凍存活檢組織實驗
實驗方法原理切取腫瘤，將腫瘤塊浸于 DMSO，然后分量凍存于液氮中。實驗材料活檢標本試劑、試劑盒DBBS收集液二甲基亞砜儀器、耗材塑料凍存管解剖刀解剖鑷培養皿實驗步驟一、材料無菌 1. 活檢標本 2. 1.2 ml 塑料凍存管（Nagle Nunc）3. DBBS4. 收集液5. 二甲基亞砜（如果放在一個無菌容器中，為半滅菌的）6. 器皿（解剖刀、解剖鑷、培養皿等，同為原代培養）二、操作步驟1. 除去壞死組織、脂肪和纖維組織后，將腫瘤切成約 1~2 mm 的小塊。同原代培養，將腫瘤塊放入 DBBS 中浸洗。2. 在每個凍存管中放入 4 或 5 個腫瘤塊。3. 將 1 ml 含有 10%DMSO 的生長培養液加入到放有腫瘤塊的凍存管中，在室溫下放置 30 min。4. 將凍存管按 1°C/min 冷凍（見......閱讀全文
凍存活檢組織實驗
實驗方法原理切取腫瘤，將腫瘤塊浸于 DMSO，然后分量凍存于液氮中。實驗材料活檢標本試劑、試劑盒DBBS收集液二甲基亞砜儀器、耗材塑料凍存管解剖刀解剖鑷培養皿實驗步驟一、材料無菌??1. 活檢標本??2. 1.2 ml 塑料凍存管（Nagle Nunc）3. DBBS4.? 收集液5.? 二甲基亞砜
凍存活檢組織實驗
實驗方法原理 切取腫瘤，將腫瘤塊浸于 DMSO，然后分量凍存于液氮中。實驗材料 活檢標本試劑、試劑盒 DBBS收集液二甲基亞砜儀器、耗材 塑料凍存管解剖刀解剖鑷培養皿實驗步驟 一、材料無菌?1. 活檢標本 2. 1.2 ml 塑料凍存管（Nagle Nunc）3. DBBS4. ?收集液5. ?二甲
新鮮組織凍存SOP
（1）冰凍當天進入醫院局域網，查詢當日手術間冰凍安排表，大致了解當日的冰凍情況，并提前通知當日負責冰凍送片的初檢醫生，避免遺漏。（2）取材前確定標本冰凍報告已發出，核對標本病理號、住院號，準確記錄其病理號、住院號、姓名（至少有其中2項）于凍存組織登記本上。（3）在新鮮標本專用取材臺上取材，并使用專用
凍存組織用EP管好還是用細胞凍存管好
1. 新鮮組織標本放入液氮要用凍存管，EP管密封性不好，液氮容易漏進去，而且也耐受不了-198°的低溫，容易爆管2. 普通凍存管就可以，不用特意再去滅酶處理，因為RNA酶污染主要是內源性的，外界的很少，主要來自于人的皮膚、呼吸，戴好口罩手套就可以了，凍存管這些，影響很小忽略不計3. 組織在液氮里凍硬
細胞凍存實驗
方案20.1 冷凍細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞生長至對數晚期，以培養基制備高濃度細胞懸液，加入細胞保護劑，等份轉移至凍存管中，緩慢冷
細胞凍存實驗
實驗方法原理 在不附加任何條件下直接凍存細胞時，細胞內外環境中的水會結成冰晶，能導致細胞發生一系列變化，如機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、pH 改變、蛋白質變性等等，最終導致細胞死亡。但如向細胞培養液中加入保護劑甘油或二甲基亞砜（DMSO），可使冰點降低，在緩慢的凍結條件下，能使細胞內水分在
細胞凍存實驗
細胞凍存實驗可以用于：（1）妥善貯存細胞；（2）維持細胞生存；（3）節約人力、物力、時間及減少污染機會；（4）維持細胞發生遺傳性狀的穩定。實驗方法原理細胞生長至對數晚期，以培養基制備高濃度細胞懸液，加入細胞保護劑，等份轉移至凍存管中，緩慢冷凍。細胞凍存時向培養基中加入保護劑，即終濃度5%.15%的甘
細胞凍存實驗
實驗方法原理細胞生長至對數晚期，以培養基制備高濃度細胞懸液，加入細胞保護劑，等份轉移至凍存管中，緩慢冷凍（圖 20.8）。細胞用胰酶消化后，加入含有細胞保護劑的培養基，分裝至凍存管中，然后將其夾到鋁條上，用紙質管包裹，放入隔熱儲存管中。將儲存管及其內容物于-70℃或-80℃存放4h或過夜，最后將含有
