常用免疫組織化學方法的原理免疫酶標方法
免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是最常用的技術。本方法與免疫熒光技術相比的主要優點是:定位準確,對比度好,染色標本可長期保存,適合于光、電鏡研究等。免疫酶標方法的發展非常迅速,已經衍生出了多種標記方法,且隨著方法的不斷改進和創新,其特異性和靈敏度都在不斷提高,使用也越來越方便。在病理診斷中廣為使用的當屬PAP法、ABC法、SP法等。......閱讀全文
常用免疫組織化學方法的原理免疫酶標方法
免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是最常用的技術。本方法與免疫熒光技術相比的主要優點是:定位準確,
免疫酶標方法的方法原理
免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是最常用的技術。本方法與免疫熒光技術相比的主要優點是:定位準確,
常用免疫組織化學方法的原理
1. 免疫熒光細胞化學技術 將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后會發出一定波長的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量. 2. 免疫酶細胞化學技術 是免疫組織化學研究中最常用的技術.基本原理是先以酶標
常用免疫組織化學方法的原理
1. 免疫熒光細胞化學技術 將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后會發出一定波長的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量. 2. 免疫酶細胞化學技術 是免疫組織化學研究中最常用的技術.基本原理是先以酶標
常用免疫組織化學方法的原理免疫熒光方法
是最早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理,先將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進而還可進行定量分析。由于免疫熒光技術特異性強、靈敏度高
常用的免疫組織化學方法
一. 直接法: 是zui早出現的方法,是將酶直接標記在特異性抗體上,與標本中的抗原結合,讓酶催化底物反應產生有色物質,可以在光鏡下檢測. 直接法放大作用小,不夠敏感, 且標記一種抗體只能檢測一種抗原,所以應用就受到了限制.二 . 間接法是將酶標記在第二抗體上,形成抗原/一抗 /二抗-酶復合物,zui
常用免疫組織化學方法的原理免疫膠體金技術
免疫膠體金技術是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標記物。膠體金是指金的水溶膠,它能迅速而穩定地吸附蛋白,對蛋白的生物學活性則沒有明顯的影響。因此,用膠體金標記一抗、二抗或其他能特異性結合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針,就能對組織或細胞內的抗原進行定性、定位,甚至定量研究。由于膠體金
免疫組織化學常用染色方法
根據標記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標法,親和組織化學法,后者是以一種物質對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位,其中生物素——抗生物素染色法最常用。
免疫組織化學常用的檢測方法
??免疫組織化學(immunohistochemistry)技術的基本原理是抗原-抗體的反應。利用帶有標記物(如熒光素或辣根過氧化物酶等)的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起
常用免疫組織化學染色方法-1
一)、ABC法:?(注,下面各種方法,均為手工操作,如沒特別說明,均在室溫下進行)1.切片經二甲苯Ⅰ 5分鐘。2.切片經二甲苯Ⅱ 5分鐘。3. 無水酒精Ⅰ 30秒。4. 無水酒精Ⅱ 30秒。5. 95% 酒精Ⅰ 30秒。6. 95%酒精Ⅱ 30秒。7. 90%酒精 30秒。8.80%酒精 30秒。9
常用免疫組織化學染色方法-2
五)免疫組化雙染色法。(ⅰ) (Ionmuno- Histochemistry double staimimg method)?1.切片脫蠟至水。2.0.3%H2O2甲醇處理切片10分鐘。3.水洗。4.抗原修復。5.PBS洗3次,每次1分鐘。6.加入非免疫性動物血清,孵育 10分鐘。7.PBS洗3次
免疫組化方法免疫酶標方法簡介
免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是最常用的技術。該方法與免疫熒光技術相比的主要優點是:定位準
免疫組織化學法的方法原理
免疫組織化學是應用抗原和抗體結合的原理,檢測細胞內多肽、蛋白質等大分子物質的分布。這種方法的特異性強、敏感度高、發展迅速、應用廣泛,成為生物學和醫學眾多學科的重要研究手段。
金標免疫分析方法原理和操作辦法
1、原理 利用不同的增菌培養基,提供給 E.coli O157:H7 ,迅速復活和生長所必須的營養物質及其他因素(利用 REVEAL 培養基,可以在8h 得到檢測結果。其他培養基如《FDA 細菌分析手冊》推薦的增菌培養基也可用于檢測卡檢測,允許檢測時間在20h 內)取一部分(120μL)
免疫組織化學染色方法
實驗原理免疫細胞化學(immunocytochemistry)是根據免疫學原理,利用抗體同特定抗原專一結合,對抗原進行定位測定的技術。抗原主要為大分子或與大分子相結合的小分子;抗體則是由漿細胞針對特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果將抗體結合上標記物,再與組織中的抗原發生反應,即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗
免疫組織化學染色方法
實驗概要免疫組織化學染色法是指在抗體上結合熒光或可呈色的化學物質,利用免疫學原理中抗原和抗體間專一性的結合反應,檢測細胞或組織中是否有目標抗原的存在,此方式不只可以用來測知抗原的表現量也可觀察抗原所表現的位置。只要是能夠讓抗體結合的物質,也就是具有抗原性的物質包括蛋白質、核酸、多糖、病原體等都可偵測
免疫組織化學染色方法
