二合一液相系統:混合分析與制備功能的HPLC系統
當液相色譜法被用于目標化合物的分離純化時,首先需要使用一套制備型的LC系統來開發相應的純化方法,然后,分析型HPLC則被用于純化后的純度和含量分析。在這種情況下,往往需要準備兩套HPLC系統,一個專門用于制備分離,另一個用于純度分析,這無疑對于儀器采購來說增加了成本負擔。 KNAUER新發布的二合一液相系統,混合了分析與制備兩種功能,能夠將單一物質從混合物中分離出來,并進行自動的純度分析。該系統能幫助您建立一種混合的方法,同時支持流速高達50ml/min的制備分離以及目標純化后的HPLC純度和含量分析。 二合一液相系統的優點: 1)只需一套泵,兼顧分析與制備方法的流速需求,節省采購成本; 2)制備-分析自動連續運行,縮短制備-分析流程時間和減少人工操作; 二合一液相系統 該系統只需一個流速50ml/min的高壓泵AZURA P6.1L來運行制備和分析方法所需的洗脫流速,搭配八波長檢測器MWD 2.1L來實現制備和......閱讀全文
二合一液相系統:混合分析與制備功能的HPLC系統
當液相色譜法被用于目標化合物的分離純化時,首先需要使用一套制備型的LC系統來開發相應的純化方法,然后,分析型HPLC則被用于純化后的純度和含量分析。在這種情況下,往往需要準備兩套HPLC系統,一個專門用于制備分離,另一個用于純度分析,這無疑對于儀器采購來說增加了成本負擔。 KNAUER新發布的
液相色譜(HPLC)入門(四)
高效液相色譜分離模式總的來說,化合物的三種主要的性質可以用來產生高效液相色譜分離。它們是:· 極性· 電荷· 分子大小首先,讓我們考慮極性和根據這一特性的兩種主要分離模式:正相和反相色譜。基于極性的分離一個分子的結構、活性和物化性質由組成它的原子和化學鍵決定。在一個分子內部,決定了其特殊性質和可預測
液相色譜(HPLC)入門(五)
正相高效液相色譜在植物提取物的分離過程中,茨維特成功運用極性固定相[玻璃柱中的粉筆末; 如圖A]和弱極性[非極性]流動相。這種經典的色譜模式被稱為正相。圖 S -1: 正相色譜法圖 S -1 代表三個染料混合物的正相色譜分離。極性的固定相最強地保留了極性的黃色染料。相對非極性的藍色染料在非極
液相色譜(HPLC)入門(二)
什么是色譜圖?色譜圖表示發生在高效液相色譜系統中的化學[色譜]分離。一系列從基線出現的峰以時間為坐標。每個峰代表對不同化合物的檢測器反應。色譜圖由計算機數據站描繪。[如圖 H].Figure H: How Peaks Are Created圖H中,黃色譜帶完全通過了檢測器流通池;產生的電信號被送到計
液相色譜(HPLC)入門(一)
什么是液相色譜?歷史概述和定義液相色譜的定義是二十世紀早期由俄羅斯植物學家 Mikhail S. 茨維特提出的。他最先嘗試在裝滿顆粒的柱子上使用溶劑來分離從植物中提取的化合物[樹葉色素]。茨維特用顆粒填滿開口的玻璃柱。他發現兩種特殊的材料,粉筆末(碳酸鈣)和氧化鋁很有用。他將樣品[混勻植物葉
液相色譜(HPLC)入門(三)
高效液相色譜量級 [分析,制備和工程]我們已經討論了高效液相色譜如何提供分析數據,用于定性和定量樣品中的化合物。然而,高效液相色譜也可以用來純化和收集所需的每一個化合物,在流通池下游使用組分收集器。這個過程被稱為制備液相[如圖 K].在制備液相中,科學家可以收集每個流出色譜柱的組分[例如:在本例中,
液相色譜(HPLC)漏液怎么辦
通常可以通過擰緊或更換管路接頭來解決漏液的問題。但值得注意的是過份擰緊會導致金屬接頭的漏液和塑料接頭的磨損。如果通過稍微擰緊接頭不能解決漏液的問題,就必須將接頭取下,檢查是否損壞(例如,卡套損壞、密封表面有雜質);損壞的接頭應該更換掉。 1. 接頭處漏液。 一般通過擰緊、清洗、更
超純水對液相(HPLC)實驗影響
? ? 隨著時代和科技的發展,液相等精密分析儀器已普及至與分析測試有關的行業,對實驗水質要求也愈來愈高。現今液相(HPLC)都要求用戶使用超純水定出平坦而沒有波峰的基線以保證分析測試的靈敏度,但有部分HPLC用戶因資金或習慣等原因仍沿用瓶裝飲用純凈水或蒸餾水進行實驗,效果往往不很理想。????? 瓶
