單抗糖基化調控之控制參數篇(上)
關鍵質量參數是單抗仿制藥研發的標桿，包括糖基化修飾、聚體、電荷異質性等，其中如糖基化修飾對單抗的生物活性、免疫原性、藥物代謝動力學、構象、穩定性及溶解度具有重要的影響。細胞培養過程中細胞所處環境，如pH、溫度、滲透壓、溶氧等參數會影響到單抗糖基化表現，本文就文獻中對滲透壓、培養時間和溶氧等培養控制參數，以及溫度、剪切力和培養模式對糖基化影響的研究進行了簡要總結。 滲透壓和培養時間 體系中滲透壓的調節可以通過向基礎培養基或補料培養基中加入NaCl實現，從而考察滲透壓對細胞生長、蛋白產量及質量的影響。Efren Pacis團隊將基礎培養基滲透壓分別配制為300、330、360和400 mOsm/kg，補料培養基的滲透壓為750和1250 mOsm/kg，并取不同時間段的樣品進行檢測，進而就滲透壓及培養時間對蛋白糖基化的影響進行研究，實驗過程中采用的為CHO細胞。 以滲透壓為300 mOsm/kg的基礎培養基和750 mO......閱讀全文
為何要關注抗體藥物的糖基化修飾？
在眾多的蛋白質翻譯后修飾中，糖基化修飾是最重要和最復雜的修飾之一，也是評價抗體的關鍵質量屬性之一。單抗藥物功能的實現與其糖基化修飾密切相關，糖基化修飾會影響蛋白的性能，如構象、穩定性、溶解度、藥物代謝動力學、活性及免疫原性。本文中，筆者就糖基化及其對抗體藥物的穩定性/半衰期、安全性及生物活性進
研究抗體藥物的糖基化修飾為何重要？
在眾多的蛋白質翻譯后修飾中，糖基化修飾是最重要和最復雜的修飾之一，也是評價抗體的關鍵質量屬性之一。單抗藥物功能的實現與其糖基化修飾密切相關，糖基化修飾會影響蛋白的性能，如構象、穩定性、溶解度、藥物代謝動力學、活性及免疫原性。本文中，筆者就糖基化及其對抗體藥物的穩定性/半衰期、安全性及生物活性進行
微生物所在PD1糖基化修飾與抗體藥物作用機制中獲進展
近年來，學界在以PD-1/PD-L1為靶點的單克隆抗體治療在腫瘤免疫治療中獲進展。PD-1是一個高度糖基化的免疫分子，腫瘤的發生發展常伴隨糖基化修飾的異常，且PD-1的N-糖基化位點在人群中存在一定多態性。因此，研究PD-1的糖基化修飾及其對抗體藥物作用的影響，對于理解以PD-1為靶點的抗體藥物
糖肽多肽糖基化修飾
通過化學鍵將單糖（如葡萄糖、半乳糖）或者多糖連接到多肽上的過程，我們將其稱之為多肽糖基化修飾，通過糖基化修飾后得到的多肽，我們稱之為糖肽（Glycopeptides）；糖肽對膜蛋白功能常常有很重要的影響，對特異的生物學功能起介導作用，比如：對細胞具有保護、穩定、組織及屏障等多方面作用；可作為外源性受
糖基化修飾過程
一、 糖基化修飾蛋白質的糖基化是一種最常見的蛋白翻譯后修飾，是在糖基轉移酶作用下將糖類轉移至蛋白質和蛋白質上特殊的氨基酸殘基形成糖苷鍵的過程。研究表明70%人類蛋白包含一個或多個糖鏈1%的人類基因組參與了糖鏈的合成和修飾。二、糖基化修飾功能在參與糖基化形成的過程中,糖基轉移酶和糖苷酶扮演了重要的角色
離子色譜讓糖基化變簡單
糖基化分析的重要性單抗藥物是近年來發展最快的藥物品種，在整個藥物市場產值中已經占有超過12%的份額，超過1200億美元。目前，全球已經批準的單克隆抗體藥物超過了80個，年銷售額增長率超過30%，主要應用于惡性腫瘤、自身免疫性疾病、炎癥性疾病等治療領域。國內各大醫藥企業也聚焦于單抗藥物的研發。單克隆抗
ADP糖基化修飾是什么
組蛋白的修飾通常有①甲基化②乙酰基化③磷酸化④ADP核糖基化等修飾形式。
科學家在PD1阻斷型抗體藥物在腫瘤免疫治療中取得進展
近年來，PD-1/PD-L1阻斷型抗體藥物在腫瘤免疫治療中取得了進展，目前已經批準了多個抗體藥物在黑色素瘤、非小細胞肺癌及霍奇金淋巴瘤等多種適應癥中的臨床應用。中國科學院微生物研究所研究員嚴景華和高福團隊多次合作，解析了全球上市的第一個PD-1抗體藥物nivolumab（Opdivo）及PD-L
簡述N糖基化的修飾
在內質網中糖鏈的修飾包括切除末端的3分子葡萄糖和b支的末端甘露糖，進入內質網后在各種糖基轉移酶和糖苷酶的剪切和加工后最終形成復雜型，雜交型和高甘露糖型的N-糖鏈。在植物中復雜糖和雜交糖第二個N-乙酰葡糖胺還連接一個木糖，形成植物特有的復雜N-糖的糖型。
生物物理所在膀胱癌標志物和靶向干預研究中取得進展
