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    免疫組化染色方法大匯總

    免疫組化的方法很多,新方法層出不窮,如二步法,要不斷更新,與時俱進。雖然這些方法各有其特色,但總的來說,只要應用恰當均可獲得較為滿意的結果。方法的選擇并不是影響免疫組化結果的主要因素。問題在于一個單位應常規地、固定地使用一種方法,不宜交替使用不同的方法或經常更換方法。一旦選定一種方法,應務必使其標準化,力圖使一抗、二抗、標記試劑和底物的濃度、孵育時間和濃度、緩沖液的使用程序化、規范化。一、SP法免疫組化染色 原理 鏈霉素抗生物素蛋白(SA)是從鏈霉素中分離出的蛋白質,穿透組織的能力比ABC、PAP復合物大,反應速度快,它含有四個亞基,每個亞基都有與生物素(Biotin)連接的部位,且二者間有極強的親和力,SA的等電位接近于6.5,近中性,而卵白素(Avidin)為10,因此,SA幾乎不與組織中的內源性凝集樣物質發生非特異性結合,使用鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶放大系統,即可產生低背景、高放大效果。S-P采用生物素標記的第二......閱讀全文

    免疫組化染色方法大匯總

    免疫組化的方法很多,新方法層出不窮,如二步法,要不斷更新,與時俱進。雖然這些方法各有其特色,但總的來說,只要應用恰當均可獲得較為滿意的結果。方法的選擇并不是影響免疫組化結果的主要因素。問題在于一個單位應常規地、固定地使用一種方法,不宜交替使用不同的方法或經常更換方法。一旦選定一種方法,應務必使其標準

    常用免疫組化染色方法

    常用免疫組化染色方法,真空負壓免疫熒光染色法染細胞培養片。1. 將細胞爬于載玻片或蓋玻片的片子用生理鹽水浸洗數次,徹底洗去蛋白液。2.純丙酮固定5-10分鐘。3.PBS浸洗3次,每次1分鐘。4.加入選用的第一抗體孵育真空負壓處理15分鐘。5.PBS洗3次,每次2分鐘。6.加入熒光抗體孵育真空負壓處理

    石蠟切片免疫組化染色方法

    1、載玻片的處理:抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等幾種試劑,對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下:1.1

    免疫組化實驗中常用染色方法

    根據標記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標法,親和組織化學法,后者是以一種物質對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法最常用。

    免疫組化技術專題:MTT(四唑鹽比色實驗)大匯總(一)

    一、實驗前應明確的問題 1. ?選擇適當的細胞接種濃度。 一般情況下,96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大,因此,在進行MTT試驗前,要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線,確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間,以保證培養終

    免疫組化技術專題:MTT(四唑鹽比色實驗)大匯總(二)

    二、實驗步驟 (一)貼壁細胞 1. ?收集對數期細胞,調整細胞懸液濃度,每孔加入100 ul,鋪板使待測細胞調密度至1 000-10 000孔,(邊緣孔用無菌PBS填充)。2. ?5%CO2,37 ℃孵育,至細胞單層鋪滿孔底(96孔平底板),加入濃度梯度的藥物,原則上,細胞貼壁后即可加藥,或兩小時,

    免疫組化染色步驟

    石蠟切片免疫組化染色步驟1、載玻片的處理:??? 抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine 等幾種試劑,對已清洗的載玻

    流感病毒檢測方法大匯總

    流感病毒在病毒分類學上屬于正黏病毒科,其遺傳物質由8個大小不等的獨立單股負鏈RNA片段組成,共編碼10個蛋白。其特點是容易發生變異。分為甲乙丙三型,其中甲型流感病毒經常發生抗原變異,可感染人和多種動物,常引起大流行和中小流行。乙型流感病毒變異較少,可感染人類,引起爆發或小流行。丙型較穩定,可感染人類

    幾種常用的微生物染色方法匯總!

