清華大學團隊連發重要研究成果
在分子生物學的中心法則中,遺傳信息從DNA、RNA最后流向蛋白。RNA的成熟需要經過復雜的轉錄后加工,其質量控制在多種細胞過程中發揮著重要的作用。真核細胞具有大量識別和調控RNA降解的生物大分子,比如exosome復合體。 Exosome復合體通過外切酶方式從3′端對RNA進行水解。人們發現,Rrp6和Ski7分別是細胞核和細胞質exosome的主要輔因子。在細胞質中,Ski7通過一種穿過中心的路徑幫助exosome靶標需要降解的mRNA。不過,科學家們還不清楚Ski7與exosome復合體的互作機制。 清華大學研究團隊對此進行了深入研究。他們通過單顆粒冷凍電鏡解析了Ski7-exosome復合體及其結合RNA時的高分辨率結構。這項研究成果發表在五月十三日的Cell Research雜志上,文章通訊作者是清華大學生命科學學院的王宏偉(Hong-Wei Wang)教授。 結構生物學曾經是X射線晶體學技術的天下,現在冷凍電......閱讀全文
清華大學最新Nature!冷凍電鏡又出新成果
機械門控陽離子通道是一類能夠響應機械力刺激而引起陽離子進出細胞、進而誘發細胞興奮和信號傳遞的一類重要離子通道,然而其在哺乳動物中的分子組成長期未被發現確定。直到2010年,Piezo基因家族包括Piezo1和Piezo2兩個基因被編碼該類通道的必要組成成分 (Coste et al., Scie
冷凍電鏡+清華大學=7篇Cell、Nature、Science
施一公 該校的施一公院士、顏寧教授是這一領域的知名科學家。最近,兩位學者都有新成果發表在CNS上。7月22日,施一公教授研究組在Science雜志就剪接體的結構與機理研究發表兩篇長文,題目分別為“Structure of a Yeast Activated Spliceosome at 3.5
冷凍電鏡樣品冷凍
樣品冷凍樣品冷凍其實是科學家們很早就想到的思路,但是冷凍之后樣品中水分子形成冰晶,不僅產生強烈電子衍射掩蓋樣品信號,還會改變樣品結構。直到1974年,Kenneth A. Taylor和Robert M. Glaeser在-120℃觀察含水生物樣品時未發現冰晶形成,而且發現冷凍樣品能夠耐受更大劑量和
冷凍電鏡
說起冷凍電鏡,小編想不管是研究生還是教授大咖,可能和科研有那么一丁點聯系的人對這個名字都不會陌生,因為它實在太出名了!基于冷凍電鏡產出的科研成果很多都發表在Nature、Science、Cell等頂刊上(羨慕臉),堪稱NSC神器。冷凍電鏡技術的發展直接帶動了生命科學領域,特別是結構生物學的飛速發展,
清華大學提出冷凍電鏡粒子篩選新算法獲得國際認可
為進一步提高冷凍電鏡分辨率和效率,清華大學研究團隊提出的一款新算法CryoSieve,受到了國際冷凍電鏡研發領域的高度關注。4月24日,由哈佛大學醫學院管理,為全球結構生物學提供計算支持的SBGrid聯盟收錄了CryoSieve算法。冷凍電子顯微鏡是一種確定生物大分子的近原子分辨率結構的重要方法。在
Nat-Struct-Mol-Biol:冷凍電鏡技術揭示RNA降解新通路
2013年12月15日,清華大學生命科學學院王宏偉教授課題組在《Nature》子刊《Nature Structural and Molecular Biology》在線發表題為“Visualization of Distinct Substrate Recruitment Pathways
冷凍電鏡成像
冷凍電鏡成像冷凍的樣品冷凍輸送器轉移到電鏡的樣品室,在電鏡成像之前,需確認樣品中的水處于玻璃態。由于生物樣品對高能電子的輻射敏感,成像時必須使用低劑量技術(