高壓液相色譜(HPLC)系統組成(一)
?HPLC系統一般由??輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、數據記錄及處理裝置?等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、預柱或保護柱、柱溫控制器等,現代HPLC儀還有微機控制系統,進行自動化儀器控制和數據處理。制備型HPLC儀還備有自動餾分收集裝置
高效液相色譜(HPLC)常見問題
1、HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法?樣品量不足:解決辦法為增加樣品量樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器檢測器衰減太多:調整衰減即可。檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數檢測器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。檢測
Thermo-Scientific-Syncronis-HPLC-液相色譜柱
開發新方法時,色譜工作者最重要的目標之一就是實現一致的、可重現的分離。為此,就需要選擇重現性高的HPLC 色譜柱。 新一代Thermo Scientific Syncronis HPLC 色譜柱通過選用超純硅膠、自動裝填工藝、嚴格的檢測和控制程序幫助色譜工作者達到滿意的
高效液相色譜(HPLC)常見問題
1、HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法樣品量不足:解決辦法為增加樣品量樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器檢測器衰減太多:調整衰減即可。檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數檢測器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。檢測池
高壓液相色譜(HPLC)系統組成(二)
四、檢測器?? ??檢測器是HPLC儀的三大關鍵部件之一。其作用是把洗脫液中組分的量轉變為電信號。HPLC的檢測器要求靈敏度高、噪音低(即對溫度、流量等外界變化不敏感)、線性范圍寬、重復性好和適用范圍廣。?1.分類?1)按原理可分為光學檢測器(如紫外、熒光、示差折光、蒸發光散射)、熱學檢測器(如吸附
高效液相(HPLC)流動相走干了怎么辦
1.換上足量新的流動相或超純水;2.擰開排氣閥,開大流速進行排氣,如果泵不能吸液,可以擰開出口單向閥的出口螺絲,直至有液體流出再擰緊(建議用注射器把溶劑過濾頭到比例閥入口那段管路的氣泡抽光,免得柱塞桿長時間干跑而損壞柱塞桿);3.把柱子換成雙通,不接流通池,擰緊排氣閥,開大流速把系統管路里的氣泡沖走
高效液相(HPLC)流動相走干了怎么辦
1.換上足量新的流動相或超純水;2.擰開排氣閥,開大流速進行排氣,如果泵不能吸液,可以擰開出口單向閥的出口螺絲,直至有液體流出再擰緊(建議用注射器把溶劑過濾頭到比例閥入口那段管路的氣泡抽光,免得柱塞桿長時間干跑而損壞柱塞桿);3.把柱子換成雙通,不接流通池,擰緊排氣閥,開大流速把系統管路里的氣泡沖走
高效液相色譜(HPLC)流動相的性質要求
高效液相色譜(HPLC)流動相溶劑具有粘度低、與檢測器相容性好、產品易得、毒性低等特點。選擇填料(固定相)后,強溶劑對填料表面溶質的吸附降低,相應的容量因子K降低。然而,較弱的溶劑增加了溶質在填料表面的吸附,相應的容量因子k也增加了? 因此,k值是流動相組成的函數? 塔板數n通常與流動相的粘度成反比
高效液相(HPLC)流動相走干了怎么辦?
