色譜及質譜常用定量方法
色譜及質譜檢測中往往需要對目標物質進行定量,目前使用較多的定量方法有面積歸一化法、外標法、內標法、標準加入法等。 定量分析基本要求: 1、純物質做標準 2、被定量組分峰要與其它峰達到基線分離(質譜可不滿足) 3、符合定性參數要求 4、選擇合適的定量方法 定量分析基本公式: 在某些條件限定下,被測組分濃度與檢測器的響應值成正比關系。(蒸發光散射檢測器濃度與峰面積不成線性,分別取對數后成線性) Ci=fiAi或Ci=fiHi Ci:組分濃度 fi:響應因子(與組分的理化性質和檢測器的性質有關) Ai:組分響應面積 Hi:組分響應高度 實際修飾公式:Y=aX+b 一、面積歸一化法 把所有出峰的組分含量之和按100%計的定量方法,稱為歸一化法。當樣品中所有組分均能流出色譜柱,—并在檢測器上都能產生信號的樣品,可用歸一化法定量,其中組分i的質量分數可按式計算: 歸一化法定量的主要問題是質量校正因子的測定......閱讀全文
色譜及質譜常用定量方法
色譜及質譜檢測中往往需要對目標物質進行定量,目前使用較多的定量方法有面積歸一化法、外標法、內標法、標準加入法等。 定量分析基本要求: 1、純物質做標準 2、被定量組分峰要與其它峰達到基線分離(質譜可不滿足) 3、符合定性參數要求 4、選擇合適的定量方法 定量分析基本公式: 在某些條
質譜定量方法
外標法1.單點校正法單點校正法實際上是利用原點作為標準曲線上的另一個點,當方法存在系統誤差時(即,標準工作曲線不通過原點),單點校正法的誤差較大。?以純溶劑配制標準工作溶液GB/T21317-2007動物源性食品中四環素類獸藥殘留量檢測方法“根據樣液中被測四環素類獸藥殘留的含量情況,選定峰高相近的標
質譜定量的兩種方法
說過了為什么質譜可以定量,下面我們來看看具體的定量方法。常用的定量方法有兩種,外標法與內標法。外標法用已知量的標準樣品A和未知量的待測樣品A分別進行實驗;我們會得到以下三個信息:標準樣品的量(已知);標準樣品的信號強度;待測樣品的信號強度。(假設樣品的響應=常數*濃度,從這三個信息即可算出待測樣品的
高效液相色譜法常用的定量方法內標法
內標法 按品種正文項下的規定,精密稱(量)取對照品和內標物質,分別配成溶液,各精密量取適量,混合配成校正因子測定用的對照溶液。取一定量進樣,記錄色譜圖。測量對照品和內標物質的峰面積或峰高,按下式計算校正因子: 式中 AS為內標物質的峰面積或峰高; AR為對照品的峰面積或峰高; cs為內標
色譜定量方法:標準加入法內標法外標法
色譜分析的重要作用之一是對樣品定量。而色譜法定量的依據是:組分的重量或在載氣中的濃度與檢測器的響應信號成正比。常見定量分析方法分為面積歸一化法、內標法、外標法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫過于內標法、外標法了。 以內標法為例,選一與欲測組分相近但能完全分離的組分做內標物(當然是樣品中沒有的組
色譜定量分析之內標法
? 內標法是色譜定量分析中是一種重要技術。使用內標法時,在樣品中加入一定量的標準物質,它可被色譜拄所分離,又不受試樣中其它組分峰的干擾,只要測定內標物和待測組分的峰面積與相對響應值,即可求出待測組分在樣品中的百分含量。 內標物的選擇 采用內標法定量時,內標物的選擇是一項十分重要的工作
氣相色譜和質譜聯哪個定性哪個定量
氣相色譜既可定性也可以定量,質譜儀是定性的,但是氣相色譜-質譜聯用儀就可以兩用
氣相色譜的內標法定量時,內標物需具備什么條件
色譜分析常用的定量方法:歸一化法、內標法和內加(增量)內標法、外標法。 1、面積歸一化法優點是簡便、準確,當操作條件變化時對結果影響較小,宜于分析多組分試樣中各組分的含量。但是試樣中所有組分必須全部出峰,因此,此法在使用中受到一定限制。 2、外標法是用純物質配成一系列不同濃度的標準溶液(或直接購
色譜質譜聯用
