實驗室高效液相色譜儀液相色譜流動相的貯存
流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內,不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴,防止溶劑揮發引起組成變化,也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉,應盡量新鮮配制使用,不要貯存。如確需貯存,可在冰箱內冷藏,并在3天內使用,用前應重新濾過。容器應定期清洗,特別是盛水、緩沖液和混合溶液的瓶子,以除去底部的雜質沉淀和可能生長的微生物。因甲醇有防腐作用,所以盛甲醇的瓶子無此現象。......閱讀全文
高效液相色譜儀流動相選擇方法
流動相選擇方法 1:由強到弱:?一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗,這樣可以很快地得到分離結果,然后根據出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。? 2:?三倍規則?:每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量,保留因子約增加3倍,此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調
高效液相色譜儀流動相脫氣方法
在食品分析中,無論是殘留分析還是成分分析,高效液相色譜儀(HPLC)也已成為不可或缺的分析儀器。流動相脫氣是HPLC系統能得到可靠數據的一個很有效的措施。下面分析一下,高效液相色譜脫氣的必要性,并總結歸納了脫氣常用的方法。一、脫氣的必要性流動相脫氣是HPLC系統能得到可靠數據的一個很有效的措施。HP
高效液相色譜儀流動相脫氣方法
脫氣方法 1.吹氦脫氣法 利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性,在0.1MPa壓力下,以約60mL/min流速通入流動相儲液容器中10~15min,可以很有效地從流動相中排除溶解的空氣,能排除接近80%的氧氣。采用一個高效分布式噴射流裝置,一體積的氦氣可從流動相中將等體積
高效液相色譜流動相ph有何影響
如果是中性物質,水相pH值的酸堿性對它沒什么影響。不過酸性物質和堿性物質的影響就比較大。比如,堿性物質在pH值6.8的緩沖液里保留時間就會比較靠后,如果pH值變成4.5,那么保留時間肯定會前移。另外水相pH值對于峰型也會有影響。所以水相pH值通常是根據被測物質的PKa值來確定的。
高效液相色譜儀流動相儲液瓶的沖洗介紹
首先要經常清洗流動相儲液瓶,或者每做一批新樣品更換一次流動相。一個臟的儲液瓶將會污染注入的流動相。建議儲液瓶中緩沖液使用時間不要超過一周,而有機溶劑使用時間不要超過一個月。也有人建議儲液瓶中保持用溶劑充滿,直到更換分析方法儲液瓶需更換新溶劑(流動相組成發生變化)時,將舊溶劑倒掉更換新溶劑,這樣勝
實驗室高效液相色譜儀流動相的溶劑選擇
流動相溶劑的選擇1)所選用的流動相溶劑要有一定的化學穩定性,不與固定相和樣品組分起反應,其純度和化學特性必須滿足色譜過程的穩定性和重復性的要求。2)溶劑應當不干擾檢測器的工作,溶劑應與檢測器匹配,選擇不影響檢測器正常工作應選擇在測定波長范圍內無吸收的流動相。3)在制備分離中, 溶劑應當易于除去,不干
高效液相色譜(HPLC)流動相的性質要求
高效液相色譜(HPLC)流動相溶劑具有粘度低、與檢測器相容性好、產品易得、毒性低等特點。選擇填料(固定相)后,強溶劑對填料表面溶質的吸附降低,相應的容量因子K降低。然而,較弱的溶劑增加了溶質在填料表面的吸附,相應的容量因子k也增加了? 因此,k值是流動相組成的函數? 塔板數n通常與流動相的粘度成反比
高效液相色譜流動相的幾點注意事項
高效液相色譜的流動相通常是各種低沸點溶劑和水溶液。它是影響分離的一個非常重要因素。在實際工作中,流動相的選擇和優化是確定色譜分析的主要工作。 一、 流動相溶劑的選擇 1.所選用的流動相溶劑要有一定的化學穩定性,不與固定相和樣品組分起反應,其純度和化學特性必須滿足色譜過程的穩定性和重復性的要求
高效液相色譜儀流動相的選擇原則
1、選擇色譜醇的溶劑作為流動相不要隨意加滿溶劑瓶。作為分析流動相,應避免不必要的浪費,防止污染環境,危害身體健康。應該根據樣哦數量,計算需要使用的溶劑體積,添加適量流動相到試劑瓶中作為流動相。因為有些有機溶劑長期放置易變質,比如在光照下就容易變質,甲醇或乙醇長期放置會生成酯類,乙腈水溶液會分解為醋酸
高效液相色譜儀流動相的選用要求
?????? 高效液相色譜儀流動相的選用要求包括流動相性質要求、流動相選擇、流動相pH值、流動相脫氣、流動相過濾、流動相貯存、鹵代溶劑應特別注意的問題和HPLC用水等方面。一、流動相性質要求:??????? HPLC中,強溶劑使溶質在填料表面的吸附減少,相應的容量因子k值減小;較弱的溶劑使溶質在填料
高效液相色譜儀溶劑流動相的純化
分析純和優等純溶劑在許多情況下都能滿足高效液相色譜儀的要求,但不同的色譜柱和檢測方法對溶劑的要求不同。目前,用于高效液相色譜儀分析的純色譜溶劑,除甲醇外,大多為分析純,有時需要通過去除紫外雜質、脫水、蒸餾等方法進行提純。1.乙腈是常用的溶劑。對純乙腈的分析中含有少量的丙酮、丙烯腈、丙烯酸酯、惡唑化合
