皮層星形膠質細胞的原代培養實驗——貼附差異法
皮層星形膠質細胞的原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)皮層星形膠質細胞功能研究。實驗方法原理利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的皮層來源的混合膠質細胞中去除少突膠質細胞和小膠質細胞,其中星形膠質細胞的貼附力最強。用這種方法獲得的星形膠質細胞純度很高(95%以上),且細胞具有較好的增殖能力。實驗材料新生2-3d的SD大鼠仔鼠試劑、試劑盒含10%胎牛血清的DMEM培養基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+0.04%的EDTA)儀器、耗材37℃恒溫搖床實驗步驟1.培養少突膠質細胞,待10天后細胞分層,且星形膠質細胞已經完全鋪滿底層,開始純化。2在37℃恒溫搖床上,固定好培養瓶,以280r/min的速度能搖過夜,約20h。3.次日,在顯微鏡下觀察上層細胞脫落情況,若上層細胞基本去除干凈,而下層細胞仍完好貼壁,就可終止純化。棄培養液后按......閱讀全文
皮層星形膠質細胞的原代培養實驗——貼附差異法
皮層星形膠質細胞的原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)皮層星形膠質細胞功能研究。實驗方法原理利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的皮層來源的混合膠質細胞中去除少突膠質細胞和小膠質細胞,其中星形膠質細胞的
皮層星形膠質細胞的原代培養實驗
貼附差異法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的
皮層星形膠質細胞的原代培養實驗
貼附差異法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的
皮層星形膠質細胞的原代培養
實驗方法原理 利用星形膠質細胞、少突膠質細胞和小膠質細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養層黏附性不同等特性,用37℃恒溫搖床從培養的皮層來源的混合膠質細胞中去除少突膠質細胞和小膠質細胞,其中星形膠質細胞的貼附力最強。用這種方法獲得的星形膠質細胞純度很高(95%以上),且細胞具有較好的增
星形膠質細胞(astrocyte)原代培養
星形膠質細胞來源于2天的大鼠。斷頭后的大鼠大腦收集在含有11mM 碳酸氫鈉,71mM葡萄糖和1%抗菌素的DMEM溶液中。移除腦膜,血管和白質。大腦皮層用機械分裂法進行勻漿,然后將細胞懸液經230μm,104μm 和73.3μm孔的鐵絲網依次過濾。然后用700g 速度10分鐘離心收集細胞,
正常小鼠原代腦星形膠質細胞培養
一、實驗試劑?1、培養基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、凍存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液
小膠質細胞原代培養實驗
實驗方法原理利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下來繼續培養,達到分離和純化小膠質細胞的目的。實驗材料新生1-3d的仔鼠試劑、試劑盒含10%胎牛血清的DMEM培養基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+
小膠質細胞原代培養實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下
小膠質細胞原代培養
實驗方法原理 利用混合膠質細胞培養物分層生長,以及小膠質細胞半懸浮生長的原理,通過搖床震蕩法,將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下來繼續培養,達到分離和純化小膠質細胞的目的。實驗材料 新生1-3d的仔鼠試劑、試劑盒 含10%胎牛血清的DMEM培養基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋
少突膠質細胞原代培養
少突膠質細胞來源于1-2 天的大鼠。斷頭后大鼠大腦收集到Ham’s F-12培養液中,移除腦膜和血管。皮質用機械勻漿進行勻漿然后將細胞懸液依次通過230μm和104μm尼龍網進行過濾。細胞通過1000rpm 7分鐘離心進行收集,用添加12.5%胎牛血清的DMEM進行重懸細胞。最后以2.0×1
皮層/海馬神經元的原代培養實驗
實驗方法原理神經元在發育過程中早于膠質細胞,因此通常選擇胎鼠做腦內神經元培養。一般取El7-l8d孕大鼠或El4-16d孕小鼠做神經元培養。新生1d的仔鼠也可以用來培養神經元,但培養成功后雜細胞較多,有時需要進一步純化。這兩個部位的細胞培養方法類似實驗材料El7-18d孕大鼠或E14-16d孕小鼠新
皮層/海馬神經元的原代培養實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 神經元在發育過程中早于膠質細胞,因此通常選擇胎鼠做腦內神經元培養。一般取El7-l8d孕大鼠或El4-16d孕小鼠做神經元培養。新生1
腫瘤細胞原代培養實驗——脫落細胞法
實驗方法原理脫落細胞法是指采集人體各部位,特別是管腔器官表面的脫落細胞進行培養。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒完全培養基洗滌液儀器、耗材刀片培養箱培養皿實驗步驟一、將新鮮的腫瘤組織去除脂肪和結締組織。二、洗液洗2次后,用刀片將腫瘤組織切成細薄片。三、在切割的同時有許多上皮細胞脫落下來,脫落細胞經洗滌后
星形膠質細胞的起源