(1)氣相色譜-質譜聯用在色譜聯用儀中,氣相色譜-質譜(GC-MS)聯用儀是開發最早的色譜聯用儀器。由于從氣相色譜柱分離后的樣品呈氣態,流動相也是氣體,與質譜的進樣要求相匹配,最容易將這兩種儀器聯用。因此最早實現商品化的色譜聯用儀器就是氣相色譜-質譜聯用儀。現在小型臺式GC-MS已成為很多實驗室的常
色譜質譜聯用
色譜質譜聯用中最典型的應用為氣相色譜質譜法(Gas Chromatography-Mass Spectrometry, GC-MS)以及液相色譜質譜法(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry)。 其優勢在于通過色譜質譜的聯用,解決了質譜中如果離子之間質量
液相色譜質譜聯用分類方法
液相色譜質譜聯用儀類型有多種。1、按分析目的可分:實驗室液相色譜質譜聯用儀和工業液相色譜質譜聯用儀。2、按分析規模可分:小型液相色譜質譜聯用儀和大型液相色譜質譜聯用儀。3、按質量分析器的時空屬性可分:時間型液相色譜質譜聯用儀和空間液相色譜質譜聯用儀。4、按分辨率可分:低分辨液相色譜質譜聯用儀、中分辨
質譜相關的特殊定量細節
同位素稀釋前面內標法的介紹中我們可以發現,最理想的內標物既要和待測樣相同(具有相同的響應系數)又要不同(儀器可以區分二者的信號),這對矛盾的集合體就是同位素內標。由于不同同位素的化合物具有近似相同的物理化學性質,離子化時的響應通常也是相同的,而它們具有不同的質荷比m/z,即可在質譜中被區分出來。因此
質譜是怎樣做到定量的?
注:這里的定量指的是待分析物的含量質譜可以通過分子量信息定性(結構),但根據我的理解,質譜信號的強度是和離子化難易相關,并不能反應待分析物的含量(定量)? 作者:胡墨 1. 質譜信號強度與待分析物含量的關系?? 任何定量分析方法都需要建立實驗測量信號與待分析物的量的關系。很幸運的是,在質譜中,
質譜是怎樣做到定量的?
質譜信號的強度=粒子總數 x 離子化效率(就是你說的離子化難易程度)因此采用一系列極其蛋疼的方法測定或者至少能夠固定(以LCMSMS為例,就是優化電壓,噴霧角度,流動相組成比例,三氣的流量,基質的組成全部固定下來)特定方式下的離子化效率,質譜是可以用于定量的。舉個栗子,調諧好系統之后,你噴入1ppb
高效液相色譜法定量測定介紹內標法
采用不加校正因子的峰面積法。取供試品,按各品種項下規定的方法配制不含內標物質的供試品溶液,注入儀器,記錄色譜圖Ⅰ;再配制含有內標物質的供試品溶液,在同樣的條件下注樣,記錄色譜圖Ⅱ。記錄的時間除另有規定外,應為該品種項下規定的內標峰保留時間的倍數,色譜圖上內標峰高應為記錄儀滿標度的30%以上,否則應調
氣相色譜的內標法定量分析
內標法是將一定重量的純物質作為內標物加到一定量的被分析樣品混合物中,然后對含有內標物的樣品進行色譜分析,分別測定內標物和待測組分的峰面積(或峰高)及相對校正因子,按下列公式和方法即可求出被測組分在樣品中的百分含量:校正因子(f):f= (As/ms)/(Ar/mr)其中As和Ar分別為內標物和對照品
色譜儀定量分析之內標法
色譜儀定量分析的內標法是利用被測組分與內標物的的相對校正因子的比值不變進行定量的方法。一、計算方法:??????? mi/ms =(fi′Ai)/(fs′As)??????? Ci% =(mi/m)×100% =(fi′Aims)/(fs′Asm)×100% =(fi′/fs′)×(Ai/As)×(
核酸定量內標與外標
眾所周知,在實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)中模板的濃度對數值與結果Ct值呈線性關系,Ct值越小,濃度越高。根據所選取定量數學模型的差別,主要有外標定量法(外標法)和內標定量法(內標法)兩種定量方法。這些數學模型就像特殊標記的尺子,把得到的Ct值測量為濃度值
質譜聯用氣相色譜技術測定方法
