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    聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)鑒定IgG純度

    一)原 理 由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不相同。在實驗中,電泳凝膠分為兩層:上層膠為低濃度的大孔膠,稱為濃縮膠或成層膠,配制此層膠的緩沖液是Tris-HCl,pH6.7;下層膠則是高濃度的小孔膠,稱為分離膠或電泳膠,成膠的緩沖液是Tris-HCl,pH8.9。電泳槽中的電極緩沖液則是Tris-甘氨酸,pH8.3。可見,凝膠濃度、成膠成分、pH與電泳液緩沖系統各不相同,形成了一個不連續系統。電泳時,蛋白質樣品放置在濃縮膠上,為防止蛋白質樣品在電極緩沖液中擴散,因而加入等體積的40%蔗糖或50%甘油與之混合,以提高密度;為觀察蛋白質樣品泳動的情況,樣品中還......閱讀全文

    聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)鑒定IgG純度

    一)原? 理?由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH

    聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)鑒定IgG純度1

    (一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也

    聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)鑒定IgG純度2

    ④ 濃縮膠緩沖液:稱取1mol/L HCl 48ml,Tris5.98g,TEMED 0.46ml,加重蒸水至80ml,調pH6.7,用重蒸水定容至100ml,置棕色瓶內,4℃貯存。⑤ 濃縮膠貯液:稱Acr10g,Bis2.5g 加重蒸水溶解后定容至100ml,過濾后置棕色瓶內,4℃貯存。⑥ 40%

    聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)鑒定IgG純度3

    4.加樣作為分析用的PAGE加樣量僅需幾微克,2-3ul血清電泳后就能分出幾十條蛋白區帶。為防止樣品擴散,應在樣品中加入等體積40%蔗糖(內含少許溴酚蘭)。用微量注射器取5ul上述混合液,通過緩沖液,小心地將樣品加到凝膠凹形樣品槽底部,待所有凹形樣品槽內都加了樣品,即可開始電泳。5.電泳將直流穩壓電

    聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度

    (一)原理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不

    聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度

    由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成「連續系統」和「不連續系統」兩種電泳系統。「不連續系統」最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及 pH 不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH 也不相同

    聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度3

    3.制備凝膠板不連續體系采用不同孔徑及pH的分離膠與濃縮膠 ,凝膠制備應分2步進行。① 分離膠的制備:根據實驗要求,選擇最終丙烯酰胺的濃度,本實驗需20ml pH8.9 7.0 %PAA溶液,其加膠方式不同于連續系統。混合后的凝膠溶液,用細長頭的滴管加至長、短玻璃板間的窄縫內,加膠高度距樣品模板

    聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(一)

    (一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不

    聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(二)

    (三)操作方法1.安裝夾心式垂直板電泳槽夾心式垂直板電泳槽操作簡單,不易滲漏。這種電泳槽兩側為有機玻璃制成的電極槽,兩個電極槽中間夾有一個凝膠模,該模由一個上框形凝膠框、長與短玻璃板及樣品槽模板(梳子)所組成。電泳槽由上儲槽(白金電極在上或面對短玻璃板),下儲槽(白金電極在下或面對長玻璃板)和回紋狀

    聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(二)

    (三)操作方法1.安裝夾心式垂直板電泳槽夾心式垂直板電泳槽操作簡單,不易滲漏。這種電泳槽兩側為有機玻璃制成的電極槽,兩個電極槽中間夾有一個凝膠模,該模由一個上框形凝膠框、長與短玻璃板及樣品槽模板(梳子)所組成。電泳槽由上儲槽(白金電極在上或面對短玻璃板),下儲槽(白金電極在下或面對長玻璃板)和回紋狀

    聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(二)

    (三)操作方法1.安裝夾心式垂直板電泳槽夾心式垂直板電泳槽操作簡單,不易滲漏。這種電泳槽兩側為有機玻璃制成的電極槽,兩個電極槽中間夾有一個凝膠模,該模由一個上框形凝膠框、長與短玻璃板及樣品槽模板(梳子)所組成。電泳槽由上儲槽(白金電極在上或面對短玻璃板),下儲槽(白金電極在下或面對長玻璃板)和回紋狀

    聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度1

    (一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也

    聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(一)

    (一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也

    聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度2

    ③ 分析純過硫酸胺(AP)(AR) 0.14g加重蒸水至100ml,置棕色瓶,4℃儲存僅能用一周,最好當天配制。上述3種試劑用于制備分離膠。④ 濃縮膠緩沖液:稱取1mol/L HCl 48ml,Tris5.98g,TEMED 0.46ml,加重蒸水至80ml,調pH6.7,用重蒸水定容至100ml,

    聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度(一)

    (一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”最大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也

    蛋白質技術專題:聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度

      由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不相同。在

    蛋白質技術專題:聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度

    (一)原 理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統。“不連續系統”大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統;(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不

    SDSPAGE測定蛋白質分子量及蛋白質的純度鑒定

    一、實驗目的與原理蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中電泳時,它的遷移取決于它所帶電荷以及分子大小和形狀等因素。1967年Shapiro等人發現,如果在聚丙烯酰胺系統中加入陰離子去污劑十二烷基磺酸鈉(SDS),大多數蛋白質能與SDS按一定比例結合,即每克蛋白質結合1.4g的SDS-復合物都帶上相同密度的負電荷,

    銅純度的鑒定方法

    原子吸收法。用原子吸收火花光譜直讀儀,很準的,而且很快。在分析天平上稱重0.1000g放在燒杯里面,然后加20ml王水,放在電爐上溶完全,配到比色管里面直接就可以拿到儀器上去看了。不過高純度的還是要用容量法才可以。硫代硫酸納滴定,具體方法不好說。你還是拿到專門的化驗機構去化驗吧。

    聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)

    ? 原理 ? 聚丙烯酰胺(polyacrylamide,PAA)凝膠是丙烯酰胺(acry—lamide,Acr),在交聯劑甲叉雙丙烯酰胺(bisacrylamide,Bis)的作用下經聚合而形成的一種大分子化合物。 Acr的聚合作用只有在自由基存在時才能發生,需要一個催化誘發劑系

    慧眼識金丨純度計量助力黃金純度鑒定

      黃金具有重要的貨幣屬性及裝飾與保值功能,在人類幾千年的歷史中始終是財富和華貴的象征。黃金相關國家標準對雜質元素規定了明確的限量,例如,《金條》(GB/T 26021)對銀(Ag)、銅(Cu)等十余種雜質元素進行了限量,《高純金》(GB/T 25933)規定了更多雜質(21種)的限量要求。由于黃金

    聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)原理

    聚丙烯酰胺凝膠電泳(英語:polyacrylamidegelelectrophoresis,簡稱page)作用:用于分離蛋白質和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺(簡稱acr)和交聯劑n,n’一亞甲基雙丙烯酰胺(簡稱bis)在催化劑過硫酸銨(ap),n,n,n’,n’四甲基乙二胺(temed)作用

    聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)原理

    聚丙烯酰胺凝膠電泳(英語:polyacrylamidegelelectrophoresis,簡稱page)作用:用于分離蛋白質和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺(簡稱acr)和交聯劑n,n’一亞甲基雙丙烯酰胺(簡稱bis)在催化劑過硫酸銨(ap),n,n,n’,n’四甲基乙二胺(temed)作用

    PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)實驗

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