冷凍電鏡原理
冷凍電鏡原理冷凍電子顯微學解析生物大分子及細胞結構的核心是透射電子顯微鏡成像,其基本過程包括樣品制備、電子顯微鏡成像、圖像處理及結構解析等幾個基本步驟。冷凍電鏡解析結構步驟 ?圖片來源:中科院計算所透射電子顯微鏡成像過程中,電子束穿透樣品,將樣品的三維電勢密度分布函數沿著電子束的傳播方向投影至與傳播
冷凍電鏡原理
冷凍電鏡原理冷凍電子顯微學解析生物大分子及細胞結構的核心是透射電子顯微鏡成像,其基本過程包括樣品制備、透射電子顯微鏡成像、圖像處理及結構解析等幾個基本步驟(圖3.1)。在透射電子顯微鏡成像中,電子槍產生的電子在高壓電場中被加速至亞光速并在高真空的顯微鏡內部運動,根據高速運動的電子在磁場中發生偏轉的原
冷凍電鏡分類
冷凍電鏡分類目前我們討論的冷凍電鏡基本上指的都是冷凍透射電子顯微鏡,但是如果我們以使用冷凍技術的角度定義冷凍電鏡的話,冷凍電鏡主要可以分為冷凍透射電子顯微鏡、冷凍掃描電子顯微鏡、冷凍蝕刻電子顯微鏡。?冷凍透射電子顯微鏡冷凍透射電鏡(Cryo-TEM)通常是在普通透射電鏡上加裝樣品冷凍設備,將樣品冷卻
冷凍蝕刻電鏡技術
凍蝕刻(Freezeetching)技術是從50年代開始發展起來的一種將斷裂和復型相結合的制備透射電鏡樣品技術,亦稱冷凍斷裂(Freezefracture)或冷凍復型(Freezereplica),用于細胞生物學等領域的顯微結構研究。
冷凍電鏡研究
在低溫下使用透射電子顯微鏡觀察樣品的顯微技術,就叫做冷凍電子顯微鏡技術,簡稱冷凍電鏡(cryo-electron microscopy, cryo-EM)。冷凍電鏡是重要的結構生物學研究方法,它與另外兩種技術:X射線晶體學(X-ray crystallography)和核磁共振(nuclear ma
清華大學Nature-Methods發文:新型的冷凍電鏡三維重構算法
蛋白質是生命體的最主要組成元素,作為一種生物大分子機器,蛋白質功能的實現高度依賴于其復雜的三維原子結構。了解蛋白質的結構及其與功能的關系對探索生命的基本原理,理解疾病的分子機制以及藥物的研發具有重要的意義。基于粒子濾波的三維重構算法示意圖。 冷凍電子顯微鏡,簡稱冷凍電鏡,使用電子束作為光源,是
冷凍電鏡發展背景
冷凍電鏡發展背景人類基因組計劃的完成,標志著科學已進入后基因組時代。雖然大量的基因序列得到闡明,但是生物大分子如何從這些基因轉錄、翻譯、加工、折疊、組裝,形成有功能的結構單元,尚需進一步的研究。后基因組時代人類面臨的一個挑戰是解析基因產物—蛋白質的空間結構,建立結構基因組學,并在原子水平上解釋核酸—
冷凍電鏡是什么
冷凍電鏡,是用于掃描電鏡的超低溫冷凍制樣及傳輸技術(Cryo-SEM),可實現直接觀察液體、半液體及對電子束敏感的樣品,如生物、高分子材料等。冷凍電鏡技術為何摘得2017年的諾貝爾化學獎撰文 | 何萬中(北京生命科學研究所研究員)2013年,冷凍電鏡技術的突破給結構生物學領域帶來了一場完美的風暴,迅
冷凍電鏡是什么
在低溫下使用透射電子顯微鏡觀察樣品的顯微技術,就叫做冷凍電子顯微鏡技術,簡稱冷凍電鏡(cryo-electron microscopy, cryo-EM)。冷凍電鏡是重要的結構生物學研究方法,它與另外兩種技術:X射線晶體學(X-ray crystallography)和核磁共振(nuclear ma
冷凍電鏡顆粒挑選
顆粒挑選接下來需要從原始數據中篩選出顆粒投影,也被稱為“顆粒挑選”,顆粒挑選的好壞也將影響所有后續的分析和處理過程,是一個重要并且繁瑣的步驟。顆粒挑選方式可以分為手動挑選、半自動挑選和完全自動挑選這幾種。在早期的分析中,對于結構的了解還非常少,優先考慮的都是人工挑選。但是自動的顆粒圖像獲取方法的出現
