可溶性均不同,因此應用 SELEX 技術篩選核酸適配體可以采用不同的具體操作方法。離心沉淀法常用于針對細胞、細菌與病毒的適配體篩選,固相吸附與洗脫技術可以用于可溶性小分子的適配體篩選。適配體篩選的具體方法包括以下幾個方面。基于不同固定介質的篩選方法。硝酸纖維素膜過濾法是
適配體的篩選方法
適配體靶標范圍廣,靶標的大小與可溶性均不同,因此應用 SELEX 技術篩選核酸適配體可以采用不同的具體操作方法。離心沉淀法常用于針對細胞、細菌與病毒的適配體篩選,固相吸附與洗脫技術可以用于可溶性小分子的適配體篩選。適配體篩選的具體方法包括以下幾個方面。基于不同固定介質的篩選方法。硝酸纖維素膜過濾法是
概述適配體的篩選方法
適配體靶標范圍廣,靶標的大小與可溶性均不同,因此應用 SELEX 技術篩選核酸適配體可以采用不同的具體操作方法。離心沉淀法常用于針對細胞、細菌與病毒的適配體篩選,固相吸附與洗脫技術可以用于可溶性小分子的適配體篩選。適配體篩選的具體方法包括以下幾個方面。 基于不同固定介質的篩選方法。硝酸纖維素膜
細胞-SELEX(CellSELEX)技術篩選適配體的方法介紹
該方法的主要靶標物質是細胞、細菌或病毒等,操作過程中采用離心、沉淀的方法分離去除未結合適配體,再通過熱解離或酶切作用獲得特異性適配體序列。Liang 等針對感染狂犬病毒的活細胞,應用 Cell-SELEX 經過35 輪重復篩選獲得了 5 條 DNA 適配體。病毒效價測定與實時定量反轉錄 PCR
核酸適配體篩選實驗的難點在哪里
首先它確實是比較難,但是SELEX實驗的難和其它實驗的難是不太一樣的。像做單分子成像,或者某些超靈敏的檢測類的實驗,很多時候受制于我們的客觀條件,受制我們所擁有的儀器設備。可是,核酸適配體的篩選與這些實驗不同,因為SELEX實驗它所用的儀器設備條件其實都非常簡單,幾乎所有的分子生物學實驗室都具備。那
核酸適配體篩選實驗的難點在哪里
首先它確實是比較難,但是SELEX實驗的難和其它實驗的難是不太一樣的。像做單分子成像,或者某些超靈敏的檢測類的實驗,很多時候受制于我們的客觀條件,受制我們所擁有的儀器設備。可是,核酸適配體的篩選與這些實驗不同,因為SELEX實驗它所用的儀器設備條件其實都非常簡單,幾乎所有的分子生物學實驗室都具備。那
親和質譜技術:藥物靶標配體的高通量篩選
疾病相關的藥物靶標蛋白與小分子化合物的親和作用研究是當今開發新藥分子的熱點領域。親和質譜技術(Affinity Selection Mass Spectrometry)作為一種間接篩選小分子配體的方法,已經成功應用于許多受體、酶等靶蛋白的配體的篩選,并且得到了廣泛的應用。 親和質譜分析的基本原
中國科大篩選出特異針對點突變蛋白的適配體
近日,中國科學技術大學生命科學學院單革教授實驗室發明了一種新的篩選方法,從而篩選出能特異針對具有細微改變(比如單氨基酸殘基突變)蛋白質的核酸(RNA)適配體。該研究成果于7月27日發表在《美國科學院院刊》(PNAS)上。 RNA適配體是人工合成及篩選出的能特異結合小分子、蛋白質,甚至完整細
中國科大篩選出特異針對點突變蛋白的適配體
近日,中國科學技術大學教授單革實驗室發明了一種新的篩選方法,可篩選出能特異針對具有細微改變(比如單氨基酸殘基突變)蛋白質的核酸(RNA)適配體。該研究成果發表在7月27日的《美國國家科學院院刊》(PNAS)上,論文第一作者為博士陳亮。 RNA適配體是人工合成及篩選出的能特異結合小分子、蛋白質
熒光磁珠-SELEX(FluMagSELEX)技術篩選適配體的介紹
熒光磁珠 SELEX(FluMag-SELEX)技術。FluMag-SELEX 是結合應用磁珠與 SELEX技術篩選熒光適配體的一種方法,該方法需要靶標量少且可通過熒光直觀測定結合適配體的量。Kim 等應用FluMag-SELEX 技術篩選獲得廣譜抗炎性藥物布洛芬的5條特異性適配體。其中三條是外
【卡梅德生物】SELEX技術|核酸適配體文庫篩選服務
? ?核酸適配體文庫篩選是一項關鍵的技術,為發現特定核酸序列與目標分子高度親和結合的適配體提供了強有力的工具。這一技術在諸多領域中展現了突破性的應用,包括藥物開發、診斷技術以及基因治療等。? ?核酸適配體是一類能夠與目標分子特異性結合的寡核苷酸序列,其結構和功能類似于抗體。與抗體相比,核酸適配體具有
利用雙雜交系統相互作用阱/篩選特定蛋白的肽適配體...
