蛋白質微陣列如何制作?
構建蛋白質陣列文庫的第一步是建立全長cDNA表達文庫,再將cDNA文庫轉化成蛋白質文庫。原則上所有cDNA都可以用于蛋白質文庫的構建,然而大多數蛋白質因不具備體外可檢測的生物活性,因而不適于文庫篩選。能適用于體外高通量功能篩選的蛋白質主要有細胞膜“表面蛋白”和“分泌型蛋白”。大部分分泌型蛋白質在氨基末端含有20至40個氨基酸的信號肽。而膜蛋白均含有跨膜疏水性的α螺旋結構。利用計算機程序可以預測這兩類蛋白,從而挑選相應的cDNA構建蛋白質陣列文庫。一旦cDNA文庫確定后,可將cDNA克隆到表達標記蛋白的載體內,應用高通量自動化的蛋白表達系統來表達和純化帶有標記的靶蛋白。......閱讀全文
蛋白質微陣列如何制作?
構建蛋白質陣列文庫的第一步是建立全長cDNA表達文庫,再將cDNA文庫轉化成蛋白質文庫。原則上所有cDNA都可以用于蛋白質文庫的構建,然而大多數蛋白質因不具備體外可檢測的生物活性,因而不適于文庫篩選。能適用于體外高通量功能篩選的蛋白質主要有細胞膜“表面蛋白”和“分泌型蛋白”。大部分分泌型蛋白質在氨基
組織微陣列的制作
實驗概要本文介紹了組織微陣列(TMAs)的制作原理及基本操作流程。實驗原理組織微陣列原理是借鑒計算機平行分析的思維 ,對生物信號進行平行分析。利用微點陣技術 ,借助于機械手將成千上萬的組織片點陣固定于固相載體上,可進行常規 HE染色 ,也可以與標記的樣品進行聚合酶鏈反應、熒光原位雜交、免疫組
大規模-PCR-制作-cDNA-微陣列實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 緩沖液、溶液和試劑 生物分子 酶和酶緩沖液 核酸和寡核苷酸 凝膠 儀器、耗材
大規模-PCR-制作-cDNA-微陣列實驗
本方案描述了通過 PCR 擴增產物,來制作 cDNA 微陣列的實驗步驟。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒緩沖液、溶液和試劑生物分子酶和酶緩沖液核酸和寡核苷酸凝膠儀器、耗材專用設備實驗步驟第 1 階段:影印鋪板與工作庫的制備一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑羧芐
蛋白質微陣列技術
微陣列技術在單個實驗中能同時分析數千個參數。捕獲分子微點在固體支持物上固定成行列并暴露在含相應結合分子的樣品中。基于熒光、化學發光、質譜、放射性或電化學的讀出系統能檢測每個微點形成的復合物。這些微小化和平行的結合分析高度靈敏,方法的分析能力又能被微陣列基因表達分析所放大。在這些系統中,檢測固定的DN
大規模-PCR-制作-cDNA-微陣列實驗(一)
試劑、試劑盒 緩沖液、溶液和試劑生物分子 酶和酶緩沖液核酸和寡核苷酸凝膠儀器、耗材 專用設備實驗步驟 第 1 階段:影印鋪板與工作庫的制備一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑羧芐西林(100ug/ml 儲存溶液)乙醇(100%)甘油,45%(體積分數)LB 液體培養基。(1L LB 液體培養基含有 10
大規模-PCR-制作-cDNA-微陣列實驗(二)
第 3 階段:克隆的擴增與 PCR 產物的評估一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑DEPC 處理過的 H20TAE 緩沖液,1×(40 mmol/L Tris-乙酸鹽,1 mmol/L EDTA,pH 約 8.5)DNA 點樣緩沖液(200 g/LFicoll400,0.1mol/LNa2EDTA,pH
什么是蛋白質微陣列?