高效液相色譜儀的流動相相關介紹
如果流動相均由高效液相色譜級溶劑組成,流動相沒有必要過濾。這是因為高效液相色譜級的有機溶劑,例如乙腈、甲醇等,在制造的工藝過程中都已經過了0.2 μm微孔濾膜過濾。同樣的,無論你是買的HPLC級的水還是在實驗室使用超純水凈化系統制備的水,zui后一步也是通過0.2 μm微孔濾膜。然而,如果有任何
高效液相色譜色譜柱的填料和流動相的組分
應按各品種項下的規定,常用的色譜柱填料有硅膠和化學鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用辛基鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用;離子交換填料用于離子交換色譜;凝膠或玻璃微球等,用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數微升。除另有規定外,柱溫為室溫,檢測器為紫外吸收檢測器。 在用紫外吸收檢
實驗室分析儀器液相色譜儀流動相的貯存
流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內,不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于 HPLC 系統,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴,防止溶劑揮發引起組成變化,也防止氧和二氧化碳溶入流動相。純水、磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液等
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅膠、氨基鍵合、氰基鍵合3、流動相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形狀1、全多孔型最初由氧化硅、氧化鋁、硅藻土等制成的多孔球體 ?100μm的大顆粒,表面涂漬固定液。傳質速度慢,柱效低。?現采用10μm以下的小顆粒。2、表面多孔型(薄殼型微珠)?30~40μm
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅膠、氨基鍵合、氰基鍵合3、流動相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形狀1、全多孔型最初由氧化硅、氧化鋁、硅藻土等制成的多孔球體 ?100μm的大顆粒,表面涂漬固定液。傳質速度慢,柱效低。?現采用10μm以下的小顆粒。2、表面多孔型(薄殼型微珠)?30~40μm
高效液相色譜日常簡易保養及維護——流動相
流動相的操作要求: 高效液相級色譜醇,二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過濾; 流動相脫氣至關重要(可采用抽濾,超聲波脫氣等方法)
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
高效液相色譜儀流動相和固定相都有哪些?1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅膠、氨基鍵合、氰基鍵合3、流動相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形狀1、全多孔型最初由氧化硅、氧化鋁、硅藻土等制成的多孔球體? 100μm的大顆粒,表面涂漬固定液傳質速度慢,柱效低 現采用10μm以下的小顆粒。向左轉|向
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
液相色譜有正反之說,所以流動相和固定相也有類似的分類。1.先說流動相:a.反相流動相:有機相甲醇、有機相乙腈、水相緩沖鹽。緩沖鹽的范圍實在是太廣了,磷酸鹽緩沖液,醋酸鹽緩沖液等等b.正相流動相:乙醇、四氫呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相:碳十八柱(C18)、碳八柱(C8)、苯基柱b.正相:氨基柱、氰
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅膠、氨基鍵合、氰基鍵合3、流動相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形狀1、全多孔型最初由氧化硅、氧化鋁、硅藻土等制成的多孔球體 ?100μm的大顆粒,表面涂漬固定液。傳質速度慢,柱效低。?現采用10μm以下的小顆粒。2、表面多孔型(薄殼型微珠)?30~40μm
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅膠、氨基鍵合、氰基鍵合3、流動相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形狀1、全多孔型最初由氧化硅、氧化鋁、硅藻土等制成的多孔球體 ?100μm的大顆粒,表面涂漬固定液。傳質速度慢,柱效低。?現采用10μm以下的小顆粒。2、表面多孔型(薄殼型微珠)?30~40μm
怎樣正確配置高效液相色譜儀流動相?