    一、簡單染色?不同的細菌,或者由于觀察者所側重觀察的內容不同一,所以所使用的染料也有差異,但是簡單染色的方法是一樣的。先按照上述的制片方法制片,制成需要觀察的玻片后,使用相對應的染料滴加到玻片上菌膜區域,以覆蓋菌膜為準。按照不同染料的要求,結合所觀察的內容確定染色時間,染色時間到達時,進行水洗,干燥

    免疫組化染色方法(SP法和SABC法)

    SP法1)脫蠟、水化;2)PBS洗2~3次各5分鐘;3)3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室溫靜置10分鐘;4)PBS洗2~3次各5分鐘; 5)抗原修復;6)PBS洗2~3次各5分鐘;7)滴加正常山羊血清封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體。8)滴加Ⅰ抗50μl,室溫靜置1小時或者4℃過夜或者

    免疫組化試驗抗體選擇及常用染色方法

    一、免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)免疫組織化學是利用抗原抗體的特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究。免疫組織化學染色技術不僅有較高的敏感性

    石蠟切片免疫組化染色

    實驗概要掌握石蠟切片免疫組化染色實驗中載玻片的處理,常用酶消化,抗原熱修復及基本實驗步驟。實驗步驟1. 載玻片的處理 ??? 1) APES:現用現配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的APES中,停留20~30秒鐘,取出稍停片刻,再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結合的APES,置通風櫥

    什么是免疫組化染色

    是病理學診斷方法,尤其是免疫組化在腫瘤診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可。免疫組織化學的臨床應用主要包括以下幾方面:(1)惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷;(2)確定轉移性惡性腫瘤的原發部位;(3)對某類腫瘤進行進一步的病理分型;(4)軟組織腫瘤的治療一般需根據正確的組織學分類,因其種類多、組織形態

    石蠟切片免疫組化染色

    實驗概要掌握石蠟切片免疫組化染色實驗中載玻片的處理,常用酶消化,抗原熱修復及基本實驗步驟。實驗步驟1. 載玻片的處理 ??? 1) APES:現用現配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的APES中,停留20~30秒鐘,取出稍停片刻,再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結合的APES,置通風櫥

    什么是免疫組化染色

    是病理學診斷方法,尤其是免疫組化在腫瘤診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可。免疫組織化學的臨床應用主要包括以下幾方面:(1)惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷;(2)確定轉移性惡性腫瘤的原發部位;(3)對某類腫瘤進行進一步的病理分型;(4)軟組織腫瘤的治療一般需根據正確的組織學分類,因其種類多、組織形態

    什么是免疫組化染色?

      免疫組化染色是一種利用抗原-抗體反應和組織化學方法來檢測和定位特定蛋白質在組織細胞中的表達情況的技術。  具體來說,免疫組化染色的步驟包括:  制備組織切片:將組織樣本切成薄片,放置在載玻片上。  阻斷內源性過氧化物酶:為了減少非特異性染色,需要用含有過氧化物酶阻斷劑的溶液處理組織切片。  抗原

    玻璃儀器的洗滌方法大匯總!

    ?? 在分析工作中,洗滌玻璃儀器不僅是一個實驗前的準備工作,也是一個技術性的工作。儀器洗滌是否符合要求,對分析結果的準確度和度均有影響。不同分析工作 (如工業分析、一般化學分析和微量分析等)有不同的儀器洗滌要求,我們以一般定量化學分析為基礎介紹玻璃儀器的洗滌方法。  一、洗滌儀器的一般步驟  1、用

    玻璃儀器的洗滌方法大匯總

    在分析工作中,洗滌玻璃儀器不僅是一個實驗前的準備工作,也是一個技術性的工作。儀器洗滌是否符合要求,對分析結果的準確度和精確度均有影響。不同分析工作 ?(如工業分析、一般化學分析和微量分析等)有不同的儀器洗滌要求,我們以一般定量化學分析為基礎介紹玻璃儀器的洗滌方法。一、洗滌儀器的一般步驟1、用水刷洗:

    鋰電正極材料元素分析方法大匯總!

    鋰離子正極材料中,在需要測定元素含量時,ICP方法雖然具有很多優點,檢測方法也比較簡單迅速,但是對于含量較高的元素含量分析來說,要求準確性一定要保障,而ICP在測定高含量元素時,誤差比較大,難以準確化。? ??本文將收集的正極材料中,有關元素的化學精準檢測方法介紹給大家,希望大家的有所幫助:檢測方法

    免疫組化非特異性染色消除方法

    一、非特異性染色的主要因素?組織的非特異性染色的機理很復雜,其產生的原因主要可分為以下幾點:?(1)一部分熒光素未與蛋白質結合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。?(2)抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白,可與組織成分結合。?(3)除去檢查的抗原以外,組織中還可能存在類屬抗原(如F

    骨組織的免疫組化染色應采用什么方法?