利用雙雜交系統相互作用阱/篩選特定蛋白的肽適配體實驗實驗方法原理 實驗材料 DNA酵母株試劑、試劑盒 PCR 引物聚乙二醇甘油存儲液Tris·ClX-gal 平板完全極限(CM) 缺失成分培養基和平板儀器、耗材 30℃ 和 42℃ 培養箱或水浴實驗步驟 實驗所需「材料」、「試劑」、「耗材」具體見「其
配體配體相互作用的功能
中文名稱配體-配體相互作用英文名稱ligand-ligand interaction定 義泛指不同配體之間的相互作用。如受體上有多個配體結合位點時,一個配體與受體的結合可能影響另一個配體與受體的結合。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),信號轉導(二級學科)
磁控微流控芯片,建立埃博拉病毒核酸適配體的篩選平臺
埃博拉病毒是一種高致病性傳染病,高親和力和特異性的親和試劑對其防控具有重要的意義。近日,武漢大學生物醫學分析化學教育部重點實驗室研究人員通過借助磁控微流控芯片,建立了一個針對埃博拉病毒核酸適配體的高效篩選平臺。核酸適配體因其具有體外篩選、化學合成等特點,能夠為病毒的檢測提供一種性能優異的親和試劑。然
毛細管電泳SELEX-技術(CESELEX)技術篩選適配體的介紹
不同組分間的荷質比存在一定差異,導致物質的電泳遷移率有所不同,從而實現不同組分的分離。CE-SELEX 能在2-4輪內實現高親和力適配體的篩選,常被用于篩選蛋白質、脂多糖、多肽等大分子物質。Yang等首次利用 CE-SELEX 實現了對小分子物質甲基嗎啉的適配體的篩選,經過3輪篩選后獲得了8條高
篩選的定義和方法
篩選是利用篩子使物料中小于篩孔的細粒物料透過篩面,而大于篩孔的粗粒物料滯留在篩面上,從而完成粗、細料分離的過程。該分離過程可看作是物料分層和細粒透篩兩個階段組成的。物料分層是完成分離的條件,細粒適篩是分離的目的。
糧食雜質的篩選方法
檢驗雜質的試樣分大樣、小樣兩種:大樣是用于檢驗大樣雜質,包括大型雜質和絕對篩層的篩下物;小樣是從檢驗過大樣雜質的樣品中分出少量試樣,檢驗與 糧粒大小相似的并肩雜質。檢驗雜質的試樣用量見下表:糧食、油料名稱 大樣重量(g) 小樣重量 (g) ;小粒:如粟、芝麻、油菜籽等 500 10 ;中粒:如稻谷、
配體配體相互作用特點
中文名稱配體-配體相互作用英文名稱ligand-ligand interaction定 義泛指不同配體之間的相互作用。如受體上有多個配體結合位點時,一個配體與受體的結合可能影響另一個配體與受體的結合。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),信號轉導(二級學科)
利用雙雜交系統相互作用阱/篩選特定蛋白肽適配體實驗
實驗材料DNA酵母株試劑、試劑盒PCR 引物聚乙二醇甘油存儲液Tris·ClX-gal 平板完全極限(CM) 缺失成分培養基和平板儀器、耗材30℃ 和 42℃ 培養箱或水浴實驗步驟實驗所需「材料」、「試劑」、「耗材」具體見「其他」1. 使用標準的亞克隆技術,將編碼誘餌蛋白的 DNA 插入 PEG20
配體的分類
按配體中配位原子的多少,可將配體分為單齒配體和多齒配體。單齒配體:一個配體中只有一個配位原子的配體。如 NH3、H20等。多齒配體:一個配體中有兩個或兩個以上配位原子的配體。如二亞乙基三胺H2NCH2CH2NHCH2CH2NH2( 簡寫為DEN) 和乙二胺四乙酸根(簡寫為EDTA) 。兩可配體:有些
