定量PCR實驗技術QPCR
Quantitative PCRJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid W. RussellUniversity of Texas Southwestern Medical Center, DallasExcerpted From Molecular Cloning: A Laboratory Manual Third EditionABSTRACTQuantitative PCR involves co-amplification of two templates: a constant amount of a preparation containing the desired target sequence and varying amounts of a ref......閱讀全文
實時熒光定量PCR儀的技術原理
所謂real-time Q-PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基因，利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在 real-time 技術的發展過程中，兩個重要的發現起著關鍵的作用：（1）在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的
實時熒光定量pcr儀技術原理
所謂real-time Q-PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基因，利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在 real-time 技術的發展過程中，兩個重要的發現起著關鍵的作用：（1）在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的
定量PCR方法對水源中細菌RNA進行精確定量－人elisa試劑盒
?定量PCR方法對水源中細菌RNA進行精確定量 人elisa試劑盒前 言水源中病源微生物的存在情況與人類健康息息相關（21，28）。傳統的細菌培養檢測方法不僅耗時，而且無法確定細菌的存活情況；PCR方法的應用便使上述問題得到了解決，并由此發展出多種針對水體病源微生物的檢測方法（7，9，13）。但由于
實時熒光定量PCR的研究進展及其應用（一）
多聚集鏈反應（polymerase chain reaction,PCR）技術發明至今已近20年了，在這期間技術得到了不斷的發展，近年來出現的實時熒光定量PCR（real-time quantitative PCR）技術實現了PCR從定性到定量的飛躍，它以其特異性強、靈敏度高、重復性好、
《中國藥典》三部鼠源性病毒檢查法擬增訂熒光定量PCR法
關于《中國藥典》三部鼠源性病毒檢查法（熒光定量PCR法）國家藥品標準草案的公示 國家藥典委員會擬制定鼠源性病毒檢測法增訂熒光定量PCR（Q-PCR）檢測法國家藥品標準，為確保標準的科學性、合理性和適用性，現公示征求社會各界意見（詳見附件）。公示期為三個月。請相關單位認真研核，若有異議，請及時來函提
什么叫做半定性，什么叫做半定量
半定量是RT-PCR做基因表達分析的一種方法，其操作的方法是在野生型和突變體中用一個看家基因（通常是actin）做參照標準來觀察目標基因在各自的表達情況（上調還是下調），所謂半定量的“半”是通俗的說法，即在看電泳圖估計參照亮度一致（可看作是表達的細胞數一致）情況下，確定目標基因的表達；這是與更加
二代測序技術為什么可以分析表達譜變化
表達譜的變化的主要研究方法有3種Q-PCR ? 基于內參基因的表達 來定量你關注的基因的表達量（通過熒光信號強度判別）芯片 ? ?分為2種，第一種基于基因3‘UTR ?進行雜交 ?通過信號判別基因的表達量，第二種在基因的所有區域都設計探針，基于雜交 判別基因表達量（這種更準確，因為基于3’UTR可能
RNA－萃取實驗前必讀－成功經驗法則大公開
Lab 的經驗和客戶的難題以華聯基因體實驗室的長期以來承接客戶 RNA 檢體的經驗來說，我們經常遇到的問題：（1）RNA 的總量不夠；（2）RNA 有嚴重的鹽類污染；（3）RNA 有嚴重的有機溶劑污染；（4）DNA 污染；（5）樣品降解嚴重。前四項問題都還好解決，只需要再次萃取或進行純化即可解決，但
qpcr實驗流程
Q-PCR 實驗流程一、實驗前準備，每天早上到實驗室后，先把超凈工作臺的紫外燈打開 15-20 分鐘。2超凈臺前做實驗，需佩戴干凈的橡膠手套/一次性薄膜手套，RNA 抽提需 帶口罩。3取 EP 管/槍頭時需用鑷子，不可以用使用過的手套直接取用。取完 EP 管/槍頭后，袋子及時封好。@橡膠手套須放入超
qpcr實驗流程
Q-PCR 實驗流程一、實驗前準備，每天早上到實驗室后，先把超凈工作臺的紫外燈打開 15-20 分鐘。2超凈臺前做實驗，需佩戴干凈的橡膠手套/一次性薄膜手套，RNA 抽提需 帶口罩。3取 EP 管/槍頭時需用鑷子，不可以用使用過的手套直接取用。取完 EP 管/槍頭后，袋子及時封好。@橡膠手套須放入超
qpcr實驗流程
Q-PCR 實驗流程一、實驗前準備，每天早上到實驗室后，先把超凈工作臺的紫外燈打開 15-20 分鐘。2超凈臺前做實驗，需佩戴干凈的橡膠手套/一次性薄膜手套，RNA 抽提需 帶口罩。3取 EP 管/槍頭時需用鑷子，不可以用使用過的手套直接取用。取完 EP 管/槍頭后，袋子及時封好。@橡膠手套須放入超
RNA抽提－成功經驗法則大公開!
