PEI轉染手冊
使用方法1. 接種細胞：用膠原酶消化細胞并計數（不建議用胰酶）。轉染前 18-24 小時進行細胞的鋪板，以便在轉染時，貼壁細胞的密度大約在 80%左右。注：培養液中的血清和抗生素不影響轉染效率。2. 準備 EZ Trans-DNA 復合物1）轉染前將所有試劑置于室溫 10 分鐘。下面，以轉染 24 孔板培養皿為例，說明轉染的具體方法（如果在別的培養器皿中進行轉染，各試劑建議使用量見表 1.：2）將 1 μg 質粒 DNA 稀釋到 40 μL 無血清的高糖 DMEM 培養基，用移液槍吹吸 3-4 次。3）將 3 μL EZ Trans 轉染試劑稀釋到 40 μL 無血清的高糖 DMEM 培養基，用移液槍吹吸 3-4 次。注： 無血清的高糖 DMEM 培養基是稀釋液， 不能使用含血清的培養基進行 DNA 和 EZ Trans 轉染試劑的稀釋！因為 EZ Trans-DNA 轉染復合物的形成過程不能含有血清。4）將稀釋好的 EZ Tr......閱讀全文
PEI轉染手冊
使用方法1. 接種細胞：用膠原酶消化細胞并計數（不建議用胰酶）。轉染前 18-24 小時進行細胞的鋪板，以便在轉染時，貼壁細胞的密度大約在 80%左右。注：培養液中的血清和抗生素不影響轉染效率。2. 準備 EZ Trans-DNA 復合物1）轉染前將所有試劑置于室溫 10 分鐘。下面，以轉染 24
PEI－轉染法
材料：質粒DNA指數生長的真核細胞PEI （聚乙烯亞胺）1×HBS （pH7.4）配方：PEI 儲存液（100 μM）：稱取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS （pH7.4）中， 0.2 μm 濾膜過濾，儲存于4℃備用。1×HBS （pH7.4）： 將8.76 g NaCl 溶解
PEI－轉染法
材料： 質粒DNA 指數生長的真核細胞 PEI （聚乙烯亞胺） 1×HBS （pH7.4） 配方： PEI 儲存液（100 μM）：稱取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS （pH7.4）中， 0.2 μm 濾膜過濾，儲存于4℃備用。 1×HBS （pH7.4）： 將8.76 g
pei瞬時轉染原理
pei瞬時轉染技師的原理瞬時轉染是指將構建好的質粒通過某種方式導入到哺乳動物細胞內（主要指HEK293細胞），該質粒上的外源基因不整合到細胞自身的基因組上。
pei配制轉染需要培養基無血清嗎
需要，因為血清組分復雜，會影響轉染復合物的形成。
Transfection－with－PEI
實驗概要Use PEI (Linear 25 kDa Reagent) to transfect in HEK293T cells.主要試劑PEI is polyethyleimine, a 25 kDa linear from Polysciences Inc. Make up solutio
PolySciences轉染試劑于臨床前和臨床LV及AAV載體制造的應用
Polysciences轉染試劑系列是基于PEI（Polyethylenimine）的產品，因其有效的瞬轉效率和蛋白產量，已廣泛應用于工業化生產和基礎科研中的蛋白表達研究，年文獻發表量已達上千篇。PEI是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原
細胞轉染的效率分析
線型PEI（LinePEI,LPEI）與其衍生物用作基因轉染載體的研究比分枝狀PEI（BranchedPEI,BPEI）要早一些，過去的研究認為在不考慮具體條件，LPEI/DNA轉染復合物的細胞毒性較低，有利于細胞定位，因此與BPEI相比應該轉染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于形成
關于轉染效率的研究與進展
線型PEI（LinePEI,LPEI）與其衍生物用作基因轉染載體的研究比分枝狀PEI（BranchedPEI,BPEI）要早一些，過去的研究認為在不考慮具體條件，LPEI/DNA轉染復合物的細胞毒性較低，有利于細胞定位，因此與BPEI相比應該轉染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于形成
關于轉染效率的研究
線型PEI（LinePEI,LPEI）與其衍生物用作基因轉染載體的研究比分枝狀PEI（BranchedPEI,BPEI）要早一些，過去的研究認為在不考慮具體條件，LPEI/DNA轉染復合物的細胞毒性較低，有利于細胞定位，因此與BPEI相比應該轉染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于形成
簡述細胞轉染的效率
線型PEI（LinePEI,LPEI）與其衍生物用作基因轉染載體的研究比分枝狀PEI（BranchedPEI,BPEI）要早一些，過去的研究認為在不考慮具體條件，LPEI/DNA轉染復合物的細胞毒性較低，有利于細胞定位，因此與BPEI相比應該轉染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于
細胞的進展研究
?? 就在上推出了一些陽離子聚合物基因轉染技術，以其適用宿主范圍廣，操作簡便，對細胞毒性小，轉染效 ?轉染試劑率高受到研究者們的青睞。? ? 在這其中，樹枝狀聚合物和聚乙烯亞胺的轉染性能*佳，但樹枝狀聚合物的結構不易于進一步改性，且其合成工藝復雜。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有
細胞轉染技術原理及應用
常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染（永久轉染）.前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其它調控元件的分析.一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染后24-72小時內（依賴于各種不同
細胞轉染原理及常見轉染方法的比較（二）
線型PEI（Line PEI，LPEI）與其衍生物用作基因轉染載體的研究比分枝狀PEI（Branched PEI，BPEI）要早一些，過去的研究認為在不考慮具體條件，LPEI/DNA轉染復合物的細胞毒性較低，有利于細胞定位，因此與BPEI相比應該轉染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有