蛋白質微陣列是將不同的具有生物活性的蛋白質分別置于微量板的不同孔內來進行蛋白質功能篩選的文庫。它實質上是cDNA陣列文庫的繼續。蛋白質微陣列是一種專門設計的多肽支架構成了一個表面固定域和捕獲域,從而形成柔性的蛋白質陣列。
蛋白質微陣列的功能介紹
蛋白質微陣列是將不同的具有生物活性的蛋白質分別置于微量板的不同孔內來進行蛋白質功能篩選的文庫。它實質上是cDNA陣列文庫的繼續。蛋白質微陣列是一種專門設計的多肽支架構成了一個表面固定域和捕獲域,從而形成柔性的蛋白質陣列。
蛋白質微陣列的功能和應用
蛋白質微陣列是將不同的具有生物活性的蛋白質分別置于微量板的不同孔內來進行蛋白質功能篩選的文庫。它實質上是cDNA陣列文庫的繼續。蛋白質微陣列是一種專門設計的多肽支架構成了一個表面固定域和捕獲域,從而形成柔性的蛋白質陣列。
蛋白質微陣列技術的特點和應用
通過點樣機械裝置制作蛋白質芯片的研究,將針尖浸入裝有純化的蛋白質溶液的微孔中,然后移至載玻片上,在載玻片表面點上1nl的溶液,然后機械手重復操作,點不同的蛋白質。利用此裝置大約固定了10,000種蛋白質,并用其研究蛋白質與蛋白質間,蛋白質與小分子間的特異性相互作用。Macbeath和Schreibe
如何制作凝膠
原料列表: 1、 高分子膠 ------------------------------- 0.5g(1/2匙) 1g-6.00元 2、 純水或蒸餾水 --------------------------- 83ml 自備-0.00元 缺 貨 3、 三乙醇胺 -------------
如何制作液氮
問題一:液氮怎么制作的 工業上在低溫條件下加壓,使空氣轉變為液態空氣,然后蒸發。由于液態氮的沸點是-196℃(77K),比液態氧的沸點低,因此氮氣首先從液態空氣中蒸發出來。然后收集就可以得到氮氣,接著降溫加壓,就可以得到液氮。問題二:液氮是怎么生產出來的? 應該是空氣降溫液化,然后緩慢升溫,空氣中各
如何制作凝膠
原料列表: 1、 高分子膠 ------------------------------- 0.5g(1/2匙) 1g-6.00元 2、 純水或蒸餾水 --------------------------- 83ml 自備-0.00元 缺 貨 3、 三乙醇胺 -------------
如何制作動物標本
[摘 要]動物標本制作對教學、科研、文化生活、資源保藏和利用都具有非常重要的意義。本文介紹了動物標本的分類,詳細闡述了骨骼標本、剝制標本、鑄型標本、干制標本、透明標本等制作方法。[關鍵詞]動物標本;制作;骨骼標本;鑄型標本;透明標本[中圖分類號]Q95-34 [文獻標識碼]A“標本”在古希臘語中意為
如何制作標準曲線?
你在實驗過程中是不是也經常會遇到這個問題:標曲的相關系數達不到“4個9”,甚至根本不成線性。根本原因是的標準曲線做的不規范,那么,什么是規范的標準曲線自作方法呢? 在學習制作標準曲線此之前,我們要了解一個重要前提,那就是:制作標準曲線的要求是什么?只有知道要求,我們才能按照要求制作出合格的
如何制作草甘膦
一。亞磷酸二烷基酯法以甘氨酸、亞磷酸二烷基酯、多聚甲醛為原料經加成、縮合、水解制得,產品純度為95%,總收率為80%,成本較低。二。氯甲基膦酸法1、氯甲基膦酸的制備用三氯化磷和多聚甲醛在200-250℃(相應壓力為2.5-3.0MPa)反應3-5小時,得氯甲基膦酰二氯。文獻報道配比為三氯化磷:聚甲醛
XRD實驗樣品如何制作
XRD衍射試樣可以是金屬、非金屬的塊體、片體或者粉末。 對于塊狀、板狀、圓柱狀樣品,必須將其磨成一個平面,面積不能小于10*10mm。如果面積太小可以用幾塊粘貼在一起。 如果是片狀、圓柱狀樣品可能會存在嚴重的擇優取向,衍射強度異常,給定性定量分析帶來麻煩。因此測試時應該合理選擇響應的方向平面。 對于
如何制作草甘膦
一。亞磷酸二烷基酯法以甘氨酸、亞磷酸二烷基酯、多聚甲醛為原料經加成、縮合、水解制得,產品純度為95%,總收率為80%,成本較低。二。氯甲基膦酸法1、氯甲基膦酸的制備用三氯化磷和多聚甲醛在200-250℃(相應壓力為2.5-3.0MPa)反應3-5小時,得氯甲基膦酰二氯。文獻報道配比為三氯化磷:聚甲醛
細胞爬片如何制作
細胞爬片就是在圓形玻璃蓋玻片上鋪展細胞,把蓋玻片用無水乙醇脫脂,放置到12或24孔板里(按照蓋玻片大小決定),紫外殺菌,多聚賴氨酸處理(幫助細胞貼壁),PBS清洗,然后正常傳細胞就可以了。
XRD實驗樣品如何制作
XRD衍射試樣可以是金屬、非金屬的塊體、片體或者粉末。 對于塊狀、板狀、圓柱狀樣品,必須將其磨成一個平面,面積不能小于10*10mm。如果面積太小可以用幾塊粘貼在一起。 如果是片狀、圓柱狀樣品可能會存在嚴重的擇優取向,衍射強度異常,給定性定量分析帶來麻煩。因此測試時應該合理選擇響應的方向平面。 對于
Amp抗性平板如何制作
含瓊脂培養基,滅菌,待到55度~65度時加入amp至終濃度50~100ug/ml,倒平皿,自然冷卻凝固。培養基的配方嘛,隨便找一本微生物實驗操作指南都有培養基配方。
吹膜機模頭如何選材制作?