高效液相色譜儀的分離原理主要取決于流動相和固定相的吸附和解吸。流動相的正確配置對實驗數據和分離效果至關重要。首先,流動相構型中應注意的問題-一般情況下,溶劑的混合是根據體積比(V≤V)或重量比(W≤W)進行的。高效液相色譜儀的色譜法所需的甲醇、乙腈等試劑必須為色譜純級。其他試劑也應盡可能為色譜純級。
高效液相色譜儀流動相選擇要求?
高效液相色譜儀流動相選擇要求?1.流動相的性質要求液相色譜理想的流動相溶劑應具有粘度低、與檢測器相容性好、易于獲得純產品、毒性低等特點。選擇流動相時應考慮以下方面:流速不會改變填料的任何性質 離子交換樹脂的低交聯度和排斥色譜填料有時會使有機相發生一定的膨脹或收縮,從而改變填料床的性能。 堿性流動相不
實驗室高效液相色譜儀選擇流動相的pH值
采用反相色譜法分離弱酸(3≤pKa≤7)或弱堿(7≤pKa≤8)樣品時,通過調節流動相的pH值,以抑制樣品組分的解離,增加組分在固定相上的保留,并改善峰形的技術稱為反相離子抑制技術。對于弱酸,流動相的pH值越小,組分的k值越大,當pH值遠遠小于弱酸的pKa值時,弱酸主要以分子形式存在;對弱堿,情況相
液相色譜流動相脫氣
流動相的脫氣HPLC所用流動相必須預先脫氣,否則容易在系統內逸出氣泡,影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率,影響檢測器的靈敏度、基線穩定性,甚至使無法檢測。(噪聲增大,基線不穩,突然跳動)。此外,溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相(如烷基胺)反應。溶解氣體還會引起溶劑PH的變化,對分
液相色譜流動相小議
一、液相色譜流動相的性質要求一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。選好填料(固定相)后,強溶劑使溶質在填料表面的吸附減少,相應的容量因子k降低;而較弱的溶劑使溶質在填料表面吸附增加,相應的容量因子k升高。因此,k值是流動相組成的函數。塔板數N一般與流
簡介高效液相色譜(HPLC)流動相的性質要求
(1)流動不會相應地改變填料的任何性質 低交聯度離子交換樹脂和排斥色譜填料有時會遇到一些有機相的膨脹或收縮,從而改變色譜柱填料床的性能。堿性流動相不能用于硅膠柱體系中,酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附柱體系中。 (3)必須與探測器配套。當使用紫外檢測器時,所用的流動相在檢測波長上不應吸收
高效液相色譜色譜柱的填料和流動相的組分介紹
應按各品種項下的規定,常用的色譜柱填料有硅膠和化學鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用辛基鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用;離子交換填料用于離子交換色譜;凝膠或玻璃微球等,用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數微升。除另有規定外,柱溫為室溫,檢測器為紫外吸收檢測器。 在用紫外吸收檢
高效液相色譜儀的流動相和固體相哪個極性大
根據流動相和固定相相對極性不同,液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動相極性大于固定相極性的,稱為反相色譜。固定相極性大于流動相極性的,稱之為正相色譜。高效液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載
液相色譜流動相的濾過
流動相的濾過所有溶劑使用前都必須經0.45μm(或0.22μm)濾過,以除去雜質微粒,色譜純試劑也不例外(除非在標簽上標明“已濾過”)。用濾膜過濾時,特別要注意分清有機相(脂溶性)濾膜和水相(水溶性)濾膜。有機相濾膜一般用于過濾有機溶劑,過濾水溶液時流速低或濾不動。水相濾膜只能用于過濾水溶液,嚴禁用