      在對骨骼生理和病理的研究過程中,經常需要制備脫鈣的骨免疫組化標本,然而由于骨骼組織的特殊性,制備好的骨組化標本也并不是一件容易的事。由于骨組織中60%以上為鈣鹽組成的羥基磷灰石結晶,脫鈣是標本制備中至關重要的過程。一些強酸如鹽酸,硝酸等雖能快速有效除去骨組織中鈣鹽,但對其中的抗原蛋白也產生了致命

    石蠟切片免疫組化染色步驟

    1、載玻片的處理:抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等幾種試劑,對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下:1.1

    免疫組化染色有哪些應用?

      病理學診斷:免疫組化染色可以用于檢測組織中的特定蛋白質,幫助醫生確定病變的性質和類型。例如,在癌癥診斷中,可以通過檢測腫瘤細胞中的某些蛋白質來確定腫瘤的類型和分級。  神經科學研究:免疫組化染色可以用于研究神經系統中的蛋白質表達情況。例如,在研究阿爾茨海默病時,可以通過檢測大腦組織中β-淀粉樣蛋

    免疫組化:非特異性染色的八大原因

    免疫組化,免疫組織化學技術(immunohistochemistry),是一項利用抗原抗體反應,通過使標記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內抗原,對蛋白定位,定性的實驗技術。非特異性染色的八大原因然而,結果卻未必都是那么如意的,常常出現下面這種狀況,好好的一張片子染得臟臟的,這就是最常見的非特異性染色

    HE-染色和免疫組化染色可以同時做嗎

    免疫組化是利用抗原與抗體間的特異結合原理和特殊的標記技術,對組織和細胞內的特定抗原、抗體進行定位、定性、定量的一們技術。我們都是先進行免疫組化,在DAB染色后進行HE染色。既能看到免疫組化的結果,又能看到細胞的形態,CD34+免疫組化染色后是棕色的顆粒,效果很好。 1)做免疫組化的片子最好不要同時做

    免疫組化非特異性染色的消除方法

    一、非特異性染色的主要因素?組織的非特異性染色的機理很復雜,其產生的原因主要可分為以下幾點:?(1)一部分熒光素未與蛋白質結合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去?。?(2)抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白,可與組織成分結合。?(3)除去檢查的抗原以外,組織中還可能存在類屬抗原(如

    免疫組化非特異性染色及控制方法

    一、非特異性染色的識別常出現在組織邊緣、膠原纖維及血漿滲出處,壞死組織及固定不良的組織中心處。表現為彌漫性,均勻性的背景染色。也可以是隨機分布的陽性反應產物點、團或塊狀。二、非特異性染色的原因1. Ig與Fc受體結合多見于冰凍切片(特別是淋巴造血組織,淋巴細胞,單核細胞,組織細胞表面多),主要是和二

    熒光抗體染色三大方法

    1.直接染色法將標記的特異熒光抗體直接加在抗原標本上,經一定溫度和時間的染色,洗去未參加反應的多余熒光抗體,在熒光顯微鏡下便可見到被檢抗原與熒光抗體形成的特異性結合物而發出的熒光。直接染色法的優點是:特異性高,操作簡便,比較快速。缺點是:一種標記抗體只能檢查一種抗原,敏感性較差。直接法應設陰、陽性標

    石墨烯檢測方法大匯總,石墨烯快速檢測

      超全面石墨烯檢測方法大匯總,看完就是石墨烯檢測專家了!  2004年,康斯坦丁博士通過膠帶從石墨上分離出石墨烯這種“神器的材料”,它的出現在全世界范圍內引起了極大轟動……  石墨烯具有非同尋常的導電性能、極低的電阻率極低和極快的電子遷移的速度、超出鋼鐵數十倍的強度,極好的透光性……這些優異的性能

    免疫組化非特異性背景染色及其控制方法

    一、非特異性染色的識別常出現在組織邊緣、膠原纖維及血漿滲出處,壞死組織及固定不良的組織中心處。表現為彌漫性,均勻性的背景染色。也可以是隨機分布的陽性反應產物點、團或塊狀。二、非特異性染色的原因1. Ig與Fc受體結合多見于冰凍切片(特別是淋巴造血組織,淋巴細胞,單核細胞,組織細胞表面多),主要是和二

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