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    肽類的電泳(TricineSDSPAGE)實驗

    實驗方法原理在定量分析蛋白質混合物方面,最廣泛采用的蛋白質組學方法就是 SDS-PAGE。因為它根據蛋白質的大小不同分離蛋白,所以對于檢測蛋白純度特別有用,同時也應用于蛋白質相對分子質量(Mr) 的測定。影響到 SDS-PAGE 蛋白分離效果的因素有:①丙烯酰胺與交聯劑(雙丙烯酰胺)的比例;②用于制備濃縮膠和分離膠的丙烯酰胺/雙丙烯酰胺的比例;③濃縮膠和分離膠緩沖液 pH 及成分;④樣品制備的方法。典型 Laemmli 膠系統(Laemmli,1970) 采用甘氨酸電泳緩沖液,能分離分子質量范圍. 約 3000?200000Da 的蛋白。本方案中使用的是 ScMgger 和 vonJagow(1987) 的 tricine 凝膠系統,其中用 tricine[三(輕甲基)甲基甘氨酸] 代替了甘氨酸。這一系統可以分離小至 500Da 的肽類,適合 SDS-PAGE 肽圖譜以及制備氨基末端、羧基末端測序的樣品實驗材料蛋白溶液或塊狀細胞......閱讀全文

    肽類的電泳-(TricineSDSPAGE)-實驗

    實驗方法原理在定量分析蛋白質混合物方面,最廣泛采用的蛋白質組學方法就是 SDS-PAGE。因為它根據蛋白質的大小不同分離蛋白,所以對于檢測蛋白純度特別有用,同時也應用于蛋白質相對分子質量(Mr) 的測定。影響到 SDS-PAGE 蛋白分離效果的因素有:①丙烯酰胺與交聯劑(雙丙烯酰胺)的比例;②用于制

    肽類激素的作用

      肽類激素的作用是通過刺激腎上腺皮質生長、紅細胞生成等實現促進人體的生長、發育,大量攝入會降低自身內分泌水平,損害身體健康,還可能引起心血管疾病、糖尿病等。同樣,濫用肽類激素也會形成較強的心理依賴。

    簡述胃腸肽類激素的作用

      可分為6種:  (1)內分泌(endocrine),激素是由細胞釋放,經血液循環運至遠處靶細胞而起作用;  (2)旁分泌(paracrine),激素由細胞釋放,作用于其鄰近的靶細胞;  (3)神經分泌(neurocrine),是激素由神經元突觸釋放到突觸與靶細胞間的間隙,而起作用;  (4)自分

    簡述胃腸肽類激素的作用

      可分為6種:  (1)內分泌(endocrine),激素是由細胞釋放,經血液循環運至遠處靶細胞而起作用;  (2)旁分泌(paracrine),激素由細胞釋放,作用于其鄰近的靶細胞;  (3)神經分泌(neurocrine),是激素由神經元突觸釋放到突觸與靶細胞間的間隙,而起作用;  (4)自分

    電泳分離的蛋白質肽譜和序列分析實驗

    實驗材料 凍干的純化蛋白樣品試劑、試劑盒 甲酸氫溴酸過氧化氫NaOH 固體儀器、耗材 旋轉蒸發器小試管實驗步驟 1.加入 100ul 過氧化氫到 900ul 甲酸中,在室溫下放置讓,將反應產生過甲酸 (HCOOOH)。2.在冰上冷凍過甲酸至 0°C。3.在預冷的小試管中,將蛋白質溶解于 50ul 過

    電泳分離的蛋白質肽譜和序列分析實驗

    方案1 蛋白質的過甲酸氧化實驗 方案2 蛋白質還原和S-羧甲基化:大規模方法 方案3 蛋白質還原和S-羧甲基化:微量方法 方案4 用Ellman 試劑測定自由巰基和二硫鍵實驗 方案5 蛋白質的胰酶消化實驗 方案6 用溴化氰切割 M

    關于小肽類佐劑的基本介紹

      小肽類佐劑是近幾年來發現的可以增強免疫效力、具備佐劑功效的一類物質。它是由菌分泌在上清中,通過截留可以獲得的小于 10kDa 的肽段。通過動物免疫實驗發現,小肽明顯提升了機體產生抗體的效價,具備佐劑功效。小肽作為佐劑具備很多優勢: 獲取簡單; 便于儲存與運輸; 因為是益生菌所分泌,所以對機體無害