總離子流色譜法(totalionizationchromatography,TIC)——類似于GC圖譜,用于定量。反復掃描法(repetitivescanningmethod,RSM)——按一定間隔時間反復掃描,自動測量、運算,制得各個組分的質譜圖,可進行定性。質量色譜法(masschromatog
質譜-色譜-光譜-波譜
質譜分析法是通過對被測樣品離子的質荷比的測定來進行分析的一種分析方法。被分析的樣品首先要離子化,然后利用不同離子在電場或磁場的運動行為的不同,把離子按質荷比(m/z)分開而得到質譜,通過樣品的質譜和相關信息,可以得到樣品的定性定量結果。 色譜法,又稱色層法或層析法,是一種物理化學分析方法,它利
色譜質譜聯用技術
色譜質譜聯用技術 一、聯用技術的必要性 每種分析方法都有其特長和局限性。在線聯用不僅能取長補短,而且還具有協同作用,獲得兩種技術單獨使用時所不具備的某些功能。 色譜用于分離,而光譜用于結構鑒定,兩者聯用,不僅可以對混合物中的各未知組分進行定性,也可用于定量分析。 二、氣相色譜-質譜聯用(
液質定性定量及譜圖分析
液質分析 質量定量分析 1、要用目標離子的碎片定量,特征性強,排除干擾; 2、在定量分析的方法設置上,盡可能提高掃描速率,提高準確率和重復性(可以通過a減小掃描質量數的范圍來提高目標峰的掃描次數,或 將一個樣品全部分析時間斷分成n個segments,對目標離子單獨設置掃描模式); 3、一
PE-Sciex-液相色譜/質譜/質譜聯用儀
儀器名稱:PE Sciex 液相色譜/質譜 /質譜聯用儀 儀器型號:API 3000 主要技術指標: 質量范圍:5-3000amu多電荷的物質, 可檢測的分子量范圍達幾萬Da。 靈敏度:pmol 基本功能: (1)質譜儀配有電噴霧源(ESI)
PE-Sciex-液相色譜/質譜/質譜聯用儀
儀器名稱:PE Sciex 液相色譜/質譜 /質譜聯用儀 儀器型號:API 3000 主要技術指標: 質量范圍:5-3000amu多電荷的物質, 可檢測的分子量范圍達幾萬Da。 靈敏度:pmol 基本功能: (1)質譜儀配有電噴霧源(ES
氣相色譜質譜聯用儀的質譜原理
質譜分析是一種測量離子荷質比(電荷-質量比)的分析方法,其基本原理 是使試樣中各組分在離子源中發生電離,生成不同荷質比的帶正電荷的離子,經加速電場的作用,形成離子束,進入質量分析器。在質量分析器中,再利用電場和磁場使發生相反的速度色散,將它們分別聚焦而得到質譜圖,從而確定其質量。
氣相色譜質譜聯用儀的質譜原理
質譜分析是一種測量離子荷質比(電荷-質量比)的分析方法,其基本原理 是使試樣中各組分在離子源中發生電離,生成不同荷質比的帶正電荷的離子,經加速電場的作用,形成離子束,進入質量分析器。在質量分析器中,再利用電場和磁場使發生相反的速度色散,將它們分別聚焦而得到質譜圖,從而確定其質量。
內標對定量PCR的影響
若在待測樣品中加入已知起始拷貝數的內標,則PCR反應變為雙重PCR,雙重PCR反應中存在兩種模板之間的干擾和競爭,尤其當兩種模板的起始拷貝數相差比較大時,這種競爭會表現得更為顯著。但由于待測樣品的起始拷貝數是未知的,所以無法加入合適數量的已知模板作為內標。也正是這個原因,傳統定量方法雖然加入內標,但
實時熒光定量PCR無需內標
1.實時熒光定量PCR無需內標實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。1)Ct值的重現性:PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),
外標和內標定量公式
外標:Wi=AiWs/As、內標法:f=(As/ms)/(Ar/mr)儀器分析常用的方法之一,是比較法的一種。與內標法相比,外標法不是把標準物質加入到被測樣品中,而是在與被測樣品相同的色譜條件下單獨測定,把得到的色譜峰面積與被測組分的色譜峰面積進行比較求得被測組分的含量。外標物與被測組分同為一種物質