平板劃線法的實驗操作步驟介紹
1．融化培養基：牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基放入水浴中加熱至融化。 2．倒平板：待培養基冷卻至50℃左右，按無菌操作法倒2只平板(每皿約15m1)，平置，待凝固。 倒平板的方法：右手持盛培養基的試管或三角瓶置火焰旁邊，用左手將試管塞或瓶塞輕輕地撥出，試管或瓶口保持對著火焰；然后用右手手掌邊緣或小指與無名指夾住管(瓶)塞(也可將試管塞或瓶塞放在左手邊緣或小指與無名指之間夾住。如果試管內或三角瓶內的培養基一次用完，管塞或瓶塞則不必夾在手中)。左手拿培養皿并將皿蓋在火焰附近打開一縫，迅速例入培養基約15m1，加蓋后輕輕搖動培養皿，使培養基均勻分布在培養皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即為平板。 3．作分區標記在皿底將整個平板劃分成A、B、C、D四個面積不等的區域。各區之間的交角應為120℃左右（平板轉動一定角度約60℃），以便充分利用整個平板的面積，而且采用這種分區法可使D區與A區劃出的線條相平行，并可避免此兩區線條相接觸。 4......閱讀全文
幾種常見的微生物基礎實驗（一）
?? ? 本文介紹幾種常見的微生物基礎試驗的目的、原理、內容等,以便剛剛接觸微生物的同志們對試驗有個基本的認識.?實驗一 常用培養基的制備、滅菌與消毒一、實驗目的? ? 1、掌握配制培養基的一般方法和步驟;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法;? ? 2、了解培養基的配制原理;了解常見滅菌
等電聚焦水平板電泳法的操作方法的介紹
（1）制膠 取A液2.5ml，pH3~10的兩性電解質（或其它pH范圍的兩性電解質）0.35ml，水1.25ml，50%甘油0.5ml，抽氣5~10分鐘，加B液25μl，N,N,N’,N’-四甲基乙二胺6μl，混勻后緩慢的注入水平模具內，室溫下聚合。 （2）預電泳 將已聚合的聚丙烯酰胺凝膠放到
浸取分離法的操作步驟介紹
浸取法分離可溶組分的步驟一般為： ①溶劑與固體物料密切接觸，使可溶組分轉入液相，成為浸出液。 ②浸出液與不溶固體（殘渣）的分離。 ③用溶劑洗滌殘渣，回收附著在殘渣上的可溶組分。 ④浸出液的提純與濃縮，取得可溶組分的產品。 ⑤從殘渣中回收有價值的溶劑。 leaching；solid-l
關于涂布平板法的實驗方法—－系列稀釋的介紹
樣品稀釋液的制備 準確稱取待測樣品10g，放入裝有90ml無菌水并放有小玻璃珠的250ml三角瓶中，用手或置搖床上振蕩20min，使微生物細胞分散，靜置20-30s，即成10-1稀釋液；再用1ml無菌吸管，吸取10-1稀釋液lml，移入裝有9ml無菌水的試管中，吹吸3次，讓菌液混合均勻，即成10
細菌的耐藥性變異——－R－因子傳遞實驗——劃線法
有些細菌攜帶接合性R 質粒，并能通過接合將耐藥性傳遞給原來敏感的細菌，使其迅速轉為耐藥菌。耐藥性質粒除了在同種細菌中作水平傳遞外，還可以在異種細菌之間傳遞，因而使對抗生素的耐藥菌株不斷增多，造成防治上很大的困難。實驗方法原理應用具有鏈霉素R 因子的大腸桿菌作為供體菌，對鏈霉素敏感的痢疾桿菌作為受體菌
雙向擴散法—平板法的相關信息介紹
平板法是鑒定抗原抗體的最基本、最常見的方法之一。平板法的基本步驟是：先在平板玻璃上傾注一均勻的瓊脂薄層，凝固后在瓊脂板上打孔，孔徑一般為3mm，孔間距通常在3～5mm，孔的排列可呈梅花形、雙排形或三角形等。在相對的孔中加入抗原或抗體，放置濕盒37~C18—24h后，瓊脂中各自擴散的抗原和相對應的
切口平移法的操作步驟
1、用DNase I處理雙鏈DNA，使之隨機產生單鏈斷裂。2、DNA聚合酶I的5‘-3’外切酶活性從斷裂處5‘除去一個核苷酸，同時5‘-3'聚合酶活性將一個放射性核素標記的單核苷酸引入到斷裂的3'端。3、反應重復進行，結果標記的核苷酸代替了原來的核苷酸殘基，形成了放射性的DNA分子。
切口平移法的操作步驟
1、用DNase I處理雙鏈DNA，使之隨機產生單鏈斷裂。2、DNA聚合酶I的5‘-3’外切酶活性從斷裂處5‘除去一個核苷酸，同時5‘-3'聚合酶活性將一個放射性核素標記的單核苷酸引入到斷裂的3'端。3、反應重復進行，結果標記的核苷酸代替了原來的核苷酸殘基，形成了放射性的DNA分子。
苯酚法提取酵母RNA實驗原理和操作步驟
