細胞工廠的構建理念
細胞工廠的設計通常是以產品的高效生產為理念,并在此過程中是遵循以下五大準則:(ⅰ) 構建一條由原料到產品的最優合成途徑;(ⅱ) 平衡代謝途徑中每步反應的代謝流,使該途徑代謝通量遠高于細胞基礎代謝;(ⅲ) 足量地供應合成途徑的前體,多個前體根據需要調整供應比例;(ⅳ) 酶促反應往往有各種輔因子的參與,順暢的代謝通路需要平衡或者再生各種輔因子;(ⅴ) 通過遺傳改造或者工藝改進解除產物和代謝中間體的反饋抑制,以獲取更高的產量。除此之外,構建細胞工廠還需要許多合成生物學領域的技術支撐:(ⅰ) 基因組編輯技術:基因組編輯技術是細胞工廠代謝途徑構建及優化的重要技術,即基因表達強度調控、基因整合、基因敲除等。(ⅱ) 多基因同時調控技術:通常情況下,產物合成的效率并不是單一因素的影響的,而是在多重因素的共同作用下對其進行調控。(ⅲ) 基因動態調控技術:根據選定的某種細胞體內代謝信號自動調節特定基因的表達,從而維持代謝途徑的動態平衡,達到提高產品......閱讀全文
細胞工廠的構建理念
細胞工廠的設計通常是以產品的高效生產為理念,并在此過程中是遵循以下五大準則:(ⅰ) 構建一條由原料到產品的最優合成途徑;(ⅱ) 平衡代謝途徑中每步反應的代謝流,使該途徑代謝通量遠高于細胞基礎代謝;(ⅲ) 足量地供應合成途徑的前體,多個前體根據需要調整供應比例;(ⅳ) 酶促反應往往有各種輔因子的參與,
科學家構建細胞工廠的“動力引擎”
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/10/488410.shtm 論文截圖 隨著合成生物學的快速發展,微生物具備強大而多樣的生化反應網絡,有望成為利用可再生資源為原料生產各類高附加值產品的“細胞微工廠”。 如何讓微生物這一“細胞微工廠
我國學者首次構建大腸桿菌電能細胞工廠
微生物電合成(Microbial electrosynthesis,MES) 技術是微生物利用電能作為還原力將CO2、葡萄糖或者其它底物還原合成為各種目標化學品的過程。隨著溫室氣體CO2的過量排放, 微生物電合成作為一種綠色可持續和有前途的生物固碳技術,越來越成為科學家們研究的熱點。 微生物電
理性設計構建合成能量系統雙引擎助力細胞工廠
10月27日,中國科學院深圳先進技術研究院于濤課題組的最新研究成果以“Metabolic reconfiguration enable synthetic reductive metabolism in yeast”為題發表于Nature Metabolism。研究團隊通過理性設計,組合磷酸戊糖循環
合成生物學促進微生物細胞工廠構建
細胞工廠操作系統 自然微生物能生產的化學品種類很少,遠不能滿足生產能源、化工、材料和藥物領域各種化學品的需求。另一方面,自然微生物即使能生產某些化學品,其產量也很低,不具備經濟可行性。 如何拓展微生物細胞生產化學品的種類和如何提高細胞的生產效率是限制
青島能源所構建高效產烴細胞工廠研究獲進展
脂肪烴是液體化石燃料的主要組成部分,具有高能量密度、低吸濕性和低揮發性等優點,并且與現有發動機和運輸設備有著較好的兼容性。隨著藍細菌等天然產烴微生物脂肪烴合成途徑的發現,利用這類天然途徑作為合成生物學元件構建高效細胞工廠,成為一種可持續、可再生制備脂肪烴生物燃料的潛在途徑。然而目前已報道的生物產
高效生物合成類胡蘿卜素細胞工廠構建成功
? ? ?兩種不同的解除酶底物抑制的代謝工程策略? ? ? 中國農科院供圖? ? 近日,《自然—通訊》(Nature Communications)在線發表了中國農業科學院深圳農業基因組研究所黃三文團隊和美國麻省理工學院科研團隊合作研究的成果,研究揭示了兩種不同的解除酶底物抑制的代謝工程策略