本期專文要來跟大家討論的話題是核糖核酸(RNA)的萃取，看到這里各位心中可能已經起了疑問: RNA 萃取不是很簡單嗎?只要照著標準步驟操作，加一加試劑就完成了，有必要大費周章特地開篇幅來談這件事嗎?其實越簡單的東西遇到困難時就越難解，各位看倌就請耐著性子，聽我們娓娓道來。 Lab 的經驗和
RNA抽提－成功經驗法則
本期專文要來跟大家討論的話題是核糖核酸(RNA)的萃取，看到這里各位心中可能已經起了疑問: RNA 萃取不是很簡單嗎?只要照著標準步驟操作，加一加試劑就完成了，有必要大費周章特地開篇幅來談這件事嗎?其實越簡單的東西遇到困難時就越難解，各位看倌就請耐著性子，聽我們娓娓道來。Lab 的經驗和客戶
Real－time－PCR－mRNA－定量實驗路線選擇FQ
本期專文要來跟大家討論的話題是核糖核酸(RNA)的萃取，看到這里各位心中可能已經起了疑問: RNA 萃取不是很簡單嗎?只要照著標準步驟操作，加一加試劑就完成了，有必要大費周章特地開篇幅來談這件事嗎?其實越簡單的東西遇到困難時就越難解，各位看倌就請耐著性子，聽我們娓娓道來。 Lab 的經驗和
Takara梯度PCR儀TP系列與同類品牌產品參數對比
儀生儀世（上海）生物科技有限公司是Takara公司PCR儀的代理商，公司團隊具有多年的梯度PCR儀銷售經驗，下表是我們根據多個品牌產品整理的對比資料，嚴禁轉發！?品牌型號End User Price通量梯度功能操作界面主要特點&其他功能AgilentSureCycler 8800?73500ilab
上海巴斯德所等發現參與調控宿主基因表達的新機制
11月4日，國際學術期刊Journal of Virology 在線發表了中國科學院上海巴斯德研究所腫瘤病毒研究組的研究論文：Genome-wide mapping of the binding sites and structural analysis of KSHV vIRF2 reveal
小非編碼RNA可以作為急性髓細胞白血病臨床診斷標志物
小非編碼RNA（sncRNA），包括miRNA、tsRNA、rsRNA和ysRNA，是重要的調節分子。急性髓細胞白血病（AML）具有異質性，并涉及多種非編碼RNA改變。近年來，miRNA在AML中的作用已被廣泛探索，miRNA的明確表達譜已在白血病中得到區分。由于環狀miRNA具有敏感性、穩定性和非
戊巴比妥鈉和異氟烷對大鼠急性應激反應的影響（一）
研究背景：麻醉后處死動物在應激方面的研究是普遍的，但是麻醉對結果的影響研究不足。我們的目的是探究不同麻醉劑的影響，如在大鼠急性應激反應時腹腔注射戊巴比妥鈉或吸入異氟烷。方法：將大鼠隨機分為電擊（FS）和非應激對照組，進一步設定處死程序：直接斬首，腹腔注射戊巴比妥鈉或吸入異氟烷后斬首。再設定一組對照組
miRNA－qPCR－Detection－Primer－Set（miRNA檢測試劑盒）實驗說明
一、概述 1、介紹 microRNA(miRNA)是一類有大約22 個核苷酸組成的非編碼小分子RNA，其廣泛存在于真核生物中。miRNA 在個體發育的不同時期及不同組織中有不同的表達模式，都表明了其在發育和分化中起有重大的調控作用。迄今為此，對miRNA 的檢測方法主要有Northe
miRNA－qPCR－Detection－Primer－Set（miRNA檢測試劑盒）實驗說明
一、概述1、介紹microRNA(miRNA)是一類有大約22 個核苷酸組成的非編碼小分子RNA，其廣泛存在于真核生物中。miRNA 在個體發育的不同時期及不同組織中有不同的表達模式，都表明了其在發育和分化中起有重大的調控作用。迄今為此，對miRNA 的檢測方法主要有Northern B
實時熒光定量PCR
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后，我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析，也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析，分析的都是PCR終產物。但是在許多