    關于肽類激素的分別介紹

      有一類化學結構屬于多肽或蛋白質的激素,如下丘腦、垂體、胰島、胸腺等分泌的激素;這類激素含量增高或不足時將導致一些重要疾病,如常見的胰島素不足引起的1型糖尿病。垂體生長激素不足造成侏儒癥,生長激素過多引起的巨人癥或肢端肥大癥等。  促甲狀腺素釋放激素:自下丘腦分離提純,僅由焦谷氨酸、組氨酸和脯氨酸

    肽類色譜儀分類方法

    肽類色譜儀分類有多種。1、按功能可分:分析型肽類色譜儀和制備型肽類色譜儀。2、按分離目的可分:實驗室肽類色譜儀和工業肽類色譜儀。3、按靈敏性可分:微量肽類色譜儀和痕量肽類色譜儀。4、按分離原理可分:肽類液相色譜儀和肽類毛細管電泳色譜儀等。5、按分離規模可分:微型肽類色譜儀、小型肽類色譜儀和大型肽類色

    胃腸肽類激素的種類及作用介紹

    可分為6種:(1)內分泌(endocrine),激素是由細胞釋放,經血液循環運至遠處靶細胞而起作用;(2)旁分泌(paracrine),激素由細胞釋放,作用于其鄰近的靶細胞;(3)神經分泌(neurocrine),是激素由神經元突觸釋放到突觸與靶細胞間的間隙,而起作用;(4)自分泌(au-tocri

    關于肽類神經遞質受體的介紹

      肽類早已知道神經元能分泌肽類化學物質,例如視上核和室旁核神經元分泌升壓素(九肽)和催產素(九肽);下丘腦內其他肽能神經元能分泌多種調節腺垂體活動的多肽,如促甲狀腺釋放激素(TRH,三肽)、促性腺素釋放激素(GnRH,十肽)、生長抑素(GHRIH,十四肽)等。由于這些肽類物質在分泌后,要通過血液循

    合成類肽用以恢復受損肺部的呼吸功能

      急性肺損傷(ALI)導致呼吸容量逐漸減少,并出現低氧血癥和肺表面活性物質功能障礙。ALI的發病機制和管理非常復雜,已成為全球發病率和死亡率的重要原因。由于目前表面活性劑成本較高,主要來源于動物的肺。已有的人工合成的替代物成本較低,但功能性不如來自動物的衍生物。   來自斯坦福大學和加拿大西安大

    合成類肽用以恢復受損肺部的呼吸功能

      急性肺損傷(ALI)導致呼吸容量逐漸減少,并出現低氧血癥和肺表面活性物質功能障礙。ALI的發病機制和管理非常復雜,已成為全球發病率和死亡率的重要原因。由于目前表面活性劑成本較高,主要來源于動物的肺。已有的人工合成的替代物成本較低,但功能性不如來自動物的衍生物。   來自斯坦福大學和加拿大西安大

    肽質量檢索實驗

    實驗方法原理 實驗材料 蛋白樣品儀器、耗材 質譜儀實驗步驟 鑒定數據庫中已有序列的蛋白質的算法基于以下一些理念:(1) 肽段是由切點專一的試劑水解蛋白質產生的,通常用已知切點專一的蛋白酶。(2) 這些肽段的質量由 MALDI-MS 或 ESI-MS 精確測定。(3) 計符蛋白序列數據庫中的每一序列被

    肽質量檢索實驗

    基本方案 其他方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 蛋白樣品

    新型肽類分子如何改善人類健康?

      本文中,小編整理了多篇研究成果,共同解讀科學家們如何利用肽類分子抵御多種疾病,改善人類健康!分享給大家!  【1】科學家有望開發出一種新型的細胞滲透性多肽嵌合物來促進機體傷口愈合  新聞閱讀:Designing a novel cell-permeable peptide chimera to

    抗肽抗體的制備實驗

    提高免疫原性肽的抗血清,是最簡單的方法,獲得非隔離的蛋白質的抗體,例如,對來自DNA序列信息的推定蛋白質序列。 這種方法也是有用的,當隔離的抗原是困難或費時,或當抗原是一個大的蛋白家族的成員。實驗步驟: ?將10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉

    免疫電泳實驗_電泳

    試劑、試劑盒Tris-巴比妥緩沖液貯液電極緩沖液瓊脂糖溶液實驗步驟電泳時溫度可控制在 10~15℃,同前述電泳的方法一樣,先在冷卻板上鋪一層煤油,再鋪膠。電極芯與凝膠的邊緣接觸 5~10 mm,并保持平行,電泳時的電場強度約為 20 V/cm。

    制備電泳實驗——連續電泳

    儀器、耗材聚丙烯酰胺凝膠電泳瓊脂糖電泳實驗步驟1. 連續洗脫電泳使用連續洗脫的聚丙烯酰胺凝膠電泳或瓊脂糖電泳能制備微克到毫克級的多肽,蛋白或核酸。裝置可以是各種各樣的。有的是把樣品直接加在固體凝膠的表面,分子經過電泳分離后,由流動的緩沖液洗脫,純化后的分子被濃縮,并由蠕動泵和部分收集器收集。2. 連

    特殊肽類或有望逆轉炎性腸病!

