蛋白質染色實驗——快速銀染法
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒甲醛固定液硫代硫酸鈉干膠液甲醇儀器、耗材搖床透析膜實驗步驟1. 將凝膠置于塑料容器中，加入50 ml 甲醛固定液，在旋轉搖床中緩慢搖動10 min。 2. 傾去固定液，用水冼兩次，每次5 min，緩慢搖動。 3. 傾去水，凝膠浸泡在0.2 g/l 硫代硫酸鈉溶液中1 min，緩慢搖動。 4. 傾去硫代硫酸鈉溶液，用水洗凝膠兩次，毎次20 s。 5. 傾去水，將凝膠浸泡在50 ml 硝酸銀中10 min。緩慢搖動。 6. 傾去硝酸銀溶液，用水洗膠，然后用小量體積的硫代硫酸鹽顯影液冼。 7. 將凝膠浸泡在50 ml 新配制的硫代琉酸鹽顯影液中，緩慢搖動，直至獲得足夠的條帶顯色強度，在下一步停影前繼續顯影一會兒，或顯影到此為止。8. 每100 ml 硫代硫酸鹽顯影液加......閱讀全文
蛋白質染色實驗——快速銀染法
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒甲醛固定液硫代硫酸鈉干膠液甲醇儀器、耗材搖床透析膜實驗步驟1. 將凝膠置于塑料容器中，加入50 ml 甲醛固定液，在旋轉搖床中緩慢搖動10 min。?2. ?傾去固定液，用水冼兩次，每次5 min，緩慢搖動。?3. ?傾去水，凝膠浸泡在0.2 g/l 硫代硫酸鈉溶液中1 m
蛋白質染色實驗——銀染法
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒脫色液戊二醛硝酸銀洗印顯影液儀器、耗材培養箱搖床實驗步驟1. ?將聚丙烯酰胺凝膠放在塑料容器并以5倍體積的固定液覆蓋，在旋轉搖床中緩慢搖動30 min 以上。?2. ?傾去固定液，加5倍凝膠體積的脫色液，緩慢搖動60 min 以上。?3. ?傾去脫色液，加5倍凝膠體積的10
蛋白質染色實驗——非氨鹽銀染法
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒DTT硝酸銀碳酸鹽顯影液檸檬酸儀器、耗材搖床實驗步驟1. ?將凝膠置于玻璃或聚乙烯容器中，加入100 ml 固定液，在旋轉搖床中緩慢搖動30 min。?2. ?傾去固定液，將凝膠浸沒在脫色液中，緩慢搖動30 min。?3. ?傾去脫色液，加50 ml 10%戊二醛，在通風櫥
銀染實驗
試劑、試劑盒甲醇（50% 和5%v v)二硫蘇糖醇AgNO3檸檬酸（固態)顯影液實驗步驟試劑甲醇（50% 和5%v/v)10umol/L二硫蘇糖醇（DTT)AgNO3(0.1%w/v)檸檬酸（固態)顯影液操作程序此操作程序是根據Merril(1987)的方法修改而成。室溫下，凝膠在旋轉平臺上緩慢搖動
銀染實驗
試劑、試劑盒 甲醇（50% 和5%v v)二硫蘇糖醇 AgNO3檸檬酸（固態)顯影液實驗步驟 試劑甲醇（50% 和5%v/v)10umol/L二硫蘇糖醇（DTT)AgNO3(0.1%w/v)檸檬酸（固態)顯影液操作程序此操作程序是根據Merril(1987)的方法修改而成。室溫下，凝膠在旋轉平臺上緩
銀染實驗
銀染實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甲醇（50% 和5%v v) 二硫蘇糖醇 AgNO3
銀染實驗用水指南
SDS聚丙烯酰胺凝膠染色是蛋白質研究的一個基礎方法。染色方法有很多，實際應用中，考馬斯亮藍染色（考染）和銀染是運用的最多的方法。考馬斯亮藍G250在游離狀態下呈紅色，它與蛋白質結合后變為藍色，結合物在595 nm波長下有最大光吸收。其光吸收值與蛋白質含量成正比，因此可用于蛋白質的定量測定。銀染實驗中
銀染
1．將固定液中的凝膠搖動過夜或至少1小時。2．將保溫液中的凝膠輕微振蕩2小時。3．去離子水清洗凝膠3次，每次20分鐘。4．將硝酸銀溶液中凝膠輕微振蕩30分鐘。5．用去離子水快速洗膠30秒。6．將定影液中凝膠搖動5～30分鐘，時間由所加的蛋白質量決定。7．如果已經達到所需的顏色深度，將凝膠放到定影液中
PCR－產物電泳銀染實驗