實時熒光定量PCR原理、特點和應用領域（二）
所謂Real-time Q-PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基因，利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在real-time技術的發展過程中，兩個重要的發現起著關鍵的作用：在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發現，它能降解
醫藥屆的“四庫全書”《中國藥典》三部的增修訂內容介紹
2020年版藥典三部主要完善修訂了以下幾方面工作:?一是進一步完善了生物制品全過程質量控制的通用技術要求,新增通用技術要求(生物制品通則和總論)6個,修訂8個;新增通用檢測法和技術指南19個,修訂7個。?二是進一步開展了與國際先進標準協調和對接的研究工作,完成31個治療性生物制品、45個疫苗品種相關
血液病的分子生物學檢查及其應用
血液分子生物學檢驗技術主要包括PCR技術、DNA測序技術、限制性片段長度多態性（RFLP）、轉基因技術及基因芯片（DNA-chip）技術等分子生物學技術。目前，這些技術在血液學檢驗領域已得到廣泛應用，如應用于血液病基因分析、基因診斷、白血病分型、指導治療、判斷預后和微小殘留病檢測等方面。隨著分子生物
Nature子刊：circRNA促進口腔鱗狀細胞癌的發生發展
中南大學湘雅二醫院陳林老師長期從事口腔癌的發生發展機制及治療。近期，其實驗室通過Arraystar circRNA芯片發現一種調控口腔鱗狀細胞癌發生發展的circRNA分子—circRNA_100290。CircRNA_100290通過內源競爭結合miR-29，從而解除miR-29對CDK6的抑
“益生菌”的莊嚴使命：提高癌癥免疫療法成功率
已獲批的PD-1免疫療法藥物在臨床上只對35%黑色素瘤患者有明顯效果，因此這種療法的改善空間仍然很大。 “共生微生物與轉移性黑色素瘤患者的抗 -PD-1療效關系很大，“芝加哥大學研究學者在他們的最新發表文章中陳述，16名對治療有反應的患者體內的長雙歧桿菌（Bifidobacterium lon
circRNA促進口腔鱗狀細胞癌的發生發展
中南大學湘雅二醫院陳林老師長期從事口腔癌的發生發展機制及治療。近期，其實驗室通過Arraystar circRNA芯片發現一種調控口腔鱗狀細胞癌發生發展的circRNA分子—circRNA_100290。CircRNA_100290通過內源競爭結合miR-29，從而解除miR-29對CDK6的抑
陳穎：基于分子生物學和蛋白質組學的食品真偽鑒別技術
2014年7月31日，第二屆國際檢驗檢測技術與裝備博覽會在北京國家會議中心隆重召開（以下簡稱檢博會）。本屆博覽會以“高端技術，服務民生”為主題，以“質檢、科技、國際”為特色，秉著“搭建國際平臺，服務檢測市場”的宗旨，為科技服務水平提升、檢驗檢測行業和諧發展、科技成果交流與合作、檢驗檢測儀器拓展
血清中－miRNA－抽提和實驗設計經驗談
人體內的血液循環系統猶如印度的圣河 – 恒河，河水中攜帶的養分滋養著古老的大地；洗滌帶走地上的ㄧ切污穢，人們的一生都在河水中完成。如此的恒河可以想象，河水中充斥著各種物質，有廢物有養分，只要你想都可以從河水中撈取。同樣的我們的循環系統如同恒河；流動的血液如同恒河水，身體所需的ㄧ切由血液運送，身體
曹雪濤院士新文章揭示I型干擾素反向調控機制
宿主對外界病毒感染的抵御依賴于先天性免疫系統對入侵病毒分子的有效識別以及后續的抗病毒天然與獲得性免疫反應。當宿主天然免疫細胞識別病毒分子后，會分泌大量的I型干擾素以及其它炎性因子用于病毒的清除。在I型干擾素達到一定水平的情形下，細胞會產生對病毒的抵抗能力，同時被病毒感染的細胞會引發細胞凋亡事件，