將大片段插入DNA導入哺乳動物細胞和胚胎實驗1
基本方案1 通過質體融合將完整的 YAC 導入哺乳動物細胞實驗材料靶細胞：培養的貼壁生長的哺乳動物細胞帶有以neo（G418-resistance)為篩選標記的 YAC 的酵母菌株試劑、試劑盒山梨糖醇SCE 溶液ST 溶液EDTA小鼠 Cot-1 DNA儀器、耗材SD dropout 培養基和培養板合適的放射性標記的探針直徑 100 mm 培養皿和 24 孔組織培養板15 ml 帶蓋玻璃培養管恒溫箱離心機相差顯微鏡水浴鍋實驗步驟......閱讀全文
分離小鼠胚胎實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 胚胎是懷孕最初兩個月內的幼體。囊胚、胚的早期發育和胚胎發育是一個連續過程。在體節時期，三個胚層都發生了變化。外胚層在背部中線凹陷成溝，稱神經溝，溝的兩岸稱神經脊。神經脊逐漸接近、愈合，致使神經演變為縱貫胚體的神經管。神經管和神經
分離小鼠胚胎實驗
實驗方法原理 無菌條件下切除孕鼠（已知懷孕時間）子宮，分離胚胎。實驗材料 DBSS試劑、試劑盒 70%乙醇儀器、耗材 培養皿尖鑷子尖剪刀超凈工作臺本生燈實驗步驟 1. 交配。將分籠的雄鼠和雌鼠合籠進行交配，雌鼠 3 天后可進入動情期，此時交配的成功率最高。這一過程可以有計劃地進行，使胚胎在適宜的時間
分離小鼠胚胎實驗
分離小鼠胚胎可以用于：（1）體外培養小鼠胚胎，摸索適宜培養條件。（2）使用胚胎進行發育生物學研究。實驗方法原理胚胎是懷孕最初兩個月內的幼體。囊胚、胚的早期發育和胚胎發育是一個連續過程。在體節時期，三個胚層都發生了變化。外胚層在背部中線凹陷成溝，稱神經溝，溝的兩岸稱神經脊。神經脊逐漸接近、愈合，致使神
組織和胚胎固定及包埋實驗
實驗材料器官試劑、試劑盒多聚甲醛石蠟已傳二甲苯儀器、耗材玻璃瓶培養箱巴斯德吸管包埋提環包埋模具實驗步驟1. ?將已解剖的器官或胚胎置于寫有標簽的20 ml 螺口玻璃小瓶中（經硅烷化處理的玻璃瓶專用于小量樣品的處理），如入4℃新鮮配制的4%PFA，置4℃固定至所需時間止。?2. ?于60℃烘箱中熔化石
組織和胚胎固定及包埋實驗
實驗材料?器官試劑、試劑盒?多聚甲醛石蠟已傳二甲苯儀器、耗材?玻璃瓶培養箱巴斯德吸管包埋提環包埋模具實驗步驟 ? 將已解剖的器官或胚胎置于寫有標簽的20 ml 螺口玻璃小瓶中（經硅烷化處理的玻璃瓶專用于小量樣品的處理），如入4℃新鮮配制的4%PFA，置4℃固定至所需時間止。2.? 于60℃烘箱中熔化
Nature頭條－|－日本批準人類動物胚胎實驗
在東京大學和加利福尼亞州斯坦福大學領導團隊的Hiromitsu Nakauchi計劃在小鼠和大鼠胚胎中培養人類細胞，然后將這些胚胎移植到替代動物體內。 Nakauchi的最終目標是生產具有人體細胞的器官，最終可以移植到人體中。 直到今年3月，日本明確禁止超過14天的含有人體細胞的動物胚胎的生長
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
原代細胞培養可應用于：（1）分子生物學；（2）細胞生物學；（3）遺傳學；（4）免疫學；（5）腫瘤學；（6）病毒學等領域。實驗方法原理原代細胞培養，是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官，在體外培養，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物體內取出所需的組織（或器官），經胰酶消化，
小鼠胚胎干細胞培養實驗
體外分化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇（第3步），在有bFGF存
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養，是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官，在體外培養，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物
小鼠胚胎干細胞培養實驗
實驗方法原理 胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇（第3步），在有bFGF存在的情況下擴增（第4步）并最終分化在第5步。細胞全程培養在37℃，5％CO2，100％濕度條件下。一般體外誘導向神經細胞方向分化，也可以采用低濃度的RA進
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養，是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官，在體外培養，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物
小鼠胚胎干細胞培養實驗
體外分化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇（第3步），在有bFGF存
人胚胎干細胞:衍生與培養實驗—由hES細胞產生胚胎樣小體
實驗步驟方 案 2. 14 由 h E S 細 胞 產 生 胚 胎 樣 小 體試劑與材料無菌或無菌制備□ 生 長 于 M E F s 之上的未分化的 h E S 細胞集落□ 加樣器，設置在 50ul□ 超 低 附 著 力 的 P e tri 培 養 皿（特 殊 包 被 過 的 皿 ，可 防 止 細
英多家實驗室秘密進行人獸雜交胚胎實驗
英國華威大學研究中心是秘密進行人獸雜交的實驗室之一 胚胎干細胞實驗雖然具有很高的醫療價值，但也由于倫理問題而飽受爭議。英國《每日郵報》7月23日報道，有關英國多家實驗室正在進行人獸雜交胚胎干細胞實驗的新聞于近日曝光，在政界和學界引起強烈反響。制造150多個雜交胚胎 根據《每日郵報
從果蠅胚胎中純化核心組蛋白實驗
實驗方法原理 實驗材料 0～12 h 果蝸胚胎 試劑、試劑盒 脫色洗液胚胎洗液緩沖液 B緩沖液 ANaOH CaCl2 EDTA SDSNaCl氯仿 異戊醇T50E4 緩沖液核心組蛋白儲存液 儀器、耗材 羥磷灰石樹脂BCA 分析試劑盒細尼龍網Yamato LH－21 勻漿器Beckman
從果蠅胚胎中純化核心組蛋白實驗
實驗材料0～12 h 果蝸胚胎試劑、試劑盒脫色洗液胚胎洗液緩沖液 B緩沖液 ANaOHCaCl2EDTASDSNaCl氯仿 異戊醇T50E4 緩沖液核心組蛋白儲存液儀器、耗材羥磷灰石樹脂BCA 分析試劑盒細尼龍網Yamato LH－21 勻漿器Beckman 超速離心機MWCO 透析管實驗步驟1.
