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    轉膜時間過長,電壓過大會不會對蛋白有影響

    確定是轉膜不穩定造成的而不是電泳的問題?電泳后的條帶正常?可能很多原因~轉膜液離子強度不對~轉膜電壓電流不穩定~轉膜儀的問題~一般來說濕轉比半干轉更穩定一些~只不過時間長~......閱讀全文

    小分子轉膜時間

    小分子的話就不要過夜轉,采取100V一小時應該就可以了,注意降溫。知識補充蛋白的分子量 是理論的分子量 其實還可能有一些修飾的 比如乙酰化 糖基化等那么要考慮分子量的問題 其次 你買的抗體怎么樣?特異性 效價 親和力等 是否適合做WB? 再次 你可以用預染的蛋白marker試一試 確定你的目的蛋白沒

    western轉膜時間和電流

    300mA90分鐘,我們是1.0的膠厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚膠要時間長一些,另外你做的蛋白如果超過100kd建議時間更長一些,若是小蛋白就減少轉模時間,立春紅確定最適時間

    轉膜時間太長,小蛋白會不會從膜中穿過

    影響因素應該有很多;一、首先需確定目的蛋白是否在膠上:跑完電泳可以先考馬斯亮藍染膠,如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰條帶,基本可以確定蛋白已經在膠上跑開。二、膜的準備:1.根據被轉移的蛋白分子量大小,選擇不同孔徑的pvdf膜。因為隨著膜孔徑的不斷減小,膜對低分子量蛋白的結合就越牢固。通

    轉膜時間太長,小蛋白會不會從膜中穿過

    影響因素應該有很多;一、首先需確定目的蛋白是否在膠上:跑完電泳可以先考馬斯亮藍染膠,如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰條帶,基本可以確定蛋白已經在膠上跑開。二、膜的準備:1.根據被轉移的蛋白分子量大小,選擇不同孔徑的pvdf膜。因為隨著膜孔徑的不斷減小,膜對低分子量蛋白的結合就越牢固。通

    轉膜時間太長,小蛋白會不會從膜中穿過

    影響因素應該有很多;一、首先需確定目的蛋白是否在膠上:跑完電泳可以先考馬斯亮藍染膠,如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰條帶,基本可以確定蛋白已經在膠上跑開。二、膜的準備:1.根據被轉移的蛋白分子量大小,選擇不同孔徑的pvdf膜。因為隨著膜孔徑的不斷減小,膜對低分子量蛋白的結合就越牢固。通

    目的蛋白分子量與轉膜時間對應關系

    轉膜分干轉和濕轉,恒流轉膜一般0.8mA/cm2分子量與轉膜時間對應關系分離膠濃度(%) 線性分離范圍 電泳時間(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

    目的蛋白分子量與轉膜時間對應關系

    轉膜分干轉和濕轉,恒流轉膜一般0.8mA/cm2分子量與轉膜時間對應關系分離膠濃度(%) 線性分離范圍 電泳時間(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

    目的蛋白分子量與轉膜時間對應關系

    轉膜分干轉和濕轉,恒流轉膜一般0.8mA/cm2分子量與轉膜時間對應關系分離膠濃度(%) 線性分離范圍 電泳時間(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

    目的蛋白分子量與轉膜時間對應關系

    轉膜分干轉和濕轉,恒流轉膜一般0.8mA/cm2分子量與轉膜時間對應關系分離膠濃度(%) 線性分離范圍 電泳時間(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

    目的蛋白分子量與轉膜時間對應關系

    轉膜分干轉和濕轉,恒流轉膜一般0.8mA/cm2分子量與轉膜時間對應關系分離膠濃度(%) 線性分離范圍 電泳時間(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

    目的蛋白分子量與轉膜時間對應關系

    轉膜分干轉和濕轉,恒流轉膜一般0.8mA/cm2分子量與轉膜時間對應關系分離膠濃度(%) 線性分離范圍 電泳時間(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

    目的蛋白分子量與轉膜時間對應關系

    轉膜分干轉和濕轉,恒流轉膜一般0.8mA/cm2分子量與轉膜時間對應關系分離膠濃度(%) 線性分離范圍 電泳時間(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

    目的蛋白分子量與轉膜時間對應關系

    轉膜分干轉和濕轉,恒流轉膜一般0.8mA/cm2分子量與轉膜時間對應關系分離膠濃度(%) 線性分離范圍 電泳時間(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0

    電泳、轉膜

    轉膜是把DNA從瓊脂糖凝膠中轉移到固相支持物(一般是尼龍膜)上固定,是進行各種后續研究(如RFLP分析,陽性克隆的篩選驗證等所有涉及分子雜交的研究)的前提。實驗目的:掌握Southern blotting的原理及操作步驟。實驗原理:1. 轉膜的方式:  向上的毛細管轉移  向下的毛細管轉移  同時向