微生物源藥物細胞工廠構建與生產示范項目啟動
4月13日,由中國科學院南海海洋研究所(以下簡稱南海海洋所)牽頭承擔的國家重點研發計劃“合成生物學”重點專項“微生物源藥物細胞工廠構建與生產示范”項目啟動暨實施方案論證會在廣州召開。中國科學院院士鄧子新、中國工程院院士張偲等出席活動。南海海洋所所長李超倫表示,南海海洋所作為項目牽頭單位高度重視該項目
Nunc細胞工廠
Nunc細胞工廠 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用培養液制備細胞懸液,將懸液注入單元的各小室內。使長邊朝下,放置。將單元旋轉 90度,放平后用 CO2 充氣。然后封閉,進行培
Nunc細胞工廠
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用培養液制備細胞懸液,將懸液注入單元的各小室內。使長邊朝下,放置。將單元旋轉 90度,放平后用 CO2 充氣。然后封閉,進行培養。 實驗材料
Nunc細胞工廠
實驗方法原理用培養液制備細胞懸液,將懸液注入單元的各小室內。使長邊朝下,放置。將單元旋轉 90度,放平后用 CO2?充氣。然后封閉,進行培養。實驗材料單層細胞0.25%天然胰蛋白酶D-PBSA試劑、試劑盒生長培養液儀器、耗材Nunc細胞工廠硅酮管和連接器血細胞計數板或電子細胞計數器和計數用液體實驗步
在富馬酸合成高溫真菌細胞工廠構建方面取得新進展
富馬酸作為重要的有機酸,被廣泛應用于工業、醫藥以及食品生產之中。構建以可再生碳水化合物為原料、發酵生產有機酸細胞工廠是生物制造戰略性新興產業重要內容,高溫發酵體系在發酵工業中具有顯著節省冷卻用能、減少染菌等優勢,研發大宗化學品高溫發酵菌種對發酵工業節能減排具有重要意義。 中國科學院天津工業生物
我國科學家構建高效生物合成類胡蘿卜素細胞工廠
酶底物抑制效應是影響微生物異源生物合成天然產物效率的主要因素之一,尤其是存在于生物合成途徑的中間環節時,特別不利于目標產物的合成。然而如何有效去除底物抑制目前報道不多。近期,我國科學家構建了高效異源生物合成類胡蘿卜素的細胞工廠,研究成果發表在《Nature Communications》期刊,標
天津工生所在人參皂苷細胞工廠構建方面取得新進展
人參皂苷(Ginsenosides)是名貴中藥材人參(Panax ginseng)的主要活性成分。原人參二醇(protopanaxadiol)作為人參二醇型人參皂苷的苷元,其本身具有抗癌、抗抑郁、激活氯離子通道和抑制鈉離子通道去極化的作用、抑制人胚腎HEK-293細胞和幽門螺旋桿菌生長等多種
利用二氧化碳合成葡萄糖的細胞工廠成功構建
近日,中國科學院青島能源所微生物制造工程中心研發出以藍細菌為平臺,應用合成生物技術和系統生物技術重塑聚球藻細胞的光合代謝網絡,構建了直接利用二氧化碳合成并分泌葡萄糖的細胞工廠,并揭示了決定葡萄糖高產和分泌的分子機制。 葡萄糖是自然界含量最為豐富的單糖,是細胞的基本能量來源,也是生物煉制工業的重
細胞工廠的基本步驟
1、培養結束后將培養液倒出,使用無鈣無鎂磷酸鹽緩沖液(CMF-PBS)清洗(40-50 ml/層),若有需要重復清洗一次。2、消化:消化液(10-40 ml/層)提前預熱。3、收集:1000 rpm 離心5分鐘,去除消化液,收集細胞。4、清洗:用CMF-PBS或培養基清洗消化過的培養器。
細胞工廠的操作流程
細胞工廠一般用于細胞的擴大培養,首先在操作前需要根據工廠的培養面積來確定細胞接種的數量。根據細胞瓶中單位面積細胞培養的數量,乘以細胞工廠的培養面積,再除以培養細胞的接種比例即可。其次要準備好細胞培養時所需的工作液,如血清、蛋白酶等。準備工作做好以后,就可以將液體注入容器內部了,直接通過進液口傾倒就可
什么是細胞工廠?