星形膠質細胞是星形腦細胞的一個特殊亞群。雖然星形膠質細胞不像神經元那樣為人所知,但它是神經元活動的關鍵,在各種神經系統疾病中發揮著重要作用。由里雅斯特國際高等研究學院(SISSA) Antonello Mallamaci領導的一項新研究,最近發表在《Brain Cortex》研究表明,在胚胎發育過程
小膠質細胞和星形膠質細胞的區別
小膠質細胞(microglia)是神經膠質細胞的一種,相當于腦和脊髓中的巨噬細胞,是中樞神經系統(CNS)中的第一道也是最主要的一道免疫防線。小膠質細胞大約占大腦中的神經膠質細胞的20%。小膠質細胞不停地清除著中樞神經系統中的損壞的神經,斑塊及感染性物質。無數臨床上和神經病理學研究表明激活的小膠質細
細胞原代培養實驗——組織塊直接培養法
實驗材料孕鼠新生小鼠試劑、試劑盒RPMI1640培養基牛血清胰蛋白酶Hanks液酒精青霉素鏈霉素儀器、耗材培養瓶青霉素瓶廢液缸血球計數板蠟盤手術器械大頭針離心管小玻璃漏斗三角燒瓶平皿吸管試管移液管無菌紗布無菌眼科剪實驗步驟?一、將孕鼠或新生小鼠拉頸椎致死,置75%酒精泡2-3秒鐘(時間不能過長、以免
細胞原代培養實驗——胰酶消化法
細胞原代培養可以:(1)為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;(2)為傳代培養創造條件;(3)服務于臨床實踐,用于藥物篩選等。實驗方法原理將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、
腫瘤細胞原代培養實驗——組織塊法
腫瘤細胞原代培養可以:(1)研究癌變機理;(2)研究抗癌藥檢測;(3)研究癌分子生物學;(4)用于闡明和解決癌癥。實驗方法原理腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血清濃度即可,在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)
腫瘤細胞原代培養實驗——酶消化法
實驗方法原理本法是利用成纖維細胞對膠原酶較為敏感的特點,通過消化進行選擇。可用0.5mg/ml的膠原酶消化處理,邊消化邊在倒置顯微鏡下窺視,當發現成纖維細胞被除掉后,即終止消化;用Hanks洗滌處理一次后,更換新培養液,繼續培養,可獲純凈腫瘤細胞。如成纖維細胞未被除凈,可再次重復。實驗材料組織試劑、
星形膠質細胞的結構特點
星形膠質細胞是中樞神經系統中神經膠質細胞的一種亞型。 它們的許多過程都包裹著神經元產生的突觸。傳統上會使用組織學分析去鑒定星形膠質細胞。細胞往往會表達中間絲狀的膠質纖維酸性蛋白(GFAP)? 。GFAP的上調往往代表著反應性星形膠質細胞增生 (reactive astrogliosis) ,即是中樞
病毒的培養方法實驗—組織培養法原代細胞單層培養
實驗方法原理組織培養是目前培養病毒應用最廣的一種培養方法,其優點是①經濟適用,結果正確且敏感;②較實驗動物易于控制。原代細胞單層培養法,是指動物(包括脊椎動物和無脊椎動物)的組織自機體取出后,經胰酶或其他細胞分散劑消化處理,得到單個細胞懸液。以一定量接種到特定容器中,加入細胞生長所必需的營養液,置合
脊髓星形膠質細胞機械性損傷的體外培養模型
1.材料與方法取新生的wistar 大鼠脊髓,剪碎,0125 %胰蛋白酶消化1h ,用含血清的DMEM培養液終止胰蛋白酶的作用; 而后吹打成散在的單個細胞,進行細胞計數,按5 ×105 個Pcm2 密度進行接種。培養至第10天時加10mM Leu2methy12ester 除殺小膠質細胞。于16d
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以:(1)獲得神經膠質細胞;(2)用于神經膠質細胞電生理特性,如膜電位、去極化等;(3)用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物,它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子,并能分泌多種神
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以:(1)獲得神經膠質細胞;(2)用于神經膠質細胞電生理特性,如膜電位、去極化等;(3)用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物,它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子,并能分泌多種神
細胞原代培養實驗
細胞原代培養可以:(1)為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;(2)為傳代培養創造條件;(3)服務于臨床實踐,用于藥物篩選等。實驗方法胰酶消化法組織塊直接培養法實驗方法原理將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合
細胞原代培養實驗
胰酶消化法 組織塊直接培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成
細胞原代培養實驗
胰酶消化法 組織塊直接培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成
細胞的原代培養實驗
實驗方法原理 細胞培養(Cell culture)是模擬機體內生理條件,將細胞從機體中取出,在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代,進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。近年來,廣泛地應用于分子生物學、遺傳學、免疫學、腫瘤學、細胞工程等領域,發展成一種重要生物技術,并取得顯著成就
細胞的原代培養實驗
實驗方法原理原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上,加入
細胞的原代培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散