1.換上足量新的流動相或超純水;2.擰開排氣閥,開大流速進行排氣,如果泵不能吸液,可以擰開出口單向閥的出口螺絲,直至有液體流出再擰緊(建議用注射器把溶劑過濾頭到比例閥入口那段管路的氣泡抽光,免得柱塞桿長時間干跑而損壞柱塞桿);3.把柱子換成雙通,不接流通池,擰緊排氣閥,開大流速把系統管路里的氣泡沖走
高效液相(HPLC)流動相走干了怎么辦
1.換上足量新的流動相或超純水;2.擰開排氣閥,開大流速進行排氣,如果泵不能吸液,可以擰開出口單向閥的出口螺絲,直至有液體流出再擰緊(建議用注射器把溶劑過濾頭到比例閥入口那段管路的氣泡抽光,免得柱塞桿長時間干跑而損壞柱塞桿);3.把柱子換成雙通,不接流通池,擰緊排氣閥,開大流速把系統管路里的氣泡沖走
高效液相(HPLC)流動相走干了怎么辦
1.換上足量新的流動相或超純水;2.擰開排氣閥,開大流速進行排氣,如果泵不能吸液,可以擰開出口單向閥的出口螺絲,直至有液體流出再擰緊(建議用注射器把溶劑過濾頭到比例閥入口那段管路的氣泡抽光,免得柱塞桿長時間干跑而損壞柱塞桿);3.把柱子換成雙通,不接流通池,擰緊排氣閥,開大流速把系統管路里的氣泡沖走
高效液相(HPLC)流動相走干了怎么辦
1、Dry Prime,呵呵,既然流動相都干了,那流路大概也干了進行dryprime的操作步驟如下1.輕輕振搖溶劑瓶中的過濾頭以除去可能留存的氣泡.2.在灌注排液閥出口插上一支注射器,然后打開排液閥(反時針旋轉半圈).不要將注射器固定在排液閥上,而要用手將其貼緊閥的出口.3.選擇DryPrime,然
高效液相色譜技術(HPLC)的技術原理
盡管二維凝膠電泳(2-DE)是常用的對全蛋白組的分析方法,但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong等使用HPLC/質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC分離蛋白質,并用MALDI-
高效液相色譜技術(HPLC)的技術原理
盡管二維凝膠電泳(2-DE)是常用的對全蛋白組的分析方法,但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong 等使用HPLC/ 質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC 分離蛋白質,并用MAL
超純水對液相(HPLC)實驗的影響
? ? ?隨著時代和科技的發展,液相等精密分析儀器已普及至與分析測試有關的行業,對實驗水質要求也愈來愈高。現今液相(HPLC) 都要求用戶使用超純水定出平坦而沒有波峰的基線以保證分析測試的靈敏度,但有部分HPLC用戶因資金或習慣等原因仍沿用瓶裝飲用純凈水或蒸餾水進行實驗,效果往往不很理想。? ? ?
簡介高效液相色譜(HPLC)流動相的性質要求
(1)流動不會相應地改變填料的任何性質 低交聯度離子交換樹脂和排斥色譜填料有時會遇到一些有機相的膨脹或收縮,從而改變色譜柱填料床的性能。堿性流動相不能用于硅膠柱體系中,酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附柱體系中。 (3)必須與探測器配套。當使用紫外檢測器時,所用的流動相在檢測波長上不應吸收
超純水對高效液相(HPLC)實驗的影響
隨著時代和科技的發展,高效液相等精密分析儀器已普及至與分析測試有關的行業,對實驗水質要求也愈來愈高。現今高效液相(HPLC) 都要求用戶使用超純水定出平坦而沒有波峰的基線以保證分析測試的靈敏度,但有部分HPLC用戶因資金或習慣等原因仍沿用瓶裝飲用純凈水或蒸餾水進行實驗,效果往往不很理想。瓶裝純凈
液相色譜HPLC檢測器及檢測限
在定義檢測器靈敏度時,只考慮了樣品響應信號的大小,并沒有考慮檢測器的噪聲。當檢測器噪聲與響應信號大小相近時,兩者就無法區分。而且對于某些檢測器,其輸出信號要經過放大后才能輸出到記錄儀。電子放大器幾乎可以把一個信號放大到任意倍數,這樣似乎可以任意提高檢測器的靈敏度。其實不然,因為在放大信號時也同時放大
高效液相HPLC溶劑的選擇及使用(二)
2、溶劑的處理和更換 液相色譜溶劑應盡量使用HPLC級溶劑。HPLC級試劑是用特殊方法生產的含有最少的微粒和最低的紫外吸收物質。水也應達到HPLC級。液相色譜實驗室應配有純水發生器。非色譜純溶劑可通過蒸餾方法進行提純,除掉大部分有紫外吸收的雜質。另外,用氧化鋁或硅膠柱可除去極性強的化合物。
高效液相色譜(HPLC)柱子的清洗和再生
1. 柱子的清洗 即使樣品和流動相已做過前處理,也仍難以完成避免柱子受到污染,因此必須對柱子行清洗。清洗應定期進行,如果在短期內分析許多樣品,則以每日清洗一次為宜,至少也應一周一次,防止有太多的雜質在柱上堆積。 反相柱的常規洗滌辦法是:分別取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱體積(既對于一根4
高壓液相色譜HPLC發展概況、特點及分類
一、液相色譜理論發展簡況色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobilephase)中的各組分經過固定相時,由于與固定相(stationaryphase)發生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。色譜法最早是由俄國
HPLC液相色譜柱柱壓升高原因
HPLC液相色譜柱柱壓升高原因? ? 色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透性,延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱壓升高一般是由于柱床內產生了雜質,造成流體阻力加大所致。格萊普多年從事色譜行業,積累了一些經驗,您可按照以下建議,逐項排除原因:1、流動相的前處理?。