細胞轉染
脂質體介導法 磷酸鈣沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 外源基因進入細胞主要有四種方法：電擊法、磷酸鈣法和脂質體介導法和病毒介導法。電擊法是在細胞上短時間暫時性的
為什么要將pei加到質粒里
這是程序就這么設計的。無論是轉染還是轉化，其關鍵因素都是用氯化鈣處理大腸桿菌細胞，以提高細胞膜的通透性，從而使外源DNA分子能夠容易進入細胞內部。所以在習慣上，人們往往也通稱轉染為廣義的轉化。常規轉染技術可分為瞬時轉染和穩定轉染（永久轉染）兩大類。pei原理：外源基因進入細胞主要有四種方法：電擊法、
關于細胞轉染的技術介紹
國際上推出了一些陽離子聚合物基因轉染技術，以其適用宿主范圍廣，操作簡便，對細胞毒性小，轉染效率高受到研究者們的青睞。其中樹枝狀聚合物（Dendrimers）和聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的轉染性能最佳，但樹枝狀聚合物的結構不易于進一步改性，且其合成工藝復雜。聚乙烯亞胺是
轉染技術的應用范圍與研究
國際上推出了一些陽離子聚合物基因轉染技術，以其適用宿主范圍廣，操作簡便，對細胞毒性小，轉染效率高受到研究者們的青睞。其中樹枝狀聚合物（Dendrimers）和聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的轉染性能最佳，但樹枝狀聚合物的結構不易于進一步改性，且其合成工藝復雜。聚乙烯亞胺是一種
轉染技術的研究進展
國際上推出了一些陽離子聚合物基因轉染技術，以其適用宿主范圍廣，操作簡便，對細胞毒性小，轉染效率高受到研究者們的青睞。其中樹枝狀聚合物（Dendrimers）和聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的轉染性能最佳，但樹枝狀聚合物的結構不易于進一步改性，且其合成工藝復雜。聚乙烯亞胺是一種
載藥系統Zeta電位測試
? ? 寡核苷酸作為重要的特異性調控基因表達物質，已廣泛的應用于藥物開發治療以及相關基因功能研究。但是，寡核苷酸易被核酸酶降解，具有較高的負電荷等缺點，使其直接作為治療藥物穩定性差，跨越細胞膜能力弱，治療效果不好，為了解決以上問題我們采用聚乙烯亞胺800（PEI800）為原料，通過氮-酰化作用結合亞
納米載體的表面功能化修飾為推進基因神經調控掃除障礙
日前，ACS Applied Materials & Interfaces 期刊在線發表了題為Effect of PEGylated Magnetic PLGA-PEI Nanoparticles on Primary Hippocampal Neurons: Reduced Nano-neur
知識分享：細胞轉染原理及常見轉染方法的比較
實驗原理： 轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。 常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染（永久轉染）。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝
可視納米基因載體為磁共振可視化治療應用研究奠定基礎
《納米尺度》雜志近日報道了中科院深圳先進技術研究院關于自組裝高靈敏度MRI探針在微環DNA傳遞中的應用研究。 據介紹，微環DNA被認為是最具潛力的基因治療載體，而如何實現微環DNA的高效遞送以及載體非侵入性生物學信息的獲取是當前亟待解決的問題。聚乙烯亞胺(PEI)作為陽離子基因傳遞載體，已
納米載體的表面功能化修飾為推進基因神經調控掃除障礙
9月24日，ACS applied Materials & Interfaces 期刊在線發表了題為Effect of PEGylated Magnetic PLGA-PEI Nanoparticles on Primary Hippocampal Neurons： Reduced Nano-n
轉染
細胞傳代(1) 試驗準備：200ul/1mlTip頭各一盒（以上物品均需高壓滅菌），酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養皿，離心管。(2) 棄掉培養皿中的培養基，用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3) 用Tip頭加入1ml Trypsin液，消化1分鐘（37。C，5%CO2 )。用手輕拍
細胞轉染電穿孔轉染法
電流能夠可逆地擊穿細胞膜形成瞬時的水通路或膜上小孔促使DNA分子進入胞內，這種方法就是電穿孔。當遇到某些脂質體轉染效率很低或幾乎無法轉入時建議用電穿孔法轉染。一般情況下，高電場強度會殺死50%-70% 的細胞。現在針對細胞死亡開發出了一種電轉保護劑，可以大大的降低細胞的死亡率，同時提高電穿孔轉染效率
轉染和轉染效率測定步驟
LIPOFECTAMINE 2000轉染試劑轉染步驟此實驗步驟設計用來進行24孔板貼壁細胞的瞬時或穩定轉染，其為設計用來在生長培養基中直接加入復合物。1. 轉染前一天，胰酶消化細胞并計數，細胞鋪板，使其在轉染日密度為90%。細胞鋪板在0.5ml含血清，不含抗生素的正常生長的培養基中。2. 對于每孔細
細胞轉染脂質體轉染法
陽離子脂質體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過靜電作用，將DNA分子包裹入內，形成DNA脂復合物，也能被表面帶負電的細胞膜吸附，再通過融合或細胞內吞進入細胞。脂質體轉染適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中，是目前實驗室最方便的轉染方法之一，其轉染率較高，優于磷酸鈣法。由于脂質體對細胞有一定的毒性
PEI亞納米多孔分離膜研究獲進展
近期，中國科學院近代物理研究所材料研究中心與中山大學、河北大學等，利用重離子束輻照技術制備出具有優異離子分離性能的聚醚酰亞胺（PEI）亞納米多孔分離膜。相關研究成果以Efficient ion sieving and ion transport properties in sub-nanoporou
基因轉染技術的轉染方法介紹
1、轉染 轉染指通過生化或者物理方法將目的基因導入真核細胞中 。 2、感染 感染指通過病毒介導，用基因組中攜帶有克隆目的片斷的病毒來感染靶細胞。