（一）原理細胞內大部分RNA 均與蛋白質結合在一起，以核蛋白的形式存在。因此，提取RNA時要把RNA與蛋白質分離并除去。將細胞置于含有十二烷基磺酸鈉（Sodium dodecyl sulfate,SDS）的緩沖液中，加等體積水飽和酚，通過劇裂振蕩，然后離心形成上層水相和下層酚相。核酸溶于
細胞平板培養法的相關介紹
將制備好的單細胞懸浮液，按照一定的細胞密度，接種于適當厚度的薄層固體培養基上進行培養的方法，稱為平板培養。 等量的單細胞培養液與等量熔化(30～50℃)的瓊脂培養基(0．6%～1%)混合，迅速鋪板于培養皿中，瓊脂冷卻凝固后，細胞分布均勻地被固定在薄層(厚度大約1mm)培養基中。培養皿用石蠟膜封
關于呋喃妥因實驗室分析法的操作步驟介紹
供試品溶液1小時內照紫外分光光度法，于波長367nm處測定吸收度，按C8H6N4O5的吸收系數（E1% 1cm）為766計算，即得。 注：分光光度法應以配制供試品的同批溶劑為對照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測定波長，一般供試品的吸收度讀數，以在0.3～0.7之間的誤差較小。
土壤中微生物分離純化培養
一、實驗原理從混雜的微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物的分離與純化。常用的分離、純化方法：單細胞挑取法，稀釋涂布平板法，稀釋混合平板法，平板劃線法。稀釋涂布平板法步驟：倒平板－制備土壤污水稀釋液－涂布－培養－挑菌落。平板劃線法步驟：倒平板－標記培養基名稱－劃線。二、試劑與器材
腺苷的實驗操作步驟
1、標準曲線的繪制精密吸取上述對照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μL注入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外檢測器檢測器，于260nm檢測腺苷的吸收值，以腺苷的進樣量對其峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。2、供試品的測定精密吸取上述供試品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，
關于免疫組化法的操作步驟介紹
1． 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復，可在此步后進行 2.緩沖液洗 3min/2 次。 3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色，將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。 4. 緩沖液洗 5min/2 次。 5. 滴加 Ultra
間接免疫熒光法的操作步驟介紹
1、細胞準備與固定 （1）單層生長細胞：取對數生長細胞，用0.25％胰蛋白酶消化，制成單細胞懸液。將細胞接種到預先放置幾張6×22mm蓋玻片的培養瓶或培養皿中，置二氧化碳培養箱培養1-3天，待細胞接近長成單層，取出蓋玻片，進入PBS（0.01 mol/L,pH7.4）洗2次，然后根據實驗目的，
IHC－實驗操作步驟
? ? ? ? ? ? 免疫組化方法（石蠟切片）*重要提示：參考抗體說明書選用合適的抗體稀釋液和抗原修復處理方法。IHC 方法：抗原修復緩沖液/抗體稀釋液A. ? ? 所需溶液和試劑1. 二甲苯2. 無水乙醇（100% 和 95%，變性無水乙醇，組織學級）3. 去離
水中細菌總數的測定實驗——平板計數法
實驗方法原理本實驗應用平板計數技術測定水中細菌總數。由于水中細菌種類繁多，它們對營養和其他生長條件的要求差別很大，不可能找到一種培養基在一種條件下，使水中所有的細菌均能生長繁殖，因此，以一定的培養基平板上生長出來的菌落，計算出來的水中細菌總數僅是一種近似值。目前一般是采用普通肉膏蛋白胨瓊脂培養基。實
MTT法實驗步驟
貼壁細胞1、收集對數期細胞，調整細胞懸液濃度，每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調密度至1000-10000孔，（邊緣孔用無菌PBS填充）。2.、5%CO2，37℃孵育，至細胞單層鋪滿孔底（96孔平底板）,加入濃度梯度的藥物,原則上，細胞貼壁后即可加藥，或兩小時，或半天時間，但我們常在前一天下午鋪板
免疫印跡法實驗的操作步驟和注意事項
操作步驟 一蛋白質樣品獲得：細菌誘導表達后，可通過電泳上樣緩沖液直接裂解細胞，真核細胞加勻漿緩沖液，機械或超聲波室溫勻漿0.5-1min。然后4℃，13,000r離心15min。取上清液作為樣品。 二電泳：制備電泳凝膠，進行SDS-PAGE。 三轉移：（半干式轉移） 1、電泳結束后將膠條