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟
一般培養-保持胚胎干細胞處于未分化狀態 培養基 細胞復蘇 凍存細胞 明膠包被 細胞傳代 體外分化 培養基 包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板（使用或不使用蓋玻片） 體外分化方法 注：以下培養針對于小鼠的R1胚胎干細胞系，其它胚胎
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟
1、一般培養——保持胚胎干細胞處于未分化狀態?培養基細胞復蘇凍存細胞明膠包被細胞傳代?2 、體外分化?培養基：包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板（使用或不使用蓋玻片）?體外分化方法?注：以下培養針對于小鼠的R1胚胎干細胞系，其它胚胎干細胞的培養可以參考。不過人的胚胎干細胞培養不可以采用下面的pr
早期胚胎培養及形態學觀察實驗
實驗方法原理雞胚胎發育可分為兩個階段：成蛋階段的發育與成雛階段的發育。1、胚胎在卵形成過程中的發育即母體內的發育，是成蛋階段的發育。這個階段的發育過程是：受精卵→卵裂→囊胚期→原腸期。當胚胎發育到原腸期時，已分化形成內胚層和外胚層，從外觀上看形如一個圓盤狀體即為胚盤，當卵排出體外，因溫度下降，胚胎生
早期胚胎培養及形態學觀察實驗
實驗方法原理 雞胚胎發育可分為兩個階段：成蛋階段的發育與成雛階段的發育。1、胚胎在卵形成過程中的發育即母體內的發育，是成蛋階段的發育。這個階段的發育過程是：受精卵→卵裂→囊胚期→原腸期。當胚胎發育到原腸期時，已分化形成內胚層和外胚層，從外觀上看形如一個圓盤狀體即為胚盤，當卵排出體外，因溫度下降，胚胎
海洋無脊椎動物胚胎的培養設備實驗
培養胚胎用玻璃器具和塑料器具的處理 試劑、試劑盒 硝酸 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?EDTA ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
海洋無脊椎動物胚胎的培養設備實驗
培養胚胎用玻璃器具和塑料器具的處理 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 硝酸 EDTA
海洋無脊椎動物胚胎的培養設備實驗
試劑、試劑盒 硝酸EDTA蒸餾水 儀器、耗材 玻璃器具 實驗步驟 一、胚胎學玻璃器具的酸洗 1. 將需洗滌的玻璃器具放在到防煙塵蓋的大容器中。 2. 小心加入硝酸，完全覆蓋玻璃器具。 3. 浸泡過夜。 4. 第二天早上，用鑷子小心取出玻璃器具并放入新容器內
實驗室中構建人類早期胚胎樣結構
人造囊胚。圖片來源：UT Southwestern ? 美國得克薩斯大學達拉斯西南醫學中心研究人員領銜的團隊成功用人多能干細胞分化誘導出人類早期胚胎樣結構。該結構與人囊胚期胚胎具有類似的結構，能正確表達相應的基因與
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟（四）
第3步--ITSFn培養基在最少量培養基中選擇神經前體細胞1．在胚狀體接種在組織培養皿一天后將培養基換成ITSFn培養基2．并非所有胚狀體在這一時期都已經發生粘附，因此在移除培養基時要小心謹慎以使大部分胚狀體留在培養皿內。3．保持細胞在ITSFn中培養大約10天，根據需要更換培養基--大約每隔一天。
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟（一）
一般培養-保持胚胎干細胞處于未分化狀態培養基細胞復蘇凍存細胞明膠包被細胞傳代體外分化培養基包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板（使用或不使用蓋玻片）體外分化方法注：以下培養針對于小鼠的R1胚胎干細胞系，其它胚胎干細胞的培養可以參考。不過人的胚胎干細胞培養不可以采用下面的protocol，需要用專用
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟（二）
Geltin（明膠）包被準備500ml 0.1％geltin溶液1．將0.5 g明膠溶解在500ml無鈣鎂的PBS中（50－65℃水浴15～30分鐘）。2．最好在溶液沒有冷卻的情況下通過0.22 μm濾膜過濾，貯存在4℃。包被培養板或培養皿1．加入足量的明膠溶液覆蓋培養平面（15 cm培養皿加2ml
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟（三）
ITSFn and N3（分化培養基）：配制一20×不含DMEM/F12的溶液。分裝在15ml 離心管中，（稀釋為1×，ITSFn 7.05ml，N3 12.55ml），0.2μm濾膜過濾，貯存在-20℃。將該溶液加入DMEM/F12中制備培養基，貯存于4℃。 貯存液??????????DMEM(高
雞胚胎成肌細胞的分離和培養實驗
細胞培養物的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 HBSS 胰酶溶液 膠原溶液
雞胚胎成肌細胞的分離和培養實驗
細胞培養物的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 HBSS 胰酶溶液 膠原溶液