    分子量在22kd轉膜時間可為多少

    分子量相差太大,建議分開轉:22kD按常規轉膜時間;大分子量(170kD)蛋白延長轉膜時間或提高轉膜電壓(注意保持低轉膜溫度);如果二者必須一起轉,那就適當延長轉膜時間吧,希望你的22kD不要轉過了。

    lc3的轉膜時間多少電壓電流多大

    轉膜的時候電壓40v,可以看到電流先下降后上升。我轉膜的時候就這樣的,轉膜效果挺好的。轉膜液隨著使用次數增多,電阻增大,相應電流下,電壓增大,建議每次轉膜液使用2~3次就換新的,這個是正常的,恒壓的時候,電流也是會變化的,這是關于電泳液的問題,用的時間久了就會出現這樣的問題,可以經常換電泳液

    Western轉膜步驟

    下面的步驟適用于通過Xcell Ⅱ轉印系統進行蛋白印記的大部分應用。為達到最佳效果,用戶的優化是必要的。I. 所需材料:?Xcell SureLock?或Xcell Ⅱ? Mini-Cell以及Blot Module(Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051)?電泳后的迷你膠

    電泳、轉膜概述

    轉膜是把DNA 從瓊脂糖凝膠中轉移到固相支持物(一般是尼龍膜)上固定,是進行各種后續研究(如 RFLP 分析,陽性克隆的篩選驗證等所有涉及分子雜交的研究)的前提。實驗目的:掌握 Southern blotting 的原理及操作步驟實驗原理:1.轉膜的方式:向上的毛細管轉移向下的毛細管轉移同時向兩張膜

    Southern轉膜方法

    Southern轉膜方法(毛細管虹吸印跡法、電轉移法與真空轉移法)將凝膠中的DNA進行堿變性并將pH值恢復至中性后,即可將凝膠中的DNA片段轉移到固相支持物上。用于轉膜的固相支持物有多種,包括硝酸纖維素濾膜(NCM)、尼龍膜、化學活性膜和濾紙等,Southern轉膜時可根據需要選擇不同的固相支持物用

    WB轉膜時間與分子量及膠厚度的關系

    分子量越大轉膜時間越長,60KD轉膜可以用300毫安恒流100min,20KD的話一個小時足夠了,膠越厚越不容易轉完全,不建議用1.5的膠。

    轉膜時間過長,電壓過大會不會對蛋白有影響

    確定是轉膜不穩定造成的而不是電泳的問題?電泳后的條帶正常?可能很多原因~轉膜液離子強度不對~轉膜電壓電流不穩定~轉膜儀的問題~一般來說濕轉比半干轉更穩定一些~只不過時間長~

    轉膜時間過長,電壓過大會不會對蛋白有影響

    確定是轉膜不穩定造成的而不是電泳的問題?電泳后的條帶正常?可能很多原因~轉膜液離子強度不對~轉膜電壓電流不穩定~轉膜儀的問題~一般來說濕轉比半干轉更穩定一些~只不過時間長~

    轉膜時間過長,電壓過大會不會對蛋白有影響

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    western-blot實驗怎么樣轉膜能夠節省時間

    轉膜你用的是濕轉的方法嗎?濕轉速度比較慢,一般的半干轉能快點,30-45min轉完,現在市面上有很多快速半干轉,3-15min可以完成轉印,可以在轉膜這一步節約一些時間。我還能想到另外一個可以節約時間的部分,就是檢測,如果以前壓膠片,現在可以考慮用成像儀,這個也可以節省一些時間。至于抗體孵育的時間,

    轉膜時間過長,電壓過大會不會對蛋白有影響

    確定是轉膜不穩定造成的而不是電泳的問題?電泳后的條帶正常?可能很多原因~轉膜液離子強度不對~轉膜電壓電流不穩定~轉膜儀的問題~一般來說濕轉比半干轉更穩定一些~只不過時間長~

    轉膜時間過長,電壓過大會不會對蛋白有影響

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    轉膜時間過長,電壓過大會不會對蛋白有影響

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    western轉膜放置問題

    1. 定義轉膜時與膠接觸的一面為“正”2. 封閉時使用封閉液,液體蓋過膜就好,所以無所謂正反3. 假如用暗室顯影法,將顯影的試劑與“正”面接觸,膠片與“正面”接觸4. 假如用熒光的話,理論上“正”面朝下,掃描,但實際操作過程中貌似都可以的

    wb轉膜條件公式

    wb轉膜條件公式:10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體(例如NC膜)上,通常有兩種方法:毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同,只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易,轉移效率高;而后者適用于大膠的蛋白

    wb轉膜條件公式

    wb轉膜條件公式:10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體(例如NC膜)上,通常有兩種方法:毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同,只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易,轉移效率高;而后者適用于大膠的蛋白

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