細胞凍存實驗
方案20.1 冷凍細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞生長至對數晚期，以培養基制備高濃度細胞懸液，加入細胞保護劑，等份轉移至凍存管中，緩慢冷
細胞的凍存與復蘇實驗_液氮凍存法
實驗方法原理目前長時間保存細胞的方法是將細胞低溫凍結保存在液氮中（－196?℃），保存時間可長達一年甚至幾年，用時解凍，大多數細胞仍能生長繁殖，為妥善起見，細胞凍存一年后應復蘇培養后再凍存。凍存細胞時應加入保護劑，否則，細胞內外的水會結成冰晶，使細胞發生機械損傷。加入保護劑后，可使冰點降低，在緩慢凍
復蘇凍存細胞實驗
方案20.2 復蘇凍存細胞實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 快速復蘇細胞，緩慢稀釋，以高細胞密度重新接種（圖20.9）。
復蘇凍存細胞實驗
實驗方法原理快速復蘇細胞，緩慢稀釋，以高細胞密度重新接種（圖20.9）。實驗步驟材料無菌培養瓶（如果需要離心時）生長培養基吸量管，1ml，10ml注射器和19號針頭（如果你使用玻璃凍存管）非滅菌保護性手套和面罩37℃無菌水，10cm深，盛于清潔、用乙醇擦拭過的帶蓋的水桶中鑷子70%乙醇棉簽1%萘黑（
人體活檢組織實驗
實驗方法原理 與醫院人員協商，提供已標記的裝有培養基的容器，安排好從手術室或病理醫生處取樣品。儀器、耗材 樣品管實驗步驟 1. 提供含收集培養基的容器，標注明確，送進手術準備室或病理實驗室。2. 做好準備，隨時取材。3. 手術后裝入收集容器，或派人收集后迅速送達，并告知確切的切取時間。4.
細胞凍存和復蘇實驗
細胞凍存和復蘇可以：（1）用于生物學保種；（2）用于醫學上干細胞研究；（3）用于傳代培養。實驗方法原理細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減
細胞凍存和復蘇實驗
細胞凍存和復蘇 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種
細胞凍存和復蘇實驗
細胞凍存和復蘇 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種
細胞凍存與復蘇實驗
實驗原理：凍存和復蘇的原則：慢凍快融。當細胞冷到零度以下，可以產生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升高，并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內不致產生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重
細胞凍存的實驗器材介紹
（一）儀器1.?凈化工作臺2. 離心機3.?恒溫水浴箱4. 冰箱（4℃、-20℃、-70℃）5.?倒置相差顯微鏡6. 培養箱7. 液氮冰箱（二）玻璃器皿1. 吸管（彎頭、直頭）2. 培養瓶3. 玻璃瓶（250ml、100ml）4. 廢液缸（三）塑料器皿1. 吸頭2. 槍頭3. 膠塞4. 移液管（10
細胞凍存步驟的專業實驗流程
我們知道，在細胞培養?檢測實驗在實驗儀器、培養基等等工作上都要耗費不少的人力和體力。好在很久以前就有高人發明了細胞保存這個實驗步驟，將暫時多出來的細胞冰凍保存，以極大程度保存細胞活力。一、細胞冷凍保存1.?材料：生長良好之培養細胞、新鮮培養基、DMSO (Sigma D-2650)、無菌塑料冷凍保存
臍血來源多能祖細胞的凍存與復蘇實驗_CBMNCs凍存
