RNA干涉(RNAInterference,RNAi)(1)
基因沉默(gene silencing)是生物體內特定基因由于種種原因不表達的遺傳現象。一方面,基因沉默是生物遺傳操作創造新的遺傳修飾生物(genetically modified organisms)的障礙,另一方面,它又是植物抵抗外來核酸入侵(如病毒)的一種反應,為植物抗病毒的遺傳育種提供了具有實用價值的策略:RNA 介導的病毒抗性(RNA mediated virus resistance, RMVR)。近年來,在不同的研究領域和生物中發現了許多新的使基因關閉或沉默的類型,并賦予其不同的名稱:在植物中稱為RNA 共抑制(co-suppression),在真菌中叫RNA 壓制(quelling),動物中則叫RNA干涉(interference)。RNA干涉是指短的dsRNA 可以降解內源的同源RNA,,而使相應基因沉默的現象,簡稱RNAi。1995年,康乃爾大學 Su Guo博士,于試圖阻斷線......閱讀全文
RNA干涉殺蟲劑需要特別的安全測試
用于開發殺蟲劑和抗蟲害作物的一種新技術可能對有益物種產生影響,而當前的毒性測試可能測不出這種影響。 發表在8月號的《生物科學》(BioScience)雜志的一篇論壇文章說,標準的毒性測試不足以評估有潛力制造殺蟲劑和基因修飾農作物的一種新技術的安全性。該文章的作者、美國農業部農業研究局的Jo
RNA干涉實驗——采用RNaseⅢ制備siRNA分子實驗
實驗方法原理首先在體外以長為 200~1000 bp 的 cDNA 為模板轉錄合成正義與反義的單鏈 RNA 分子,然后通過退火形成長的 dsRNA 分子,再用Diccr 核酸酶進行切割得到 siRNA 分子的混合物,通過純化去除沒有被切割的雙鏈 RNA 分子和 DNA 模板以后,siRNA 分子就可
羅氏制藥公司宣布退出RNA干涉研究領域
新藥研發陷入困境羅氏退出RNA干涉研究領域 羅氏公司總部位于瑞士巴塞爾,是全球最大的醫藥公司之一。據最新出版的《科學》雜志報道,11月下旬,羅氏宣布退出RNA干涉(RNAi)研究領域,這一決定是該公司計劃裁減6%的人力即4800人的計劃的一部分。 RNA干涉是一種分子生物學上由雙
RNAi原理FLASH演示
How does RNAi work? Genetic and biochemical data indicate a possible two-step mechanism for RNA interference (RNAi): an initiation step and an effecto
小分子RNA——microRNA綜述(1)
RNA一度被認為僅僅是DNA和蛋白質之間的“過渡”,但越來越多的證據清楚的表明,RNA在生命的進程中扮演的角色遠比我們早前設想的更為重要。RNA 干擾(RNA interference)的發現使得人們對RNA調控基因表達的功能有了全新的認識,更因為可以簡化/替代基因敲除而成為研究基因功能的有
RNA的制備方法步驟1
來源于任何細胞的RNA都可以通過反轉錄酶的作用拷貝成雙鏈DNA并克隆化,獲得相應的于特定細胞來源的cDNA文庫。因此,RNA制備的意義有兩個方面* 獲得特定細胞來源的cDNA文庫,克隆目的基因* 分析基因的表達,闡明基因調控的特性,了解從基因轉錄產生RNA的結構,數量,水平及合成的速率抑制RNA酶活
RNAi的機理與應用(一)
關于 RNAi 技術 RNA 干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈 RNA( double-stranded RNA,dsRNA) 誘發的、同源 mRNA 高效特異性降解的現象。RNAi 受到追捧的原因主要有兩個方面,一方面, RNAi 可以說是基
RNA干涉實驗——體外轉錄合成siRNA分子實驗
實驗方法原理采用噬菌體 RNA 聚合酶(T7、T3 或 SP6 RNA 聚合酶)可以很方便地在體外合成 siRNA 分子的正義與反義 RNA 鏈,然后再通過退火形成雙鏈的 siRNA 分子。體外轉錄合成 siRNA 分子與化學合成雙鏈 RNA 分子相比,其成本相對要低得多,而且有研究報道前者對靶基因
RNAi表達載體構建
近年來的研究表明,一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型, 稱為RNA干擾(RNA interference,RNAi)。siRNA(small interfering RNAs)就是這種短片斷雙鏈RNA分子,能夠
細胞化學詞匯RNA干擾
中文名稱:RNA干擾外文名稱:RNA interference定?????? 義:RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。分?????? 類:基因沉
RNA干擾現象的概念
RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。
RNA干擾的定義
RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。
RNAi
1995年,康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲(C. elegans)中的par-1基因時,發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達,而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA(sense RNA)以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果是二者都同樣
Dicer-Pathway
The degradation of endogenous mRNA in a sequence-specific manner can be induced by dsRNA [RNA interfernce (RNAi)], antisense transcription, or viral i