常用的核酸電泳法有兩種。①水平電泳：瓊脂糖凝膠，紫外光下判斷條帶。此法經濟省時，但分辨率較低。②垂直電泳：聚丙烯酰胺凝膠，可見光下判斷條帶。此法相對費力，但分辨率較高。分辨率高是聚丙烯酰胺電泳法被優先用于克隆性基因重排條帶判斷的關鍵。在聚丙烯酰胺凝膠上較寬彌散被判斷為假陽性（陰性）的條帶，在瓊脂糖膠
PCR－產物電泳銀染實驗
實驗方法原理 聚丙烯酰胺凝膠（PAG）是由丙烯酰胺單體和交聯劑亞甲基雙丙烯酰胺，在引發劑過硫酸胺（AP）提供自由基和催化劑四甲基乙二胺（TEMED）的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光線誘發聚合，所以其水溶液應貯藏在棕色瓶中，置低溫 4℃ 更佳。由于其水溶液穩定性較差，通常 2 個月內用完為好。
銀染實驗的操作流程
實驗目的檢測聚丙烯酰胺凝膠中的蛋白質。實驗原理在堿性條件下，用甲醛將蛋白帶上的硝酸銀（銀離子）還原成金屬銀，以使銀顆粒沉積在蛋白帶上。染色的程度與蛋白中的一些特殊的基團有關，不含或者很少含半胱氨酸殘基的蛋白質有時候呈負染。銀染的詳細機制還不是非常清楚。試劑：乙醇、冰醋酸（純乙酸）、乙酸鈉、硫代硫酸鈉
PCR－產物電泳銀染實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理聚丙烯酰胺凝膠（PAG）是由丙烯酰胺單體和交聯劑亞甲基雙丙烯酰胺，在引發劑過硫酸胺（AP）提供自由基和催化劑四甲基乙二胺（TEMED）的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光線誘發聚合，所以其水溶液應貯藏在棕色瓶中，置低溫 4℃ 更佳。由于其水溶液穩定性
低背景的蛋白質銀染方法
我們做蛋白質電泳的人都知道，銀染色很靈敏，有很強的說服力，但通常膠背景較深，不易掃描。在這里介紹一下低背景的蛋白質銀染方法。Step Reagent Time/minFix 50%EtOH, 12%HAC, 0.1%HCHO, 38%H2O 60Rinse 50% EtOH 5 min, 3 tim
銀染實驗的操作注意事項
1．固定時間較長，則加一步水洗30min，以免膠太脆而破碎。2．甲醛在使用前加入。3．最好多配制一份顯色液，第一次顯色到溶液變混濁時換一份顯色液，顯色到點清晰。4．顯色過程很快，要注意把握時間，避免染色過度。5．銀染液和顯色液需要預冷。6．所用器皿要很潔凈，不用手直接接觸，以免雜蛋白污染！7．清洗用
SSR銀染方法
SSR銀染方法(輕輕震蕩)1、固定10%乙醇+0.5%冰乙酸 6min×2次2、染色0.2% AgNO3 12min3、漂洗（1）蒸餾水 1-2min（2）0.002% Na2S2O3 1-2min（3）顯色1.5%NaOH + 0.4%甲醛（4）保存0.75%Na2CO3
銀染的應用
主要是用于垂直凝膠電泳中低豐度蛋白的檢測，如內源性GST-Pulldown、Co-IP等實驗中相互作用蛋白的研究 。
異染顆粒染色配制及染色方法實驗
實驗方法原理 用于白喉棒狀桿菌染色，異染顆粒可明顯地被顯示出來，標本直接涂片或細菌涂片均可用改良阿伯特法染色來觀察異染顆粒。實驗步驟 實驗試劑：甲液：甲苯胺蘭：0.15g ? 孔雀綠：0.2g冰醋酸： ? ?lml ? 95%乙醇：2ml蒸餾水： ?100ml將各染料先溶于乙醇，然后加入水與冰醋酸的
異染顆粒染色配制及染色方法實驗
異染顆粒染色配制及染色方法實驗可以用于：（1）檢測白喉桿菌的存在；（2）異染顆粒與菌體對比度好。實驗方法原理用于白喉棒狀桿菌染色，異染顆粒可明顯地被顯示出來，標本直接涂片或細菌涂片均可用改良阿伯特法染色來觀察異染顆粒。實驗材料白喉桿菌試劑、試劑盒甲苯胺蘭孔雀綠冰醋酸乙醇儀器、耗材培養基載玻片實驗步驟
低背景的蛋白質銀染(silver－staining)方法
我們做蛋白質電泳的人都知道，銀染色很靈敏，有很強的說服力，但通常膠背景較深，不易掃描。在這里介紹一下低背景的蛋白質銀染方法。Step Reagent Time/minFix 50%EtOH, 12%HAC, 0.1%HCHO, 38%H2O 60Rinse 50% EtOH 5 min, 3 tim
PAGE凝膠快速銀染試劑盒操作手冊
