常用的色譜方法(吸附色譜、離子交換色譜和凝膠色...(1)
按色譜分離的機理來分,常用的色譜方法可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜和親合色譜。一、吸附色譜(adsorption chromatography)吸附色譜是指混合物隨流動相通過由吸附劑組成的固定相時,由于吸附劑對不同組分有不同的吸附力,從而不同組分隨流動相移動的速度不同,最終可將混合物中不同組分分離。這種分離方法取決于待分離物質被吸附劑固定相所吸附的能力,以及它們在分離時所用的溶劑流動相中的溶解度這兩個方面的差異。根據操作方式不同,吸附色譜可分柱色譜和薄層色譜兩種。(一)柱色譜(Column chromatography)在柱吸附色譜中,混合物的分離是在裝有適當吸附劑的玻璃管柱中進行的,色譜柱下端鋪墊棉花或玻璃棉,柱內充填溶劑濕潤的吸附劑,待分離樣品自柱頂部加入,樣品完全進入吸附柱后,再用適當的溶液(洗脫液)洗脫。假如待分離的樣品內含有A、B兩種成分,在洗脫過程中隨著流動相流經固定相,它們在柱內連續的分別產生溶解......閱讀全文
常用的色譜方法(吸附色譜、離子交換色譜和凝膠色...(1)
按色譜分離的機理來分,常用的色譜方法可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜和親合色譜。一、吸附色譜(adsorption chromatography)吸附色譜是指混合物隨流動相通過由吸附劑組成的固定相時,由于吸附劑對不同組分有不同的吸附力,從而不同組分隨流動相移動的速度不同,最終可將混合
常用的色譜方法(吸附色譜、離子交換色譜和凝膠色...(2)
常用離子交換劑的類型見表2-1 ?表2-1 常用的離子交換劑的種類及解離基團 ? 種類 解離基團 陽離子交換樹脂 強酸型 ? 弱酸型
常用的色譜方法(吸附色譜、離子交換色譜和凝膠色...(3)
(二)凝膠 凝膠是由膠體溶液凝結而成的固體顆粒狀物質,其內部都具有很微細的多孔網狀結構。目前市場上供應的色譜用凝膠主要有交聯葡凝聚糖、交聯聚丙稀酰胺以及瓊脂糖等。 交聯葡聚糖,瑞典出品商品名稱為Sephadex,國產商品名稱為Dextran,它是由葡聚糖(右旋糖苷)和甘油通過醚橋
分配色譜,吸附色譜和離子交換色譜各是什么
吸附色譜吸附色譜利用固定相吸附中對物質分子吸附能力的差異實現對混合物的分離,吸附色譜的色譜過程是流動相分子與物質分子競爭固定相吸附中心的過程吸附色譜的分配系數表達式如下:向左轉|向右轉其中Xa表示被吸附于固定相活性中心的組分分子含量,Xm表示游離于流動相中的組分分子含量。分配系數對于計算待分離物質組
凝膠過濾色譜、離子交換色譜和疏水作用色譜的主要影響..
凝膠過濾色譜、離子交換色譜和疏水作用色譜的主要影響因素一、凝膠過濾色譜:一般來說,凝膠過濾色譜的結果好壞直接取決于凝膠柱的柱效(每米多少理論塔板數),而影響柱效的因素主要有:1、凝膠本身性質:每一種凝膠均有其合適的分離范圍,應選擇合適的凝膠進行分離。同樣分離范圍的凝膠顆粒越細的,柱效越高。2、色譜柱
凝膠層析柱,離子交換柱,色譜吸附柱
?凝膠柱層層析又稱凝膠過濾,是一種按分子量大小分離物質的層析方法。該方法是把樣品加到充滿著凝膠顆粒的層析柱中,然后用緩沖液洗脫。大分子不能進入凝膠顆粒中的靜止相中,只留在凝膠顆粒之間的流動相中,因此以較快的速度首先流出層析柱,而小分子則能自由出入凝膠顆粒中,并很快在流動相和靜止相之間形成動態平衡,因
吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜(二)
? 薄層色譜法??? 按各單體所規定的載體,放入適當容器,加入適量水以配成懸浮液,在厚度均勻一致的50×200mm或200×200mm平滑玻璃板上將此懸浮液均布成0.25mm的厚度,風干后一般在110度下干燥0.5-1h(或按單體規定)。??? 以離薄層板一端約25mm的位置作為點樣基線,用
吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜(一)