細胞工廠是應用細胞生物學與分子生物學的理論和方法,在細胞培養過程中對細胞的生長速度、新陳代謝等監控,進行大規模的細胞和組織培養和觀察的方法。
細胞工廠的特點和應用
細胞工廠因可靈活地選擇細胞培養的層數與培養面積,結構緊密,受污染風險低,使其在批量生產疫苗、單克隆抗體或制藥工業等方面應用廣泛。學習過生物學的人都知道,不論是動物、植物的細胞,還是單細胞的微生物,都是一個**的工廠。細胞中能合成生命活動必需的物質,比起化工廠來,細胞的本領要大得多。它不僅能合成簡單的
細胞工廠的使用方法
細胞工廠的使用應該遵循一定的方法及步驟,如果操作不當,將影響后期的細胞培養工作,細胞工廠的使用步驟如下:1、用傾倒的方式加入需要量的細胞懸液到細胞工廠中,建議每層加入的體積為200ML。2、加完細胞懸液后保持細胞工廠側立,有加液口的一側背向自己,平衡一段時間以使液體平均分配到各層。3、逆時針旋轉90
張學禮等丁二酸細胞工廠構建及高效合成機制解析獲進展
丁二酸是一種優秀的平臺化合物,在化工、材料、醫藥、食品領域有著廣泛的用途,被美國能源部列為未來12種最有價值的平臺化合物之一。作為C4平臺化合物,其可用于合成1,4-丁二醇、四氫呋喃、γ-丁內酯以及生物可降解材料聚丁二酸丁二醇酯(PBS)。構建高效生產丁二酸的微生物細胞工廠,將可再生的生物質資源
影響細胞工廠貼壁性能的因素
影響細胞工廠貼壁性能的因素主要包括產品的材質和處理工藝兩方面:細胞工廠的材質一般要滿足USPVI要求,這是是塑料材質在醫療領用及管道產品在生物制藥方面應用的最為嚴格的測試,是符合各項實驗規范的非臨床實驗室研究。滿足這一條件的耗材才能從根本上保證產品本身的生物相容性,是否適用于醫療器械植入物及其它系統
Cell:拯救受困的細胞工廠
利用強大的數據處理技術,來自約翰霍普金斯大學的研究人員闡明了一種蛋白阻止缺陷遺傳物質擾亂細胞運作的機制。這種稱作為Dom34的蛋白似乎在蛋白質制造工廠——核糖體陷入遵從缺陷遺傳指令的困境時“拯救”了它。這一研究發現發表在近期的《細胞》(Cell)雜志上。 約翰霍普金斯大學醫學院分子生物學與
細胞化學詞匯復制工廠模型
中文名稱:復制工廠模型英文名稱:replication factory model定 義:一種關于細胞內染色體DNA復制過程中DNA復制體的組構及其定位的模型。認為在DNA復制過程中,復制體處在一個固定的位置,同時由多個復制體聚集在一起形成復制工廠,而模板鏈則是通過在復制工廠內移動來完成DNA復制
穩定細胞株構建
穩轉細胞系(穩定表達細胞株)指在細胞中持續穩定表達特定基因或干擾特定基因表達。穩轉細胞株的目的基因質粒DNA整合到細胞染色體上,使細胞長期穩定表達該基因。穩轉細胞株包括多克隆穩轉細胞株和單克隆穩轉細胞株。慢病毒感染目的細胞后,通過抗性基因篩選得到的細胞株是多個細胞克隆的組合。單克隆細胞株是從多克隆細
癌細胞“能量工廠”影響免疫療效
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/1/516904.shtm
穩定轉染細胞株的構建
1. 2?穩定轉染細胞株的構建原理:穩定轉染,就是轉染的質粒DNA整合到宿主細胞染色體上,使宿主細胞可長期表達目的基因及蛋白。需要在瞬時轉染基礎上對靶細胞進行篩選或者應用高轉染效率的病毒,根據不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的藥物進行細胞傳代,從而得到可穩定表達目的基因的細胞系。應用:????
細胞株是如何構建的?
1,什么是瞬時轉染和穩定轉染?瞬時轉染:外源片段的表達時間短暫。這主要是因為外源導入的裸露的載體整合入基因組的幾率非常低,所以以染色體外(episomal)形式存在,不能隨細胞分裂而一同復制導致后拷貝數被稀釋導致的。而且考慮到細胞分裂會稀釋質粒的量,所以起初轉染的質粒拷貝數極高。這就導致瞬時轉染呈現
Science:細胞的能量工廠如何免于攻擊損傷
線粒體是細胞中的能量工廠,其對于機體健康非常重要,當線粒體受到攻擊,比如毒物、環境壓力或遺傳突變時,細胞就會對其進行修復從而形成可用的線粒體;如今刊登在Science上的一項研究報告中,來自索爾克研究所的科學家們揭開了一種特殊機制,即細胞如何誘發針對危險的關鍵反應,從而為理解線粒體疾病、癌癥、糖
細胞工廠在收獲細胞時還要注意什么?
細胞工廠在收獲細胞時還要注意以下幾點:1、確保CMF-PBS完全浸過每層培養面,并輕輕前后晃動細胞工廠,將殘留的培養液清洗干凈。2、消化液平均分布到每層,輕輕前后左右傾斜培養器,確保消化液完全浸過培養面,輕輕拍擊培養器幫助細胞從表面脫離。3、對于細胞工廠,由于不能清晰觀察中間層的細胞消化狀態,建議參