PAGE凝膠快速銀染試劑盒貨號: G7210規格: 1L保存: 室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復檢期12個月。試劑盒內容： G7210硝酸銀 2g染色液A 100ml顯色液B 100ml顯色液C 100ml終止液D 100ml注：1L 規格指可配制的硝酸銀染色液的體積，實際使用次數根據PAGE
方案11－膠內蛋白質的硝酸銀染色實驗
實驗材料通過電泳分離的凝膠內蛋白質試劑、試劑盒乙酸顯影液固定液甲醇硫酸銀水溶液終止反應液儀器、耗材塑料皿搖床實驗步驟1.將凝膠放在塑料皿中（用一次性的塑料皿或者徹底洗過的塑料皿），加入足量的固定液以覆蓋凝膠。固定 20 min, 并輕輕搖動。2.棄掉固定液，加人足量的 50% 甲醇覆蓋膠，輕輕搖動
核酸的銀染方法
核酸硝酸銀染色：參考《鋅對缺血再灌注大鼠肝臟金屬硫蛋白一1基因表達的影響》營養學報2000年第22卷第4期294-297取PCR產物進行聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)電泳，所得凝膠進行硝酸銀染色．程序如下：(1)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液中固定6 min；(2)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液
鞭毛染色實驗——硝酸銀染色法
細菌的鞭毛很纖細，其直徑通常為 0.01 ~0.02 μm， 所以，除了很少數能形成鞭毛束（由多根鞭毛構成）的細圈可以用相差顯微鏡直接觀察到鞭毛束的存在外，一般細菌的鞭毛均不能用光學顯微鏡直接觀察到，而只能用電子顯微鏡觀察。要用普通光學顯微鏡觀察細菌的鞭毛，必須用鞭毛染色法。鞭毛染色方法很多，本實驗
銀染核仁形成區的標本制備及觀察實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 生化和免疫化學研究證明銀染蛋白是RNA聚合酶I，其功能是催化rDNA轉錄rRNA形成核仁，因此通過這種反應能夠特異顯示rRNA轉錄的活
銀染核仁形成區的標本制備及觀察實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 生化和免疫化學研究證明銀染蛋白是RNA聚合酶I，其功能是催化rDNA轉錄rRNA形成核仁，因此通過這種反應能夠特異顯示rRNA轉錄的活
銀染核仁形成區的標本制備及觀察實驗
近年來發現，雖然人的端著絲粒染色體短臂是28S、18S、和5.8S rRNA基因存在部位，稱核仁形成區，但銀染的物質不是rDNA和rRNA，而是與活性的rDNA轉錄有關的一類酸性蛋白質，容易將Ag離子還原為Ag的顆粒，從而在核仁形成區鍍上銀、呈棕黑色，稱為銀染核仁形成區。實驗方法原理生化和免疫化學研
銀染核仁形成區的標本制備及觀察實驗
實驗方法原理?生化和免疫化學研究證明銀染蛋白是RNA聚合酶I，其功能是催化rDNA轉錄rRNA形成核仁，因此通過這種反應能夠特異顯示rRNA轉錄的活性。實驗材料?HL-60細胞HeLa細胞試劑、試劑盒?Carnoy固定液HCl甲酸AgNO3蛋白膠硫代硫酸鈉戊二醛乙醇丙酮醋酸鈾檸檬酸鉛染液儀器、耗材?
蛋白質染色實驗
考馬斯亮藍染色 銀染法 非氨鹽銀染法 快速銀染法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 凝膠中蛋白質的定位可用考馬斯亮藍染料染色或銀染色。前者簡便
蛋白質染色實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 聚丙烯酰胺凝膠固定液染色液脫色液儀器、耗材 濾紙培養箱實驗步驟 1. ?將聚丙烯酰胺凝膠放在塑料容器并以3~5倍體積的固定液覆蓋，在旋轉搖床中緩慢揺動2 h。?2. ?傾去固定液，以考馬斯亮藍染色液覆蓋凝膠，并緩慢搖動4 h。3. ?傾去染色液，用約50 ml 固定液沖
蛋白質凝膠染色法實驗
實驗步驟總蛋白質的檢測1. 總蛋白質色度法染色簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀染法是可選擇的色度方法。如果需要對切下的蛋白質進行質譜分析，則首選不會引入共價蛋白