PCRSSCP的原理特點、操作方法和應用2
2)電泳取10μlPCR產物,加入10μl變性劑(95%甲酰胺,10mmol/LEDTA,0.02%溴酚藍)、30μl 石蠟油,煮沸5min,取出立刻放入冰浴中2min以上,然后將水相全部上樣,10-15℃下電泳.開始在300V電壓下電泳5min,然后在120V電泳8h,取下凝膠,將其浸在含 0.5ug/ml溴化錠的1×TBE緩沖液中染色30--45min,在紫外燈下觀察,或進行銀染。3)銀染法將PAG板用去離子水洗二次,浸入10%乙醇和0.5%冰醋酸溶液固定6min。用去離子水洗 二次,再浸入0.2%AgNO3溶液中10min。用去離子水洗3--5次,然后浸入1.5%NaOH和0.4%甲醛溶液中顯色7min.最后,用 0.75%NaCO3終止顯色.四、SSCP的應用自從Orita等用SSCP進行人類DNA多態性分析以來,該方法大量地用于檢測和腫瘤發生 有關的基因突變,例如檢測星形細胞瘤、腦瘤、小細胞肺癌、胃......閱讀全文
PCRSSCP的原理特點、操作方法和應用2
2)電泳取10μlPCR產物,加入10μl變性劑(95%甲酰胺,10mmol/LEDTA,0.02%溴酚藍)、30μl 石蠟油,煮沸5min,取出立刻放入冰浴中2min以上,然后將水相全部上樣,10-15℃下電泳.開始在300V電壓下電泳5min,然后在120V電泳8h,取下凝膠,將其浸在含
PCRSSCP的原理特點、操作方法和應用1
隨著分子生物學技術的發展,檢測基因結構和突變的方法不斷涌現.尤其是PCR技術問 世以后,各種與PCR相結合的基因檢測技術進一步推動了基因研究的發展.如不對稱 PCR產物的直接測序、核糖核酸酶酶切法(Ribonuclease cleavage,RNAase)、限制性 片段長度多態性分析(Res
PCRSSCP原理及應用
隨著分子生物學技術的發展,檢測基因結構和突變的方法不斷涌現.尤其是PCR技術問 世以后,各種與PCR相結合的基因檢測技術進一步推動了基因研究的發展.如不對稱 PCR產物的直接測序、核糖核酸酶酶切法(Ribonuclease cleavage,RNAase)、限制性 片段長度多態性分析(Restric
PCRSSCP實驗原理和操作步驟
【實驗目的】1.了解PCR-SSCP技術的原理。2.了解并熟悉PCR-SSCP技術的步驟。 【實驗原理】 PCR-SSCP是1989年日本Orita等創建的篩查突變的新技術。它是一種簡單、快速、經濟的點突變篩查手段。PCR-SSCP技術的基本原理是PCR擴增后的DNA片段經變性成單鏈DNA,
鹽析的原理和應用特點
鹽析(salting out)是指在蛋白質水溶液中加入中性鹽,隨著鹽濃度增大而使蛋白質沉淀出來的現象。中性鹽是強電解質,溶解度又大,在蛋白質溶液中,一方面與蛋白質爭奪水分子,破壞蛋白質膠體顆粒表面的水膜;另一方面又大量中和蛋白質顆粒上的電荷,從而使水中蛋白質顆粒積聚而沉淀析出。常用的中性鹽有氯化鈉、
指紋技術的原理和應用特點
中文名稱指紋技術英文名稱fingerprinting定 義將待檢測分子進行部分分解或擴增(如蛋白質的酶解、DNA的聚合酶鏈反應擴增等),然后進行層析、電泳等分離,獲得特征性分離圖譜(指紋)的方法。用以辨別樣品之間的差異。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
熒光定量PCR技術特點、原理及其應用2
3 應用由于FQ-PCR具有高靈敏性,高特異性和高精確性的特點,目前,該項技術已被應用于病原體測定、腫瘤基因檢測、免疫分析、基因表達、突變及其多態性的研究等多個領域。3.1 病原體測定由于PCR技術的問世,使得病原體檢測能夠快速而方便的進行。但由于其高靈敏性,實驗操作很容易受到污染而出現假陽性。只要
空氣采樣儀器的原理和應用特點
氣體采樣儀是用于采集大氣環境或作業環境中氣體樣品的常規性儀器,其由兩個抽氣泵分別組成獨立的氣路系統。可同時采集兩種氣體樣品或采集平衡樣品,采樣工作快捷,可靠。可廣泛應用于冶金,礦山,化工,建造,鑄造,電力及環境監測,衛生防疫等部門,本采樣器具有電子定時功能和節奏緊湊,體積小,性能穩定可靠等優點,是目
熒光分析的方法原理和應用特點
