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    HPLC基本維護故障診斷交流講座

    1.判斷儀器脫氣機是否正常:打開purge閥,流速設為2ml/min,然后提起過濾頭,讓體系進一些空氣,再放下過濾頭,看氣泡是否會減少來判斷脫氣機是否起作用; 2. 溶劑過濾頭不可超聲清洗,可用35%硝酸浸泡1小時后再用溶劑清洗; 3. EDTA、乙二胺四乙酸等會對液相柱的不朽鋼產生腐蝕;四氯化碳與2-異丙醇、四氫呋喃不可混合使用,但可單獨使用; 4. 溶劑的使用:每兩天更換或重新過濾溶劑(尤其是水,需要每天更換);流動相過濾是為了去除微生物,一般水要放在棕色瓶中; 5. 判斷purge閥的濾芯是否需更換:用水作流動相時,流速為5ml/min時,正常泵壓應為0bar(若打開purge閥時,泵壓超過10bar時需更換濾芯); 6. 若用非極性溶劑作流動相,則需更換泵中起密封作用的“黑草帽”(適合反相的材料為石墨+聚四氟乙烯,而適合正相的為 ),而且必須一對同時更換,否則損壞更快; 7. 密封墊的沖洗:......閱讀全文

    水質對HPLC的影響

    高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)是一種有效可靠的技術,目前已成為許多實驗室研究的重要工具。HPLC最常見的一個問題就是溶劑中的污染物對分析結果的影響。1、顆粒顆粒可以損壞泵和注射器。顆粒也可以堵塞色譜柱并且熔化它,這會導致回

    HPLC直接液體導入接口

    直接液體導入接口(DLI)是將HPLC的流動相沿著進樣桿流動,然后通過一個直徑為3-5μm的針孔,使液體射入質譜計的CI離子源中。僅僅大約10-50μl/min的液流,就如小液滴流一樣可進入離子源(是傳統HPLC流量的1%-5%),否則質譜計的泵系統將被損傷。當它通過一個加熱的去溶劑區域時,溶劑蒸發

    HPLC良好的連接方略

    毛細管對高效液相色譜分離的影響 若高效液相色譜 (HPLC) 系統采用了不適當的連接方式或者應用不正確的毛細管,均可能導致均可能導致不良的峰擴寬,色譜柱的最佳分離效率就更無從談起。甚至還可能發生使用的柱子越細,其洗脫峰的擴寬反而越大的情況。本文將詳細介紹毛細管對高效液相色譜分離的影響,

    HPLC基礎知識(七)

    V.HPLC應用一、樣品測定1.流動相比例調整:由于我國藥品標準中沒有規定柱的長度及填料的粒度,因此每次新開檢新品種時幾乎都須調整流動相(按經驗,主峰一般應調至保留時間為6~15分鐘為宜)。所以建議第一次檢驗時請少配流動相,以免浪費。弱電解質的流動相其重現性更不容易達到,請注意充分平衡柱。2.樣品配

    HPLC的故障及處理

    (一) 保留時間變化1.柱溫變化 柱恒溫。2.等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動相平衡柱。3.緩沖液容量不夠 用>25mmol/L的緩沖液。4.柱污染 每天沖洗柱。5.柱內條件變化 穩定進樣條件,調節流動相。6.柱快達到壽命 采用保護柱。(二) 保留時間縮短1.流速增加 檢查泵,重新

    HPLC基礎知識(五)

    4.與檢測器有關的故障及其排除1)流動池內有氣泡?? 如果有氣泡連續不斷地通過流動池,將使噪音增大,如果氣泡較大,則會在基線上出現許多線狀“峰”,這是由于系統內有氣泡,需要對流動相進行充分的除氣,檢查整個色譜系統是否漏氣,再加大流量驅除系統內的氣泡。如果氣泡停留在流動池內,也可能使噪音增大,可采

    什么是HPLCUV

    高效液相色譜HPLC紫外檢測器UV用紫外檢測器的高效液相色譜

    HPLC如何計算樣品含量

    你是用什么樣的定量方法呢?如果面積歸一化法的話就直接用你的待檢峰面積除上你的樣品所有峰面積和再乘100就是你的樣品中待檢成分的百分比濃度了。如果是內標或外標法應該要進標準溶液

    HPLC方法開法哪些事!

      開發方法或方法驗證時最重要的一步就是流動相的選擇和比例的調整。我想大家肯定都遇到過分離度不好或峰形不好的情況,大部分原因就是流動相沒調好,那到底該怎么調,怎么選擇呢?看完下文可能你就知道答案了。  01、由強到弱  一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗,這樣可以很快地得到分離

    HPLC流動相如何選擇

    對于一般的反相柱,用甲醇/水或乙腈/水作流動相。甲醇/水作流動相時,如果得到的色譜圖出的峰分的不完全,可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分離效果又不錯,可加大甲醇的比例,可使峰出的早一些。對于一些難分離的物質,要選用乙腈/水作流動相。由于高效液相色譜中流動相是液體,它對組分有親和力,并參與固定相對

    HPLC的故障及處理

    (一) 保留時間變化?1.柱溫變化 柱恒溫。?2.等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動相平衡柱。?3.緩沖液容量不夠 用>25mmol/L的緩沖液。?4.柱污染 每天沖洗柱。?5.柱內條件變化 穩定進樣條件,調節流動相。?6.柱快達到壽命 采用保護柱。?(二) 保留時間縮短?1.流速增

    純水對于HPLC的影響

    高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography ?HPLC)是一種有效可靠的技術,目前已成為許多實驗室研究的重要工具。HPLC最常見的一個問題就是溶劑中的污染物對分析結果的影響。顆粒顆粒可以損壞泵和注射器。顆粒也可以堵塞色譜柱并且熔化它,這會導致回壓增大