吹膜機模頭由模體(模心、模筒、模圈)和加熱器(加熱圈)兩不分組成 ?首先選材,就是選擇相應的料。第二步是鍛打,把材料鍛打成模具個部分的粗胚,鍛打過的胚的分子結構更加密實。第三就是進行車床加工,按照模頭的設計圖紙車出模頭,在車床加工時,盡可能用精度高的車床,和技術老練的車床師傅車。 第四就是拋光,把
脫落細胞標本制作如何固定?
1.目的 主要是保持細胞的自然形態,固定愈快,細胞愈新鮮,染色效果愈好。2.常用固定液(1)乙醚乙醇固定液:此液滲透性強,固定效果好。適用于HE染色和巴氏染色。(2)95%乙醇固定液:適用于大規模防癌普查。制備簡單,但滲透能力較差。3.固定方法(1)帶濕固定:即涂片尚未干燥即行固定。適用于痰液、宮頸
顯微鏡標本如何制作
顯微標本制作技術是組織學、胚胎學、生理學及細胞學等學科研究觀察細胞、組織的生理、病理形態變化的一種主要方法。大多數生物材料,在自然狀態下是不適合顯微觀察的,也無法看到其內部結構。因為材料交厚,光線不易透過,以致不易看清其結構,另外細胞內的各個結構,由于其折射率相差很小,即使光線可透過,也難以辨明。但
如何制作簡易的蒸餾裝置?
用燈泡做蒸餾器 1、準備素材。做這種蒸餾器,首先要準備一個燈泡(100瓦)、一把小刀、一把尖嘴鉗、兩根玻璃管及一個500毫升汽水瓶上的蓋子。 2、把燈泡底座卸掉。用小刀卸掉燈泡的底座,即有螺紋的金屬部分。卸下底座的時候要小心,以免使燈泡邊緣變毛糙。 3、去除燈絲。用尖嘴鉗拔出里面的燈絲,也就是
什么是微陣列?
微陣列(DNA Microarray)也叫寡核苷酸陣列(Oligonucleotide array),是人類基因組計劃(Human Genome Project,HGP)的逐步實施和分子生物學的迅猛發展及運用的產物,它是生物學家受到計算機芯片制造和廣為應用的啟迪,融微電子學、生命科學、計算機科學和光
如何制作簡易的溫度計制作方法(帶數據的)
(1)把小藥液瓶灌滿紅墨水 。(2)在橡皮帽上鉆個小洞,使圓珠筆芯剛好插進去為宜。(3)把插了圓珠筆芯的橡皮帽蓋在灌滿了紅墨水的小藥液瓶上(應該有一小節紅墨水上升到圓珠筆芯中).接口的地方用融化的蠟塊封嚴。(4)對照著溫度計的溫度指示,比如溫度計指示為25度,則在圓珠筆芯上紅墨水的液面位置劃一個刻度
如何制作動物染色體標本
?細胞處于活躍的增值狀態或者通過人工的各種處理后,細胞進入分裂的動物組織科用于染色體的分析。由于在正常的動物骨髓內,細胞是處于不斷分裂的,給其注射一定的秋水仙堿可以讓許多細胞處于分裂的細胞停在細胞分裂中期,然后采用常規空氣干燥法制備染色體,即可得到大量可分析的染色體標本。??? 實驗用品 一、 材
液相色譜如何制作標準曲線
配制不同濃度,進樣,再做校正曲線就行了吧至于配制什么濃度要看線性范圍了~