實驗原理免疫細胞化學(immunocytochemistry)是根據免疫學原理,利用抗體同特定抗原專一結合,對抗原進行定位測定的技術。抗原主要為大分子或與大分子相結合的小分子;抗體則是由漿細胞針對特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果將抗體結合上標記物,再與組織中的抗原發生反應,即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗
免疫酶標技術
實驗方法原理 先將酶與抗體結合形成酶標抗體,然后和相應的抗原反應,使抗原抗體復合物上帶有酶分子,再與酶的底物H2O2—DAB(3’3—二胺荃聯苯胺)發生顯色反應,在顯微鏡下觀察,根據顏色產物檢測相應抗原。實驗材料 抗體試劑、試劑盒 PBSH2O2血清儀器、耗材 顯微鏡實驗步驟 1. ?標本固定;2.
免疫酶標技術
1) 直接法1.標本固定。2.PBS洗滌2×3分鐘。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制內源性過氧化物,室溫10~20分鐘。4.正常血清(1:10)孵育,室溫20分鐘。5.滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6.PBS洗滌3×3分鐘。7.DAB+H2O2顯色5~10分鐘,鏡下控制染色
免疫酶標技術
中文名稱免疫酶標技術英文名稱immunoenzymatic technique定 義以酶標記抗體(或抗原),通過相應底物被酶解后的顯色反應,對細胞和組織標本中的抗原-抗體復合體進行定位、定性分析和鑒定的方法。也可根據酶催化底物顯色的深淺程度,定量測定體液標本中待測抗原或抗體的含量。應用學科細胞生物
免疫酶標技術
免疫酶標技術1)??直接法1.標本固定。2.PBS洗滌2×3分鐘。3.1%?H2O2(或1%?H2O2?甲醇)抑制內源性過氧化物,室溫10~20分鐘。4.正常血清(1:10)孵育,室溫20分鐘。5.滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6.PBS洗滌3×3分鐘。7.DAB+H2O2顯色5~10分鐘
免疫組織化學法的方法特點
免疫組織化學法,英文名稱:immunohistochemistry,是通過標記抗體與特異性抗原反應顯色的組織化學法。
酶標分析儀的工作原理及日常清潔方法
酶標分析儀的工作原理 酶標分析儀的工作原理簡單點來說,其實就是將光信號轉化成電信號,在進行處理計算的過程,而具體的工作方式為光源燈發出的光經過濾光片后,成為單色光束,經過光導纖維被均勻分成8份,分別到過8個光電檢測器。光電檢測器將光信號轉變為電信號,再經前置放大,經模數轉換,送到微處理器進行
酶聯免疫檢測的方法及原理
(1)酶聯免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA):是將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應在固相載體表面進行。可用間接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。(2)夾心法(sandwich assay):將已知的特異抗體包裝在固相載體(
酶聯免疫檢測的方法及原理
(1)酶聯免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA):是將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應在固相載體表面進行。可用間接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。 (2)夾心法(sandwich assay):將已知的特異抗體包裝在固
酶聯免疫檢測的方法及原理
(1)酶聯免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA):是將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應在固相載體表面進行。可用間接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。(2)夾心法(sandwich assay):將已知的特異抗體包裝在固相載體(
酶聯免疫檢測的方法及原理
(1)酶聯免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA):是將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應在固相載體表面進行。可用間接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。(2)夾心法(sandwich assay):將已知的特異抗體包裝在固相載體(
酶聯免疫檢測的方法及原理
(1)酶聯免疫吸附試驗(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA):是將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應在固相載體表面進行。可用間接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。(2)夾心法(sandwichassay):將已知的特異抗體包裝在固相載體(塑料板凹
酶聯免疫檢測的方法及原理
(1)酶聯免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA):是將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應在固相載體表面進行。可用間接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。(2)夾心法(sandwich assay):將已知的特異抗體包裝在固相載體(
酶聯免疫檢測的方法及原理
(1)酶聯免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA):是將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應在固相載體表面進行。可用間接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。(2)夾心法(sandwich assay):將已知的特異抗體包裝在固相載體(