熒光分析法是指利用某些物質被紫外光照射后處于激發態,激發態分子經歷一個碰撞及發射的去激發過程所發生的能反映出該物質特性的熒光,可以進行定性或定量分析的方法。由于有些物質本身不發射熒光(或熒光很弱),這就需要把不發射熒光的物質轉化成能發射熒光的物質。例如用某些試劑(如熒光染料),使其與不發射熒光的物質
長周期光柵的原理和應用特點
長周期光柵(longperiodfibergrating,LPFG)與布拉格光纖光柵一樣,也是由光纖軸上產生周期性的折射率調制而形成,其周期一般大于100μm。它的耦合機理是:向前傳輸的纖芯基模被耦合入幾個特定波長的向前傳輸的包層模,包層模很快損失掉,所以LPFG基本上沒有后向反射,在其透射譜中有幾
螺旋集污閥的應用原理和特點
螺旋集污閥主要用于消除地下水和其他水源中的固體顆粒,在給水處理領域用于除砂,減少濁度和固液分離。水系統中的空氣容易腐蝕并損壞水泵,鍋爐,熱交換器,冰箱等設備和部件,使用壽命和效率大大降低。僅在系統點設置排氣門是不好的,當壓力降低時,溶解在水中的氣體會再次形成氣泡,尤其是在泵的前面,會分離出大量的
超臨界萃取的技術原理、特點和應用
一、超臨界萃取的技術原理超臨界CO2流體萃取(SFE)分離過程的原理是利用超臨界流體的溶解能力與其密度的關系,即利用壓力和溫度對超臨界流體溶解能力的影響而進行的。在超臨界狀態下,將超臨界流體與待分離的物質接觸,使其有選擇性地把極性大小、沸點高低和分子量大小的成分依次萃取出來。當然,對應各壓力范圍所得
合成肽疫苗的結構特點和應用原理
合成肽疫苗分子是由多個B細胞抗原表位和T細胞抗原表位共同組成的,大多需與一個載體骨架分子相耦聯。合成肽疫苗的研究最早始于口蹄疫病毒(FMDV)合成肽疫苗,主要集中在FMDV 的單獨B細胞抗原表位(VPI 環)或與T 細胞抗原表位結合而制備的合成肽疫苗研究。雖然取得了一定的進展,但仍未獲得一種具有理想
霍爾傳感器的原理特點和應用
霍爾效應是磁電效應的一種,這一現象是霍爾(A.H.Hall,1855—1938)于1879年在研究金屬的導電機構時發現的。 后來發現半導體、導電流體等也有這種效應,而半導體的霍爾效應比金屬強得多,當電流垂直于外磁場通過導體時,載流子發生偏轉,垂直于電流和磁場的方向會產生一附加電場,從而在導
冷熱沖擊試驗箱的正確使用操作方法特點和原理
?? 冷熱沖擊試驗箱采用單片機控制,電動揚擺、沖擊、微機測量、運算、數顯結果并可打印等,工作效率高、測試精度高。在沖擊試樣后可利用剩余能量自動揚擺,做好下次試驗準備,操作簡便,工作效率高。?? 1、檢查冷熱沖擊試驗箱,使擺錘刀口處于兩支承鉗口的中心。校正鉗口間的距離為。并檢查其空打時指針是否從上止點
PCRSSCP
一.? 樣品的制備1. 設計引物。用Oliga6.0對目的基因進行分析,設定引物,引物長度18-21個堿基,擴增片段以200-300bp最為合適。2. PCR擴增并檢測。根據不同的引物挑選適合的退火溫度進行PCR擴增。擴增產物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測,上樣量3-5ul。PCR產物為10
CO2培養箱工作原理和應用
二氧化碳培養箱應用范圍:適用于生命科學,免疫學,遺傳學,臨床醫學,農業科學,藥物學,醫藥工業,食品工業,毒理學,基礎生物學研究和早期臨床醫學研究。1.風道結構:采用環形氣流設計概念,強制對流模擬空氣循環原理,保證了內膽溫度,CO2濃度的高度均勻穩定.2.內玻璃門:采用光潔透明玻璃方便觀察實物,四角圓
電噴射質譜的原理和應用特點
中文名稱電噴射質譜英文名稱electrospray mass spectroscopy;ESMS定 義一種使不同質量的粒子在電磁場中運動并按照質荷比進行分離的技術理論。即氣體在電子的轟擊下會產生帶電粒子,帶電粒子在電場的作用下獲得能量做加速運動,而在磁場的作用下將做圓周運動,具有不同質荷比的離子其
微波輔助提取蒼術的原理-設備-特點-和應用
微波輔助提取的原理:微波射線自由透過對微波透明的溶劑,到達植物物料的內部維管束和腺細胞內,細胞內溫度突然升高,連續的高溫使其內部壓力超過細胞壁膨脹的能力,致細胞破裂,細胞內的物質自由流出傳遞至周圍的溶劑中被溶解。不同物質的介電常數、比熱、形狀及含水量的不同,各物質吸收微波能的能力不同,其產生的熱能及