近日，腫瘤學研究期刊Clinical Cancer Research 雜志在線發表了中國科學院生物物理研究所范祖森研究組題為BCMab1, a monoclonal antibody against aberrantly glycosylated Integrin a3b1, has poten
單抗糖基化調控之控制參數篇
關鍵質量參數是單抗仿制藥研發的標桿，包括糖基化修飾、聚體、電荷異質性等，其中如糖基化修飾對單抗的生物活性、免疫原性、藥物代謝動力學、構象、穩定性及溶解度具有重要的影響。細胞培養過程中細胞所處環境，如pH、溫度、滲透壓、溶氧等參數會影響到單抗糖基化表現，本文就文獻中對滲透壓、培養時間和溶氧等培養控
單抗糖基化調控之參數篇(下)
關鍵質量參數是單抗仿制藥研發的標桿，包括糖基化修飾、聚體、電荷異質性等，其中如糖基化修飾對單抗的生物活性、免疫原性、藥物代謝動力學、構象、穩定性及溶解度具有重要的影響。細胞培養過程中細胞所處環境，如pH、溫度、滲透壓、溶氧等參數會影響到單抗糖基化表現，本文從pH著手就文獻中不同pH設置及調節p
單抗糖基化調控之參數篇（二）
關鍵質量參數是單抗仿制藥研發的標桿，包括糖基化修飾、聚體、電荷異質性等，其中如糖基化修飾對單抗的生物活性、免疫原性、藥物代謝動力學、構象、穩定性及溶解度具有重要的影響。細胞培養過程中細胞所處環境，如pH、溫度、滲透壓、溶氧等參數會影響到單抗糖基化表現，本文從pH著手就文獻中不同pH設置及調節pH
糖基化修飾的基本原理
一、 糖基化修飾 蛋白質的糖基化是一種最常見的蛋白翻譯后修飾，是在糖基轉移酶作用下將糖類轉移至蛋白質和蛋白質上特殊的氨基酸殘基形成糖苷鍵的過程。研究表明70%人類蛋白包含一個或多個糖鏈1%的人類基因組參與了糖鏈的合成和修飾。 二、糖基化修飾功能 在參與糖基化形成的過程中,糖基轉
糖基化修飾的基本原理
一、 糖基化修飾蛋白質的糖基化是一種最常見的蛋白翻譯后修飾，是在糖基轉移酶作用下將糖類轉移至蛋白質和蛋白質上特殊的氨基酸殘基形成糖苷鍵的過程。研究表明70%人類蛋白包含一個或多個糖鏈1%的人類基因組參與了糖鏈的合成和修飾。二、糖基化修飾功能在參與糖基化形成的過程中,糖基轉移酶和糖苷酶扮演了重要的角色
解析糖基化修飾及位點分析
經常聽到糖基化修飾，今天帶大家一探究竟。什么是糖基化修飾呢？糖基化是在糖基轉移酶的控制下，蛋白質或脂質附加上糖類的過程，發生于內質網和高爾基體。糖基化修飾是一類非常重要的翻譯后修飾，大部分膜蛋白和分泌蛋白均為糖蛋白，糖基化修飾不僅影響蛋白質的空間構象、活性、運輸和定位，同時在信號轉導、分子識別，
糖基化修飾的基本原理
一、 糖基化修飾 蛋白質的糖基化是一種最常見的蛋白翻譯后修飾，是在糖基轉移酶作用下將糖類轉移至蛋白質和蛋白質上特殊的氨基酸殘基形成糖苷鍵的過程。研究表明70%人類蛋白包含一個或多個糖鏈1%的人類基因組參與了糖鏈的合成和修飾。 二、糖基化修飾功能 在參與糖基化形成的過程中,糖基轉
單抗糖基化調控之控制參數篇(上)
關鍵質量參數是單抗仿制藥研發的標桿，包括糖基化修飾、聚體、電荷異質性等，其中如糖基化修飾對單抗的生物活性、免疫原性、藥物代謝動力學、構象、穩定性及溶解度具有重要的影響。細胞培養過程中細胞所處環境，如pH、溫度、滲透壓、溶氧等參數會影響到單抗糖基化表現，本文就文獻中對滲透壓、培養時間和溶氧等培養
糖蛋白糖基化
已上市的蛋白藥物中，治療性糖蛋白藥物數量眾多，糖基化是最常見的蛋白翻譯后修飾。2020版《中國藥典》第一增補版中，正式發布9405糖蛋白的糖基化分析指導原則。賽默飛能為糖基化分析提供業內最全方案，可根據糖蛋白的復雜性、與藥物安全有效的相關性以及生產監控策略的總體設計等，為糖基化提供完整糖蛋白、糖
單抗藥物的分子質量、氨基酸序列以及糖基化位點鑒定－一
1. 前言單抗藥物主要是由兩條重鏈和兩條輕鏈通過鏈內和鏈間二硫鍵以及非共價鍵組成，分子質量大約在 150 kD 左右，每條重鏈和輕鏈在 N 端都包含一個可變區域，在 C 端都包含一個恒定區域，并且在每條重鏈上還存在一個 N 糖基化位點，該位點含有不同的糖鏈結構，如圖 1 所示。目前，在生
單抗藥物的分子質量、氨基酸序列以及糖基化位點鑒定－三
