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    關于工具酶的相關介紹

    基因工程涉及眾多的工具酶可粗略的分為限制酶,連接酶,聚合酶,核酸酶和修飾酶五大類。其中,以限制性核酸內切酶和DNA連接酶在分子克隆中的作用最為突出。 DNA限制性內切酶: 生物體內能識別并切割特異的雙鏈DNA序列的一種內切核酸酶。它是可以將外來的DNA切斷的酶,即能夠限制異源DNA的侵入并使之失去活力,但對自己的DNA卻無損害作用,這樣可以保護細胞原有的遺傳信息。由于這種切割作用是在DNA分子內部進行的,故名限制性內切酶(簡稱限制酶) 限制性內切酶有Ⅰ型和Ⅱ型限制性DNA內切酶之分,Ⅱ型能嚴格識別核酸序列,并在識別區內特定的核苷酸處切開DNA雙鏈。故通常所指都是Ⅱ型限制性DNA內切酶。識別分四核苷酸,五核苷酸,八核苷酸和六核苷酸,其中以六核苷酸為主,其序列旋轉對稱。切口分黏性末端和平末端,產生3′-OH和5′-P末端。內切酶品種多,使用時應注意溫度、緩沖液用量(一般1μg DNA/2-5單位酶)等反應條件。......閱讀全文

    關于工具酶的相關介紹

      基因工程涉及眾多的工具酶可粗略的分為限制酶,連接酶,聚合酶,核酸酶和修飾酶五大類。其中,以限制性核酸內切酶和DNA連接酶在分子克隆中的作用最為突出。  DNA限制性內切酶:  生物體內能識別并切割特異的雙鏈DNA序列的一種內切核酸酶。它是可以將外來的DNA切斷的酶,即能夠限制異源DNA的侵入并使

    關于工具酶的連接酶的介紹

      它是一種封閉DNA鏈上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA鏈的5'-PO4與另一DNA鏈的3'-OH生成磷酸二酯鍵。但這兩條鏈必須是與同一條互補鏈配對結合的(T4DNA連接酶除外),而且必須是兩條緊鄰DNA鏈才能被DNA連接酶催化成磷酸二酯鍵。  連接酶有T4噬菌體

    關于修飾酶的相關介紹

      體內有些酶可在其他酶的作用下,將酶的結構進行共價修飾,使該酶活性發生改變,這種調節稱為共價修飾調節(covalent modification regulation),這類酶稱為修飾酶(prosessing enzyme)。  堿性磷酸酶去除5′-P,可防止二分子DNA片段5′端P基團自身空間障

    關于反轉錄酶的相關介紹

      反轉錄酶(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶,該酶以RNA 為模板,以dNTP 為底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 為引物,在tRNA 3'

    關于內切酶的相關介紹

      內切酶,即限制性核酸內切酶。亦稱限制性核酸酶。它是一種能催化多核苷酸的鏈斷裂的酶,只對脫氧核糖核酸內一定堿基序列中某一定位置發生作用,把這位置的鏈切開。通過內切酶可以把某一個遺傳基因切下來,若再連在別的細胞的遺傳基因上,便可使這細胞具有新的遺傳特性。內切酶的發現和采用,使基因工程成為可能。

    關于胰蛋白酶的相關介紹

      胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 為蛋白酶的一種,EC 3.4.4.4,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后,作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內切酶,它

    關于核酸內切酶的相關介紹

      核酸內切酶催化水解多核苷酸內部的磷酸二酯鍵。有些核酸內切酶僅水解5′磷酸二酯鍵,把磷酸基團留在3′位置上,稱為5′-內切酶;而有些僅水解3′-磷酸二酯鍵,把磷酸基團留在5′位置上,稱為3′-內切酶。還有一些核酸內切酶對磷酸酯鍵一側的堿基有專一要求,例如胰臟核糖核酸酶(RNaseA)即是一種高度專

    關于實驗增強發光酶的相關介紹

       增強發光酶免疫分析(enhanced luminescence enzyme immunoassay, ELEIA )在發光系統中加入增強發光劑, 如對2碘苯酚等, 以增強發光信號,并在較長時間內保持穩定, 便于重復測量, 從而提高分析靈敏度和準確性。在全自動分析儀上, 還可通過計算機嚴密控制

    關于胃蛋白酶的相關介紹

      胃蛋白酶原由胃底主細胞分泌,在pH1.5~5.0條件下,被活化成胃蛋白酶,將蛋白質分解為肽,而且一部分被分解為酪氨酸、苯丙氨酸等氨基酸。 胃液胃蛋白酶測定可用于鑒別神經性低酸癥和胃性低酸癥,當胃酸過少或  缺乏時,前者胃蛋白酶的含量有時正常而后者鹽酸與胃蛋白酶同時缺乏。一般認為胃性低酸癥是由于胃

    什么是工具酶呢?工具酶都有哪些?