橫截面流量計的原理和應用特點
橫截面流量計由于沒有足夠的直管段,通過管道橫截面上各點的流速不一樣,很難找到一個能代表平均流速的一個點。實際風速分布也沒有一定規律可遵循。我們將矩型或圓形管道的大小,橫截面平均公成若干個面積相同的小單元,測量每個小單元中心點的流速再將所有小單元的流速和平均值,是整個又橫截面積的平均流速,即速度
熒光原位雜交技術原理和應用特點
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結
SPA提取IgG原理和操作方法
(一) 原理將SPA偶聯至Sepharose-4B上后,利用親和層析來提取人和某些動物的IgG,這樣可以省去制備第二抗體。該法特別適用于單克隆抗體的研究。該法提取IgG與利用IgG純化SPA原理是一致的。(二) 材料與試劑1.Sepharose-4B 瓊脂糖2.SPA3.溴化氰4.0.10Mol/L
反向聚合酶鏈反應的原理和應用特點
中文名稱反向聚合酶鏈反應英文名稱inverse PCR;iPCR定 義用于擴增已知序列的DNA旁側未知序列的方法。即先用在已知DNA序列上沒有識別位點的限制內切酶,切出包含已知DNA、而兩端帶有未知序列的區段,將切出的DNA區段環化,然后再按已知的DNA序列設計一對引物進行擴增。應用學科細胞生物學
發光免疫測定法的原理和應用特點
中文名稱發光免疫測定英文名稱luminescent immunoassay;LIA定 義以發光物質標記抗原或抗體,免疫反應后引發發光反應,根據發光強度對抗體或抗原進行的測定。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
體視顯微鏡的結構原理、特點和應用范圍
體視顯微鏡又可稱為:實體顯微鏡或稱操作和解剖顯微鏡。是一種具有正像立體感的目視儀器。其光學結構原理是由一個共用的初級物鏡,對物體成像后的兩個光束被兩組中間物鏡亦稱變焦鏡分開,并組成一定的角度稱為體視角一般為12度--15度,再經各自的目鏡成像,它的倍率變化是由改變中間鏡組之間的距離而獲得,利用雙通道
磁性免疫測定法的原理和應用特點
中文名稱磁性免疫測定英文名稱magnetic immunoassay定 義將抗體或抗原結合在含鐵的顆粒(如Fe3O4的纖維素顆粒)上,利用磁鐵就很容易將與之結合的抗體抗原復合體從混合物中分離出來的方法。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
核磁共振波譜法的原理和應用特點
核磁共振波譜法(英語:Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy,簡稱 NMR spectroscopy 或?NMRS?),又稱核磁共振波譜,是將核磁共振現象應用于測定分子結構的一種譜學技術。核磁共振波譜的研究主要集中在氫譜和碳譜兩類原子核的波譜。人們可以從核磁共
體視顯微鏡的結構原理、特點和應用范圍
體視顯微鏡又可稱為:實體顯微鏡或稱操作和解剖顯微鏡。是一種具有正像立體感的目視儀器。其光學結構原理是由一個共用的初級物鏡,對物體成像后的兩個光束被兩組中間物鏡亦稱變焦鏡分開,并組成一定的角度稱為體視角一般為12度--15度,再經各自的目鏡成像,它的倍率變化是由改變中間鏡組之間的距離而獲得,利用雙
實時聚合酶鏈反應的原理和應用特點
中文名稱實時聚合酶鏈反應英文名稱real-time PCR定 義一種定量測定樣品中特定DNA序列的聚合酶鏈反應。即使用標記(最常用是熒光標記)的PCR引物,因而能夠通過熒光監測到每一次PCR循環后擴增所得DNA產物的量,從連續監控下獲得的反應動力學曲線,可推導得樣品中被擴增模板DNA的原初含量。應
隨機聚合酶鏈反應的原理和應用特點
中文名稱隨機聚合酶鏈反應英文名稱random PCR定 義采用許多序列不相同的(部分隨機或全部隨機序列)、短的(約10個核苷酸)引物所進行的聚合酶鏈反應。由于在模板DNA多個不同位置上擴增,所形成的產物長度各異,電泳圖譜獨特,可用于識別核酸的多態性、研究基因組的物理圖譜及分析生物的進化等。應用學科