經過 Protein Deconvolution 2.0 軟件去卷積處理之后的單抗分子質量分布圖（圖 3），根據單抗的氨基酸序列理論分子質量進行計算，將觀察到的質譜峰進行歸屬，可以初步推斷該單抗藥物存在多種形式的糖鏈結構，主要包括 G0、G0F、G1F 和 G2F，該結論與常見的單抗組成基本
單抗藥物的分子質量、氨基酸序列以及糖基化位點鑒定－二
質譜分析條件：具體見表 4；?表 3. 氨基酸序列測定的色譜分析條件表 4. 氨基酸序列測定的質譜分析條件?2.2.3 數據分析方法采用 Proteome Discoverer 1.3 軟件對原始譜圖進行數據庫搜索，具體搜庫參數為：包含單抗氨基酸序列的數據庫；半胱氨酸（C）烷基化（+57.021
蛋白質的糖基化修飾主要分為
特征 N-連接 O-連接合成部位 粗面內質網 主要在高爾基體合成方式 來自同一個寡糖前體 一個個單糖加上去與之結合的氨基酸殘基 天冬酰氨 絲氨酸、蘇氨酸、羥脯、羥賴最終長度 至少5個糖殘基 1-4個糖殘基第一個糖殘基 N-乙酰葡萄糖胺 N-乙酰半乳糖胺大概清楚了吧！ 蛋白質糖基化是一種蛋白質修飾，作
干貨分享——揭開糖基化修飾的神秘面紗
相對于磷酸化、乙酰化修飾等相對較為簡單的PTM來講，糖基化修飾稍顯復雜和多樣，各位看官對糖基化修飾的知識了解多少呢？是否又對O糖、N糖傻傻分不清楚呢？沒關系，今天小編帶您一起走進糖的世界，一起揭開糖基化修飾的神秘面紗。 糖基化修飾主要發生在內質網和高爾基體。主要過程是將糖基在糖基轉移酶作用下將
DELFIA經典技術應用于單抗研發及細胞治療（二）
在親和力篩選的基礎上，研究利用DELFIA EuTDA-based cytotoxicity assay（貨號AD0116）在細胞水水平探究變體對ADCC的提升。以不同FcγRIIIa基因型的PBMCs為效應細胞，Her2+ SkBr3為靶細胞，研究證明改造的變體能有效提升ADCC（2-3個
維迪西妥單抗，我國首個原創性抗體偶聯藥物新藥
6月21日，中國國家藥品監督管理局（NMPA）藥品審評中心（CDE）公示，榮昌生物維迪西妥單抗（愛地希，RC48）新適應癥獲CDE擬納入突破性治療品種，用于既往接受過曲妥珠單抗和紫杉類藥物治療的HER2陽性存在肝轉移的晚期乳腺癌患者。 維迪西妥單抗是一種抗HER2抗體-藥物偶聯物(ADC)
ADC－單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...（三）
經過 Protein Deconvolution 2.0 軟件去卷積處理之后的單抗分子量分布圖如下所示（圖 4），根據單抗的氨基酸理論序列分子量進行計算，將觀察到的質譜峰進行歸屬，從圖中我們觀察到，該 ADC 單抗分子之間存在 956 Da 左右的質量增加，由此推斷該單抗分子結合了不同數目的
ADC－單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...（二）
2.1.3 數據分析方法采用 Protein Deconvolution 2.0 軟件對原始質譜圖進行去卷積處理，得到完整的蛋白質分子量信息。?2.2 氨基酸序列、糖基化位點和 ADC 藥物結合位點測定?2.2.1 儀器和試劑質譜儀器：Q-Exactive（賽默飛世爾科技，美國）；色譜儀器：Acce
ADC－單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...（四）
3.2 糖基化位點確定ADC 單抗蛋白與其他單抗蛋白相同，也都包含 N-糖基化修飾，一般發生在保守序列 NXS 或 NXT 中（X 為除脯氨酸外的任意氨基酸）。在糖鏈完整的情況下，直接進行 trypsin 酶解，我們在搜庫時進行 G0F 糖基化可變修飾設定，可以直接獲得該 N 糖基化位點：重
ADC－單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...（一）
ADC 單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以及ADC 藥物結合位點鑒定1. 前言單克隆抗體藥物是具有高度特異性的靶向藥物，能夠特異性作用于腫瘤細胞，被譽為治療惡性腫瘤的“生物導彈”。ADC 抗體藥，則是在抗體蛋白的特定天然氨基酸上非定點偶聯具有抗腫瘤作用的化療藥物（或稱小分子藥物），以增加