實驗材料CB-MNCs試劑、試劑盒FBS二甲基亞砜（DMSO)儀器、耗材凍存管慢速冷凍盒（如Mr.Frosty程序降溫盒）或控速降溫儀耐液氮儲存盒實驗步驟(a)準備凍存液：90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷卻，至少30min。(b)CB-MNCs細胞計數。(c)用冷的凍存液重懸細胞，調
細胞的凍存
實驗方法原理 已長滿的細胞經胰蛋白酶處理后，重懸于凍存液中。兩種試劑即甘油和 DMSO 是常用的細胞保護劑，它們在細胞保存液中起到防止細胞內冰晶形成的目的。血清的濃度經常增加至 20%。實驗步驟 1) 吸干已長滿細胞的細胞瓶內培養液。細胞不應在高密度狀態下凍存，并應在凍存的 24 小時內換液。2)
如何凍存細胞
一、材料 （一）儀器 1.凈化工作臺 2.離心機 3.恒溫水浴箱 4.冰箱（4℃、-20℃、-70℃） 5.倒置相差顯微鏡 6.培養箱 7.液氮冰箱 （二）玻璃器皿 1.吸管（彎頭、直頭） 2.培養瓶 3.玻璃瓶（250ml、100ml） 4.廢液缸 （三）塑料器皿 1
細胞的凍存
細胞的凍存實驗主要用于：（1）長時間保存細胞系；（2）防止細胞保存液內產生冰晶。實驗方法原理已長滿的細胞經胰蛋白酶處理后，重懸于凍存液中。兩種試劑即甘油和 DMSO 是常用的細胞保護劑，它們在細胞保存液中起到防止細胞內冰晶形成的目的。血清的濃度經常增加至 20%。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶凍存
如何凍存細胞
一、材料 （一）儀器 1.凈化工作臺 2.離心機 3.恒溫水浴箱 4.冰箱（4℃、-20℃、-70℃） 5.倒置相差顯微鏡 6.培養箱 7.液氮冰箱 （二）玻璃器皿 1.吸管（彎頭、直頭） 2.培養瓶 3.玻璃瓶（250ml、100ml） 4.廢液缸 （三）塑料器皿 1
細胞的凍存
細胞的凍存 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 已長滿的細胞經胰蛋白酶處理后，重懸于凍存液中。兩種試劑即甘油和 DMSO 是常用的細胞保護劑，它們在細胞保存液中起到防止細胞內冰晶形
MSCs培養物的擴增和凍存實驗_凍存間充質干細胞的復蘇
實驗材料MSCs試劑、試劑盒無菌CCMPBSA儀器、耗材塑料組織培養皿 15 cm微量移液器槍頭用于Eppendorf P10P100和P1000非滅菌調至37°C的FisherScientificIsotemp水浴箱實驗步驟(a)準備2個15 cm培養皿，加人25 ml預熱的CCM。(b)從液氮罐
MSCs培養物的擴增和凍存實驗_間充質干細胞（MSCs)的凍存
實驗材料MSCs試劑、試劑盒α-MEMFBS組織培養級二甲亞砜（DMSO)凍存液：含30%FBS和5%DMSO的α-MEM。過濾除菌（為進一步確保安全和使凍存液澄清。高濃度血清和DMSO混合時凍存液會變混濁）儀器、耗材聚丙烯離心管15ml和50mlPBSA0.22μm濾膜的真空過濾器50ml凍存管2
什么是細胞凍存？細胞凍存的好處有那些
細胞凍存是將細胞放在低溫環境，減少細胞代謝以便長期儲存的一種找術。其好處是可以存儲自己免疫能力比較好的細胞為以后的健康做儲備。
MSCs培養物的擴增和凍存實驗
間充質干細胞（MSCs)的傳代培養 間充質干細胞（MSCs)的凍存 凍存間充質干細胞（MSCs)的復蘇 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理
MSCs培養物的擴增和凍存實驗
實驗方法原理 實驗材料 MSCs試劑、試劑盒 無菌完全培養培養基（CCM）、PBSA、胰蛋白酶 EDTA儀器、耗材 聚丙烯離心管15 mL和50 mL、塑料組織培養皿直徑15 cm、塑料微量移液器槍頭實驗步驟 (a)檢査所得的MSCs。如果培養物中小的、貼壁、紡錘形的成纖維細胞樣細胞匯合至60%時，