    作為試劑用于測定化合物濃度或酶活力的酶稱為工具酶。對于底物或產物不能直接測定或難于準確測定的酶促反應,采用酶耦聯法測定。1.NAD(P)十或NAD(P)H偶聯的脫氫酶及其指示反應。2.偶聯H2O2的工具酶及其指示反應有些酶作用于底物時,可使其氧化產生H2O2,在POD的作用下使色素原氧化顯色進行測定

    關于鈉鉀ATP酶相關的疾病介紹

      經科學研究,發現Na+-K+泵在人體的正常代謝中具有非常重要的作用,與一些疾病的發生也有著密切的關系.如腦水腫、白內障、囊纖維化、癲癇、偏頭痛、高血壓等。另外最近的研究表明:Na+-K+泵還與減肥有著千絲萬縷的關系。  在這里,僅就白內障和高血壓與Na+-K+泵的關系做一點介紹。  1、與白內障

    關于血清酶的相關內容介紹

      在肝臟的新陳代謝過程中,有多種酶參與代謝過程。當肝臟發生疾病時,這些酶在血清中的濃度也發生變化。  氨基轉移酶  在血清酶試驗中,最為敏感的仍是丙氨酸氨基轉移酶(ALT),舊稱谷氨酸丙酮酸轉氨酶(GPT)。常用的還有天門冬酸氨基轉氨酶(AST),舊稱谷氨酸草酰乙酸轉氨酶(GOT)。由于使用的方法

    關于酶標分析儀的相關介紹

      1、 測量準確,重復性好,具有質控功能,無須外接計算機即可自動提供31天質控數據及X平均值、 SD、CV值  2、 能做定性、定量、基因檢測  3、 開放型軟件,可適應目前國內外任何廠家的試劑  4、 可預設操作程序,并可儲存檢測結果  5、 檢測結果既可直接顯示在屏幕上,也可打印保存  6、

    基因操作的工具酶3

    (三)T4 DNA聚合酶 T4DNA聚合酶是從T4噬菌體感染了的大腸桿菌中分離出來的, 1.酶催活性: ⑴5′→3′的聚合酶活性 ⑵3 ′→ 5 ′的核酸外切酶活性。其外切酶活性要比大腸桿菌聚合酶 I 的活性高200倍。比Klenow 片段酶強100~1,00

    基因操作的工具酶2

    (三) DNA連接酶的反應條件影響連接效率的因素有:1. 溫度(通常在4-15℃ )2. ATP的濃度(10μM/L - 1mM/L )3. 連接酶濃度(一般平末端大約需1~2U,黏性末端僅需0.1U)4. 反應時間(通常連接過夜)5. 插入片段和載體片段的摩爾比( 1∶1~5∶1)(四)T4 DN

    基因操作的工具酶1

    一、 限制性核酸內切酶及其應用(一)限制性核酸內切酶的發現當λ(k)噬菌體侵染E.coliB時,由于其DNA中有EcoB核酸酶特異識別的堿基序列,被降解掉。而E.coliB的DNA中雖然也存在這種特異序列,但可在EcoB甲基化酶的作用下,催化S-腺苷甲硫氨酸(SAM)將甲基轉移給限制酶識別序列的特定

    關于工具顯微鏡的內容介紹

      工具顯微鏡,是一種以光學(顯微鏡)瞄準和坐標(工作臺)測量為基礎的機械式光學儀器,可用于測量各種長度和角度,特別適合于測量各種復雜的工具和零件,如螺紋、凸輪的輪廓、切削刀具和孔間距等,應用范圍很廣。主要分為:小型工具顯微鏡、大型工具顯微鏡、萬能工具顯微鏡和重型萬能工具顯微鏡等4 種類型。它們都有

    治療AmpC酶的相關介紹

      由于AmpC酶易于被誘導產生且對β-內酰胺抗菌素抑制劑不敏感,給臨床抗感染治療帶來了新挑戰。對AmpC酶穩定的藥物主要有碳青霉烯類(亞胺培南)和第四代頭(頭孢吡肟、頭孢匹羅)以及某些喹酮類和氨基糖苷類抗生素[2o]。在體外p內胺酰酶抑制劑克拉維酸、舒巴坦、三唑巴坦,與p內胺酰抗生素聯合運用實驗中

    酶標法的相關介紹

      酶標法是指使用 酶聯免疫吸附試驗( ELISA)來檢測HIV抗體。這種方法是根據酶免疫測定原理發展的一種技術,其基本方法分三類:間接法、雙抗原夾心法和抗體競爭法。 目前國內外主要使用的是第三代(雙抗原夾心法)試劑。血源篩查以第三代 ELISA為主,國際上有些國家和地區已經將第四代 ELISA試劑

    RNA復制酶的相關介紹

      即“RNA依賴的RNA聚合酶(RdRp)”RNA聚合酶的一種,存在于大部分RNA病毒中。和細胞中用來轉錄的RNA聚合酶(DdRp)不同,RNA復制酶的模板是RNA分子。  某些RNA復制酶還有解旋酶活性,正鏈RNA或雙鏈RNA病毒復制時都會產生雙鏈RNA,RNA復制酶可以解開這些雙鏈,保證RNA