    水質對HPLC的影響

    高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)是一種有效可靠的技術,目前已成為許多實驗室研究的重要工具。HPLC最常見的一個問題就是溶劑中的污染物對分析結果的影響。顆粒顆粒可以損壞泵和注射器。顆粒也可以堵塞色譜柱并且熔化它,這會導致回壓增

    HPLC流動相如何選擇

    對于一般的反相柱,用甲醇/水或乙腈/水作流動相。甲醇/水作流動相時,如果得到的色譜圖出的峰分的不完全,可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分離效果又不錯,可加大甲醇的比例,可使峰出的早一些。對于一些難分離的物質,要選用乙腈/水作流動相。

    HPLC-故障及排除方法

    診狀 可能的原因 解 決 方 法 ( 一 ) 保留時間變化 1. 柱溫變化柱恒溫2. 等度與梯度間未能充分平衡至少用 10 倍柱體積的流動相平衡柱3. 緩沖液容量不夠用 >25mmol/L 的緩沖液4. 柱污染每天沖洗柱5. 柱內條件變化穩定進樣條件 , 調節流動相6. 柱快達到壽命采用保護柱( 二

    Waters-HPLC故障排除指南

    Waters公司的,HPLC故障排除指南1. Column Life-Time?2. Variable Retention Times???????3. Drifting Retention Times??4. Column-to-Column and Batch-to-Batch? Reprodu

    HPLC級環己烷-促銷

    CAEQ-4-011556-4000? HPLC級環己烷?CYCLOHEXANE (UV-IR-HPLC)報價:520元/瓶整箱起訂促銷價為420元/瓶,4瓶/箱促銷時間:12月6日至12月31日

    HPLC與FPLC的異同

      FPLC全稱為快速蛋白液相色譜(Fast protein liquid chromatography),其原理與GX液相色譜理論類似,是由經典的液體柱層析引入氣相色譜理論,并且對相體進行了改革,配用高壓輸液泵,采用高靈敏檢測器、梯度洗脫裝置、自動收集裝置和微機等發展起來的現代液相色譜。  近些年

    如何提高HPLC柱效?

    要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。?以下介紹了幾種國際上流行的測量和計算柱效值的方法。?1、提高液相色譜柱柱效的方法要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。?(1)降低移動相的流速,但會使分析時間延長。?(2)減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。?(3)減小固定相的顆粒度,但不能

    HPLC基礎知識(三)

    3.柱外效應速率理論研究的是柱內峰展寬因素,實際在柱外還存在引起峰展寬的因素,即柱外效應(色譜峰在柱外死空間里的擴展效應)。色譜峰展寬的總方差等于各方差之和,即:??? σ2=σ2柱內+σ2柱外+σ2其它柱外效應主要由低劣的進樣技術、從進樣點到檢測池之間除柱子本身以外的所有死體積所引起。為了減少柱外

    HPLC-故障及排除方法

      詳細說明:   診狀 可能的原因 解 決 方 法 一 保留時間變化 1.柱溫變化 柱恒溫 2.等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動相平衡柱 3.緩沖液容量不夠 用>25mmol/L的緩沖液 4.柱污染 每天沖洗柱 5.柱內條件變化 穩定進樣條件,調節流動相 6.柱快達到壽命 采

    HPLC保留時間限制多少?

    HPLC只是分離的手段,如果保留時間太短,說明被分離物質在固定相上面的保留較差,就有可能與不保留的雜質混在一起而干擾待測物的測定,當然,這只是在使用UV、ELSD等特異性不是很強的檢測器時的常見情況,但是如果使用熒光、質譜等特異性較強的檢測器時,這種干擾會被大大降低或者排除。保留時間與使用的液相色譜

    HPLC基礎知識(一)

    鑒于HPLC應用在藥品分析中越來越多,因此每一個藥品分析人員應該掌握并應用HPLC。I.概論???? 一、液相色譜理論發展簡況色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時,由于與固定相(stationaryphase)發生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和

    HPLC基礎知識(二)

    3.離子交換色譜法 固定相是離子交換樹脂,常用苯乙烯與二乙烯交聯形成的聚合物骨架,在表面未端芳環上接上羧基、磺酸基(稱陽離子交換樹脂)或季氨基(陰離子交換樹脂)。被分離組分在色譜柱上分離原理是樹脂上可電離離子與流動相中具有相同電荷的離子及被測組分的離子進行可逆交換,根據各離子與離子交換基團具有不同的

    HPLC流動相如何選擇

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    純水對于HPLC的影響

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    基于溫度梯度的HPLC分析——溫度梯度淋洗的HPLC方法

    在近年來所開發的一系列液相色譜方法中,溫度梯度淋洗方法有著獨特的應用,尤其是在要求以純水為流動相的色譜分析中。本文介紹了如何將已存在保留時間的模型發展成為溫度梯度淋洗的HPLC方法。 在高效液相色譜(HPLC)的方法開發中,原則上都是采用反復試驗法來建立的,實驗室用戶根據自己的經驗來改變一

    HPLC基礎知識教程(七)

    ?幾種檢測器的主要性能全屏顯示表格UV熒光安培質譜蒸發光散射信號吸光度熒光強度電流離子流強度散射光強噪音10-510-310-9線性范圍105104105寬選擇性是是是否否流速影響無無有無溫度影響小小大小

    HPLC基礎知識教程(十一)

    全屏顯示表格硅膠氧化鋁苯乙烯-二乙烯苯甲基丙烯酸酯耐有機溶劑++++++++++適用pH范圍++++++++抗膨脹/收縮++++++++耐壓+++++++++表面化學性質+++++++++效能+++++++注:+++好 ++一般 +差

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