配體的分類
按配體中配位原子的多少,可將配體分為單齒配體和多齒配體。單齒配體:一個配體中只有一個配位原子的配體。如 NH3、H20等。多齒配體:一個配體中有兩個或兩個以上配位原子的配體。如二亞乙基三胺H2NCH2CH2NHCH2CH2NH2( 簡寫為DEN) 和乙二胺四乙酸根(簡寫為EDTA) 。兩可配體:有些
配體的定義
配體(ligand,也稱為配基)是一個化學名詞,表示可和中心原子(金屬或類金屬)產生鍵結的原子、分子和離子。一般而言,配體在參與鍵結時至少會提供一個電子。配體扮演路易斯堿的角色。但在少數情況中配體接受電子,充當路易斯酸。
美合成出普適性埃博拉藥物靶點-可用于高通量藥物篩選
一種對抗埃博拉病毒的新型藥物研發工具近日問世。這項發明由美國猶他州大學的生物化學家主導,他們研發出一種模擬肽,可呈現出各種類型埃博拉病毒都具有的關鍵功能區。這一新工具將作為藥物靶點,從而使藥物有效打擊各種已知和未知的埃博拉病毒。 科學家們合成出了埃博拉病毒蛋白質高度保守區的模擬肽,該區域蛋白質
表達篩選的定義和方法
中文名稱表達篩選英文名稱expression screening定 義(1)通過基因表達對組織、細胞或個體進行的篩選。(2)通過所用載體內含抗生素抗性基因、報道基因等的表達去篩選轉化子的方法。(3)通過自身或融合表達的蛋白質的某種特性(如綠色熒光蛋白)進行篩選的方法。應用學科生物化學與分子生物學(
免疫篩選的的技術方法
中文名稱免疫篩選英文名稱immunoscreening定 義根據抗原-抗體相互作用的原理從群體中選出目的物的技術。如用抗體檢測表達型的基因文庫所合成的蛋白質,從而篩選出目的基因的克隆。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
別構配體的概念
中文名稱別構配體英文名稱allosteric ligand定 義別構酶的效應物。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(二級學科)
細胞篩選方法和步驟
篩選步驟:a.殺滅曲線的確定將未轉染的細胞按每孔0.05million鋪入24孔板,孵育過夜,2.第二天,除去24孔板中舊的培養基,3.將含不同濃度嘌呤霉素(1ug/mL,2ug/mL,3ug/mL,4ug/mL,5 ug/mL,6ug/mL,7ug/mL)的新鮮培養基加入已鋪有細胞的24孔板,4.
陽性克隆篩選方法匯總
陽性克隆篩選方法匯總 ——基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9基因敲除方法 近幾年來,基因重組的技術層出不窮,包括TALEN和CRISPR/Cas9在內的重組技術給基礎研究提供更為方便和快捷的分子生物學工具。 關于這些技術的具體原理和操作細節,這里不做展開介紹,主要
陽性克隆篩選方法匯總
——基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9基因敲除方法近幾年來,基因重組的技術層出不窮,包括TALEN和CRISPR/Cas9在內的重組技術給基礎研究提供更為方便和快捷的分子生物學工具。關于這些技術的具體原理和操作細節,這里不做展開介紹,主要談一談在用這些技術進行細胞株構建的過程中,如何做才