      近日,一項刊登在國際雜志Journal of Clinical Investigation上的研究報告中,來自加利福尼亞大學的科學家們通過研究發現,一種特殊的肽類或能模仿高密度脂蛋白(HDL,一種有益膽固醇)的功能,其或有望幫助治療與炎性腸病(IBD)相關的炎癥;文章中,研究者還揭示了炎性腸病發

    阿片類肽為慢性疼痛的治療開辟了替代途徑

      基于他們之前的發現,來自盧森堡衛生研究所(LIH)感染和免疫部免疫藥理學和交互組學小組的科學家,與RTI國際藥物發現中心(RTI)(一個非營利性的研究機構)合作,已經證明了conolidine,它與新發現的阿片受體ACKR3/CXCR7相互作用,該受體可調節大腦中自然產生的阿片肽。研究人員還開發

    抗肽抗體的制備實驗1

    實驗材料抗體試劑、試劑盒磷酸鈉緩沖液MBS二甲基酰胺EDTAPBS儀器、耗材分光光度計離心機實驗步驟1. ?將10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液中,置于一個2 ml 的玻璃試管,加50 μl MBS/DMF溶液,于室溫下溫和攪拌30 min。?2. ?加

    抗肽抗體的制備實驗2

    實驗材料抗體試劑、試劑盒磷酸鈉緩沖液MBS二甲基酰胺EDTAPBS儀器、耗材分光光度計離心機實驗步驟1. ?將10 mg 的血藍蛋白溶于2 ml pH10的硼酸緩沖液中,置于15 ml 的玻璃試管中,溫和振搖。2. ?加10 μmol 的合成肽。3. ?緩慢加入1 ml 的0.3%戊二醛溶液,于室溫

    磷酸化位點分析實驗——高分辨凝膠電泳分離磷酸肽

    實驗材料蛋白樣品儀器、耗材質譜儀實驗步驟在聚丙烯酰胺凝膠上用?2-DE?純化磷酸肽是最近發表的制備技術,其結果與?2D-PP?結果相似。非變性凝膠等電聚焦結合堿性?40%PAGE?膠用于磷酸肽分離及比較分析。?32p?標記樣品用放射自顯影或磷儲屏檢測。用?Edman?測序方法鑒定蛋白質并確定磷酸化位

    火箭電泳實驗

    實驗方法原理在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。實驗材料待檢血清試劑、試劑盒巴比妥緩沖液瓊脂粉儀器、耗材微量進樣器打孔器玻璃板電泳儀實驗步驟1. ?抗體瓊脂板的

    制備電泳實驗

    實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品通過某種電泳方法進一步分離純化后,再用擴散洗脫或電泳洗脫收集純樣品,繼而用作其他分析的需要。實驗材料 凝膠切片儀器、耗材 解剖刀勻漿器實驗步驟 1. 擴散洗脫擴散洗脫是用解剖刀或勻漿器將凝膠切片搗

    核酸電泳實驗

    瓊脂糖凝膠電泳是分離鑒定和純化DNA片段的標準方法。該技術操作簡便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度離心法)所無法分離的DNA片段。當用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙啶EB(德元國際Cat# LY5009)染色,在紫外光下至少可以檢出1-10ng的DNA條帶,從而可以確定DNA片段在凝膠中的位置。此外

    火箭電泳實驗

    實驗方法原理 在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。實驗材料 待檢血清試劑、試劑盒 巴比妥緩沖液瓊脂粉儀器、耗材 微量進樣器打孔器玻璃板電泳儀實驗步驟 1. ?抗

    火箭電泳實驗

    火箭電泳實際是一種定量免疫電泳。其原理為:在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。一、材料1. 診斷血清(抗體):抗人IgG或IgA免疫血清。2. 待檢血清(抗原)

    制備電泳實驗

    洗脫 連續電泳 等電聚焦制備電泳 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品

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