?色譜法,又稱層析法。根據其分離原理,有吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等方法。 吸附色譜是利用吸附劑對被分離物質的吸附能力不同,用溶劑或氣體洗脫,以使組分分離。常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚酰胺等有吸附活性的物質。 分配色譜是利用溶液中被分離物質在兩相中分配系數不同,以使組分分離。其
凝膠滲透色譜(1)
凝膠滲透色譜(Gel Permeation Chromatography、GPC)是1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不僅可用于小分子物質的分離和鑒定,而且可以用來分析化學性質相同分子體積不同的高分子同系物。(聚合物在分離柱上按分子流體力學體積大小被分離開)基本原理分離原理凝膠具有化學惰
吸附色譜的方法原理
固體內部的分子所受的分子間作用力是對稱的,而固體表面的分子所受的力是不對稱的。向內的一面受內部分子的作用力較大,而向外的一面所受的作用力較小,因而當氣體分子或溶液中溶質分子在運動過程中碰到固體表面時就會被吸引而停留在固體表面上。吸附劑與被吸附物分子之間的相互作用是由可逆的范德華力所引起的,故在一定的
吸附色譜中常用的吸附劑種類及其應用范圍和原理
常用的吸附劑有以碳質為原料的各種活性炭吸附劑和金屬、非金屬氧化物類吸附劑(如硅膠、氧化鋁、分子篩、天然黏土等)。衡量吸附劑的主要指標有:對不同氣體雜質的吸附容量、磨耗率、松裝堆積密度、比表面積、抗壓碎強度等。用于濾除毒氣,精煉石油和植物油,防止病毒和霉菌,回收天然氣中的汽油以及食糖和其他帶色物質脫色
吸附色譜中常用的吸附劑種類及其應用范圍和原理
常用的吸附劑有以碳質為原料的各種活性炭吸附劑和金屬、非金屬氧化物類吸附劑(如硅膠、氧化鋁、分子篩、天然黏土等)。衡量吸附劑的主要指標有:對不同氣體雜質的吸附容量、磨耗率、松裝堆積密度、比表面積、抗壓碎強度等。用于濾除毒氣,精煉石油和植物油,防止病毒和霉菌,回收天然氣中的汽油以及食糖和其他帶色物質脫色
吸附色譜和分配色譜有什么不同
一、原理不同 吸附色譜:吸附色譜的原理是吸附劑與被吸附物分子的連續吸附和解吸附。 分配色譜:分配色譜的原理是利用固定相與流動相之間對待分離組分子溶解度的差異來實現分離。 二、影響因素不同 吸附色譜:吸附色譜的影響因素有吸附劑、溶劑和被分離化合物的性質。 分配色譜:分配色譜的影響因素有固
吸附色譜和分配色譜有什么不同
一、原理不同吸附色譜:吸附色譜的原理是吸附劑與被吸附物分子的連續吸附和解吸附。分配色譜:分配色譜的原理是利用固定相與流動相之間對待分離組分子溶解度的差異來實現分離。二、影響因素不同吸附色譜:吸附色譜的影響因素有吸附劑、溶劑和被分離化合物的性質。分配色譜:分配色譜的影響因素有固定相、流動相的性質。三、
吸附色譜和分配色譜有什么不同
一、原理不同吸附色譜:吸附色譜的原理是吸附劑與被吸附物分子的連續吸附和解吸附。分配色譜:分配色譜的原理是利用固定相與流動相之間對待分離組分子溶解度的差異來實現分離。二、影響因素不同吸附色譜:吸附色譜的影響因素有吸附劑、溶劑和被分離化合物的性質。分配色譜:分配色譜的影響因素有固定相、流動相的性質。三、
凝膠色譜的常用固定相有幾種
凝膠色譜的常用固定相有多孔型的半剛性凝膠和剛性凝膠兩大類。半剛性凝膠是以二乙烯基苯交聯的聚苯乙烯,剛性凝膠則多采用剛性硅膠,流動相可以使用水和有機溶劑。
常用的色譜分離方法
在生物大分子純化分析特別是蛋白質純化分析中,色譜是非常重要而且常用的一種技術。??? 一、凝膠過濾 凝膠過濾又叫分子篩色譜,其原因是凝膠具有網狀結構,小分子物質能進入其內部,而大分子物質卻被排除在外部。當一混合溶液通過凝膠過濾色譜柱時,溶液中的物質就按不同分子量篩分開了。??? 二、離子交換色譜
吸附色譜分離方法的建立
吸附色譜在色譜分離中占有非常重要的地位,只要吸附劑和流動相選擇得當,幾乎可以用來分離所有類型的化合物。目前大多數液一固色譜分離都是以全多孔硅膠為固定相。考慮到柱子的耐久性和可靠性,在常規工廠生產控制和不太困難的分離中,用薄殼型硅膠柱往往是更好的選擇,因為薄殼填料柱易于制備、不容易堵塞,并且容易平