    酶體系的作用相關介紹

      酶之所以能夠加速化學反應的進行,是因為它能降低反應的活化能。因為任何一種酶,對于它所能催化的反應都有極強的選擇性,這種選擇性決定著每一個細胞在特定的時候發生特定的化學反應。  酶分子是蛋白質,每種蛋白質都有特定的三維形狀,而這種形狀就決定了酶的選擇性。酶所催化的反應中的反應物稱為底物,酶只能識別

    與酶相關的疾病的介紹

    酶缺乏所致之疾病多為先天性或遺傳性,如白化癥是因酪氨酸羥化酶缺乏,蠶豆病或對伯氨喹啉敏感患者是因6-磷酸葡萄糖脫氫酶缺乏。許多中毒性疾病幾乎都是由于某些酶被抑制所引起的。如常用的有機磷農藥(如敵百蟲、敵敵畏、1059以及樂果等)中毒時,就是因它們與膽堿酯酶活性中心必需基團絲氨酸上的一個-OH結合而使

    關于絲氨酸蛋白酶—凝血因子的相關介紹

      幾種激活的凝血因子都是絲氨酸蛋白酶,包括:  1、凝血第十因子(X),也稱Stuart-Power因子,參于內源性和外源性凝血途徑的一種耐貯存因子。缺乏可致系統性凝血障礙(第十因子缺乏癥)。  2、凝血第十一因子(XI),即是血漿凝血酶活酶前質:作用于內源性凝血途徑的一種穩定因子。缺乏這種因子會

    關于工具顯微鏡的保養維護介紹

      顯微鏡在不用的狀態下,用塑料袋包起來,然后在塑料帶里放1~2包干燥劑,干燥劑一般都在旺旺餅干里或月餅的盒子里,都有干燥劑,顯微鏡在放到通風的環境下就可以了,物鏡鏡頭要定期擦。  工具顯微鏡是很精密的測量儀器,如果保養的不好,將會很大程度的降低其使用壽命和精度。以下是提供的的保養和維護建議  1、

    修飾性工具酶功能應用

    (一)末端轉移酶(terminal transferase)l 末端轉移酶是一類不依賴于DNA模板的DNA聚合酶。l 特性:該類酶可以在沒有模板鏈存在的情況下,將核苷酸連接到dsDNA或ssDNA的在3’-OH。特別是對于平末端的雙鏈DNA末端加尾十分有用。l 最常見的用途:給外源DNA片段及載體分

    關于抗凝血酶Ⅲ的缺乏癥的相關介紹

      1、遺傳性ATⅢ缺乏可分兩型:(1)CRM-型:即抗原與活性均下降。(2)CRM+型:抗原正常,活性下降。  遺傳性ATⅢ缺乏是一種常染色體顯性遺傳性疾病,本病患病率約1/5000,發病多在10-25歲,患者常在手術后、創傷后、感染后、妊娠或產后發生靜脈血栓,并可反復發生血栓。CRM-患者血漿中

    乳酸脫氫酶同工酶的相關介紹

      乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)是一類NAD依賴性激酶,有LDHA、LDHB、LDHC三種亞基,可構成6種四聚體同工酶。 動物乳酸脫氫酶是由4個亞單位組成的四聚體 ,是一個具有5種同工酶形態的分子,即常見的A、B兩種亞基構成的5種LDH同工酶(LDH1~5)。C亞

    單胺氧化酶的相關介紹

      單胺氧化酶(MAO)為反映肝纖維化的酶,可分為兩類。一類存在于肝、腎等組織的線粒體中,以FAD為輔酶,參與兒茶酚胺的分解代謝。另一類存在于結締組織,是一種細胞外酶,無FAD而含有磷酸吡哆醛,只對伯胺起作用。血清中MAO和結締組織中的MAO性質相似,能促進結締組織的成熟,在膠原形成過程中,參與膠原

    酶反應器的相關介紹

      酶反應器(enzyme reactor)指以酶作為催化劑進行反應所需的設備。這些設備包括游離酶、固定化酶和固定化細胞的容器及其附加設施如混合、取樣、檢測等設備。[1]  酶反應器的作用是以盡可能低的成本,按一定的速度由規定的反應物制備特定的產物。酶反應器的特點是在低溫、低壓的條件下發揮作用,反應

    酶蛋白的飼養用途相關介紹

      酶蛋白以植物蛋白為原料,酵母菌為主菌,輔以產酶、產維生素的7種菌進行復合發酵,改善了植物蛋白結構,富含消化酶系、菌體蛋白、維生素制作的飼料。通過試驗表明:雞,鴨等家禽在產蛋高峰期,體內消化酶相對不足,代謝極為旺盛,對營養因子和致病因子均非常敏感,體質相對虛弱,抗病力下降,消化酶活性減弱,同化作用

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