RNAi技術的應用
5 RNAi技術的應用5.1 功能基因組和遺傳學應用隨著各種模式生物和人類基因組測序的完成,基因功能的研究遠遠落后于大量序列所提供的信息,研究和發現基因功能成為越來越緊迫的任務。長期以來,破壞基因結構或抑制基因表達是研究基因功能的重要方法,如常用的基因敲除技術( gene knock out) 。基
通過RNAi使基因特異性沉默
RNA interference (RNAi) is a phenomenon in which the introduction of double-stranded RNA (dsRNA) into a diverse range of organisms and cell types caus
總RNA提取與Northern雜交(1)
一、 總RNA的提取1、 取組織10-50毫克,剪切成大小在0.5厘米以內的碎片,加入×5的RNA later(約2毫升)。樣品在37度可保存1天。室溫下1周,4度下1個月。2、 勻漿:用Rnase Erase spray(ICN)清理勻漿器頭部(7mm),用DEPC水和乙醇清洗,將上述樣品用鑷
從RNA抽提到電泳鑒定1
RNA抽提一,準備工作1, 實驗器具與材料:(1) 移液槍:1ml、200ul、10ul(2) 吸頭:1ml、200ul、20ul(3) 吸頭臺:放置1ml吸頭的一個,放置200ul和20ul的吸頭一個(4) EP管1.5ml、100ul(5) 玻璃研磨器(6) 容量瓶:1000ml(7) 鹽水瓶:
RNA提取與RTPCR(1)
在做Northern等雜交實驗、構建cDNA文庫、獲取能夠編碼真核生物蛋白的基因、獲得RNA病毒基因時,會用到RNA提取和RT-PCR技術。 真核生物的基因組是DNA,為什么不直接從DNA PCR得到我們需要的基因呢?因為真核生物的基因含有大量的非編碼區,稱為內元(intron),真正編碼蛋
RNAi表達載體構建(一)
近年來的研究表明,一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型, 稱為RNA干擾(RNA interference,RNAi).siRNA(small interfering RNAs)就是這種短片斷雙鏈RNA分
果蠅RNAi的實驗中雙鏈短RNA的合成(dsRNA)方法
本文來自于哈佛大學醫學院果蠅RNAi篩選中心的經典實驗方法,專門用于果蠅RNAi實驗方法。感謝哈佛大學醫學院果蠅RNAi篩選中心的支持!Primer Designed dsRNATemplate SelectionPCRIn vitro?RNA TranscriptiondsRNA Purifica
果蠅RNAi的實驗中雙鏈短RNA的合成(dsRNA)方法
實驗概要We routinely produce dsRNA by in vitro transcription of a PCR generated DNA template containing the T7 promoter sequence on both ends (I. Prim
關于RNA干擾的基本信息介紹
RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。基因沉默,主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類:TGS是指由于DN
RNA干擾的概念
RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。基因沉默,主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類:TGS是指由于DNA修
RNAi的機理與應用
RNAi 技術的機理與應用 關于 RNAi 技術 RNA 干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈 RNA( double-stranded RNA,dsRNA) 誘發的、同源 mRNA 高效特異性降解的現象。 RNAi 受到追捧的
RNA提取時RNA降解原因
1 ) 新鮮細胞: 裂解液的量不足,使得裂解不充分。 2 ) 新鮮組織: 某些含有內源性核酸酶的樣品,很難避免RNA酶的降解,建議采用的方法為在液氮條件下將組織研碎,并且,勻漿時采用更多的裂解液。 3 ) 冷凍樣品: 樣品取材后應該迅速置于液氮中冷凍存放,然后轉移到-70℃冰箱存
RNAi相關術語
1.RNAi?:(RNA interference)RNA干擾一些小的雙鏈RNA可以高效、特異的阻斷體內特定基因表達,促使mRNA降解,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型,稱為RNA干擾(RNA interference,RNAi?,也譯作RNA干預或者干涉)。它也是體內抵御外在感染的一種重要保護機制
基因干擾的基本概念
RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。基因沉默,主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類:TGS是指由于DNA修
RNA干擾的概念
RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。基因沉默,主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類:TGS是指由于DNA修
Northern雜交試驗指導手冊(1)-RNA提取
方法一、改良異硫氰酸胍提取法試劑及其配制異硫氰酸胍變性液:貯存液-在含484ml 水(經DEPC處理), 17.6ml 0.75mol/L檸檬酸鈉(pH7.0)和26.4ml10%Sarkosyl的溶液中加入250g異硫氰酸胍,加熱至60~65℃并持續攪拌使之充分溶解。貯存液室溫保存備用(不超過3個