關于明膠酶譜法的實驗步驟介紹
1、明膠酶譜法實驗步驟：取對數期的癌細胞在的無血清培養基DMEM中培養24h。 2、明膠酶譜法實驗步驟：次日收集上清液，將上清液移入離心管中 2000rpm 離心10min，-70℃儲存備用。 3、明膠酶譜法實驗步驟：根據細胞計數調整各組細胞培養上清液中的蛋白濃度（或者測定蛋白濃度調整使所上
DNA印跡法實驗步驟轉移的相關介紹
1)取一個較大的方形瓷盤,放一塊玻璃板于盤上,盤內加轉移液(6×SSC或10×SSC)使液面距離玻璃底面約1,2cm,玻璃板表面蓋兩張預先用轉移液浸潤的Whatman 3M ·濾紙(也可用新華濾紙),濾紙兩端浸入SSC轉移液中,用一玻璃棒將濾紙壓平,濾紙與玻璃板間不得有氣泡, 2)將瓊脂糖凝膠
薄層色譜法的操作步驟
薄層板制備薄層板除另有規定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2～0.3mm)，取下涂好薄層的玻板，置水平臺上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘，即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和
關于平板菌落計數法的內容介紹
平板菌落計數法，是種統計物品含菌數的有效方法。方法如下：將待測樣品經適當稀釋之后，其中的微生物充分分散成單個細胞，取一定量的稀釋樣液涂布到平板上，經過培養，由每個單細胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落，即一個單菌落應代表原樣品中的一個單細胞；統計菌落數，根據其稀釋倍數和取樣接種量即可換算出樣品中的含
熒光血管造影法操作步驟
在暗室中進行。先在蘭色光波下觀察眼底檢查部位的情況，注意有無假熒光，為了觀察病人對熒光素有無過敏反應，先取10%熒光素鈉0.5ml加入無菌等滲鹽水4.5ml稀釋，作為預測試驗，緩慢地注入肘前靜脈，詢問病人有何不適。如無不良反應，可調換盛有10%熒光素鈉5ml或20%熒光素鈉2.5～3ml注射器，于1
平板菌落計數法菌落總數介紹
菌落是指細菌在固體培養基上生長繁殖而形成的能被肉眼識別的生長物，它是由數以萬計相同的細菌集合而成。當樣品被稀釋到一定程度，與培養基混合，在一定培養條件下，每個能夠生長繁殖的細菌細胞都可以在平板上形成一個可見的菌落。 菌落總數就是指在一定條件下（如需氧情況、營養條件、pH、培養溫度和時間等）每克
微生物的分離和純化
實驗概要本文介紹了倒平板的方法和幾種分離純化微生物的基本操作技術。實驗原理在土壤、水、空氣或人及動、植物體中，不同種類的微生物絕大多數都是混雜生活在一起，當我們希望獲得某一種微生物時，就必須從混雜的微生物類群中分離它，以得到只含有這一種微生物的純培養，這種獲得純培養的方法稱為微生物的分離與純化。為了
詳述蒸餾實驗的操作步驟
加料：把待蒸餾液通過玻璃漏斗小心倒入蒸餾瓶中，要注意不使液體從支管流出。加入幾粒助沸物，安好溫度計，溫度計應安裝在通向冷凝管的側口部位。再一次檢查儀器的各部分連接是否緊密和妥善。 加熱：用水冷凝管時，先由冷凝管下口緩緩通入冷水，自上口流出引至水槽中，然后開始加熱。加熱時可以看見蒸餾瓶中的液體逐
關于火箭免疫電泳的實驗操作步驟介紹
1、抗原、抗體濃度的選擇 以分別固定抗原含量與抗體濃度的方法，選取最小抗原量與最低抗體濃度，在免疫電泳后能出現最清晰項端狹窄且尖的錐形沉淀峰，長達2～5cm者為標準。一般抗原用量為0.5～5微克，抗血清用量為5～10微升，稀釋度于1：10～1：200之間進行選擇。 2、預復瓊脂玻板的制備
固體培養基上細菌培養實驗
實驗方法原理 通過平板劃線法分離單菌落試劑、試劑盒 培養液儀器、耗材 平板接種環牙簽實驗步驟 1. ?用接種環或無菌牙簽將接種菌體從瓊脂平板的一側開始劃線。2. ?重新消毒接種環或用新的無菌牙簽，從第一劃線處將樣品劃線至平板的其余部分，重復劃線至少一次。3. ?于37 °C培養直至長出單菌落。如果要
DNA印跡法的實驗步驟
注意注意，操作戴手套。凝膠處理1)凝膠照相后切去包括標記帶在內的多余部分。將凝膠的一角(·點第一個樣品的一側)切去作為標記 以便于定位。精確測量凝膠大小然后將凝膠放入一個方形瓷盤中 。2)變性：將凝膠浸泡于適量的堿變性液中，室溫下變性30分鐘。期間更換變性液一次，不斷地輕輕搖動。如果先進行酸變性酸變