色譜柱的選擇和色譜泵常用的材質
色譜柱參數及其意義,選擇色譜柱時應考慮不同色譜柱參數的影響,以下內容對色譜柱的參數進行分析。 1、色譜柱尺寸 較長的色譜柱組分保留較強,運行時間較長,柱效更高,分離度效果更好。在實際工作中應綜合衡量運行時間和柱效,選擇長度適宜的色譜柱。例如含量測定、溶出檢測對于分離的要求較低,可選
離子交換色譜柱的原理和再生方法
離子交換色譜柱是指離子交換色譜中的固定相中的一些帶電荷的基團, 這些帶電基團通過靜電相互作用與帶相反電荷的離子結合。如果流動相中存在其他帶相反電荷的離子,按照質量作用定律,這些離子將與結合在固定相上的反離子進行交換。離子交換色譜柱基本原理:?離子交換色譜是蛋白純化技術中常用的一種純化方法,其原理是指
離子交換色譜柱的原理和再生方法
離子交換色譜柱是指離子交換色譜中的固定相中的一些帶電荷的基團,這些帶電基團通過靜電相互作用與帶相反電荷的離子結合。如果流動相中存在其他帶相反電荷的離子,按照質量作用定律,這些離子將與結合在固定相上的反離子進行交換。 離子交換色譜柱基本原理: 離子交換色譜是蛋白純化技術中常用的一種純化
凝膠色譜
凝膠色譜1.原理凝膠色譜的原理比較特殊,類似于分子篩。待分離組分在進入凝膠色譜后,會依據分子量的不同,進入或者不進入固定相凝膠的孔隙中,不能進入凝膠孔隙的分子會很快隨流動相洗脫,而能夠進入凝膠孔隙的分子則需要更長時間的沖洗才能夠流出固定相,從而實現了根據分子量差異對各組分的分離。調整固定相使用的凝膠
離子交換色譜的保存方法
離子交換色譜是蛋白純化技術中常用的一種純化方法,其原理是指被分離物質所帶的電荷可與離子交換劑所帶的相反電荷結合,這種帶電分子與固定相之間的結合作用是可逆的,在改變pH或者用逐漸增加離子強度的緩沖液洗脫時,離子交換劑上結合的物質可與洗脫液中的離子發生交換而被洗脫到溶液中。由于不同物質的電荷不同,其與離
土壤分析測試技術—色譜分析法基本原理
色譜法又稱色層法或層析法,是一種物理化學分析方法,它利用不同溶質(樣品)與固定相和流動相之間的作用力(分配、吸附、離子交換等)的差別,當兩相做相對移動時,各溶質在兩相間進行多次平衡,使各溶質達到相互分離。色譜法的分類方法很多,通常是根據流動相的狀態將色譜法分成四大類(表3-2)1.基本原理色譜法,又
凝膠過濾色譜與凝膠滲透色譜的區別
凝膠色譜以水為流動相的稱作凝膠過濾色譜,以有機溶劑為流動相的,稱作凝膠滲透色譜。
凝膠過濾色譜-與凝膠滲透色譜的區別
凝膠過濾色譜 與凝膠滲透色譜的區別是凝膠色譜以水為流動相的稱作凝膠過濾色譜,以有機溶劑為流動相的,稱作凝膠滲透色譜。
凝膠色譜柱清洗方法
親水性乙烯基樹脂基質蛋白分離用色譜柱,除了可選用鍵合了離子交換基團的離子交換柱外,還可選用疏水反應、親和等其他多種類型的柱子。?????這些類型的色譜柱,其充填介質化學穩定性好,不易發生由于官能基脫落而導致樣品組分洗脫位置變化的現象。盡管如此,由于柱子的反復使用,在長時間使用后,樣品組分的洗脫情況還
凝膠色譜柱清洗方法
?? 親水性乙烯基樹脂基質蛋白分離用色譜柱,除了可選用鍵合了離子交換基團的離子交換柱外,還可選用疏水反應、親和等其他多種類型的柱子。?? 這些類型的色譜柱,其充填介質化學穩定性好,不易發生由于官能基脫落而導致樣品組分洗脫位置變化的現象。盡管如此,由于柱子的反復使用,在長時間使用后,樣品組分的洗脫情況
液固吸附色譜儀常用溶劑分類
液固吸附色譜儀分析中,溶劑與樣品組分分子之間的作用力有靜電力、誘導力、色散力和氫鍵作用力等。這四種作用力中,主要考慮誘導力和氫鍵作用力,按它們的大小,常用溶劑分類如下:一、I組:脂肪族醚和三烷基胺。二、II組:脂肪醇。三、III組:吡啶衍生物、THF、酰胺(除甲酰胺外)、乙二醇醚和亞砜。四、IV組:
吸附色譜的概念和技術特點
吸附色譜,文獻中也稱之為液固色譜或正相色譜。吸附一詞可能更準確地反映這類分離過程的本質,并與液相色譜的其他技術相區別。吸附色譜是吸附色譜系色譜法的一種,利用固定相吸附中對物質分子吸附能力的差異實現對混合物的分離,吸附色譜的色譜過程是流動相分子與物質分子競爭固定相吸附中心的過程。