冷凍蝕刻免疫電鏡技術
實驗原理?冷凍蝕刻法(Freeze Ftching),也稱冷凍復型法(Freeze Replica)或冷凍切斷(Freeze Fracture),是研究生物膜結構的重要方法之一。其主要步驟首先是將樣品在液氮中冷凍,然后放到真空噴鍍儀中切斷,切斷后的切面上有細胞器,其間還有凍成洋的水分。再加熱使冰升華
冷凍電鏡是什么
冷凍電鏡,是用于掃描電鏡的超低溫冷凍制樣及傳輸技術(Cryo-SEM),可實現直接觀察液體、半液體及對電子束敏感的樣品,如生物、高分子材料等。能夠斬獲今年諾貝爾化學獎的原因是:諾獎委員會給出的獲獎理由原話是“for developing cryo-electron microscopy for th
冷凍電鏡的發展
細胞里面的生命活動井然有序,每一個部分都有其特定的結構,承擔不同的功能。生物大分子則是一切生命活動的最終執行者,它們主要是核酸和蛋白。核酸攜帶了生命體的遺傳信息,而蛋白是生命活動的主要執行者。自現代分子生物學誕生以來的半個世紀里,解析和分析生物大分子的結構、進而闡釋其功能機制一直都是現代生命科學
冷凍電鏡技術總結
冷凍電鏡技術從建立到現在在結構測定中取得了快速的發展,這也表明了了對整個細胞和細胞器的分子成分的空間結構的描述可能很快就會成為常規方法。冷凍電鏡單粒子法既可以對具有對稱結構的大分子進行研究,也適合于研究結構不規則的大分子復合物,對于分子量的上限沒有什么限制,理論上>100kD的分子在成像技術能夠保證
冷凍電鏡是什么
在低溫下使用透射電子顯微鏡觀察樣品的顯微技術,就叫做冷凍電子顯微鏡技術,簡稱冷凍電鏡(cryo-electron microscopy, cryo-EM)。冷凍電鏡是重要的結構生物學研究方法,它與另外兩種技術:X射線晶體學(X-ray crystallography)和核磁共振(nuclear ma
冷凍電鏡的原理
冷凍電鏡是用于掃描電鏡的超低溫冷凍制樣及傳輸技術,可實現直接觀察液體、半液體及對電子束敏感的樣品,如生物、高分子材料等。樣品經過超低溫冷凍、斷裂、鍍膜制樣(噴金/噴碳)等處理后,通過冷凍傳輸系統放入電鏡內的冷臺(溫度可至-185℃)即可進行觀察。冷凍電鏡中的冷凍技術可以瞬間冷凍樣品,并在冷凍狀態下保
冷凍蝕刻免疫電鏡技術
實驗概要本文介紹了冷凍蝕刻免疫電鏡技術,包括:冷凍蝕刻表面標記免疫電鏡技術和斷裂—標記免疫電鏡技術。實驗原理冷凍蝕刻法(Freeze Ftching),也稱冷凍復型法(Freeze Replica)或冷凍切斷(Freeze Fracture),是研究生物膜結構的重要方法之一。其主要步驟首先是
冷凍電鏡制樣
常規的冷凍方式冷卻速度緩慢,冷卻過程中,蛋白質水溶液會因結晶而變形扭曲,造成生物分子的結構的破壞。快速冷凍制樣是將樣品快速放入液氮冷卻的液態乙烷中,由于冷卻速度快,使得水分子還來不及結晶就被固定住,整個冷凍過程在數毫秒之內就完成了(冷凍速率>104℃/s),冷凍好的水以玻璃態存在,不存在晶體結構,能
什么是冷凍電鏡?
冷凍電鏡,是用于掃描電鏡的超低溫冷凍制樣及傳輸技術,將樣品冷卻到液氮溫度,用于觀測蛋白、生物切片等對溫度敏感的樣品,通過對樣品的冷凍,可以降低電子束對樣品的損傷,減小樣品的形變,從而得到更加真實的樣品形貌。冷凍電鏡具有較好的穩定性和重復性并且操作簡便,管理方便的特點,通過對樣品的冷凍,可實現直接觀察
什么是冷凍電鏡
?什么是冷凍電鏡?冷凍電鏡,全稱冷凍電子顯微鏡技術(Cryo-electron microscopy, Cryo-EM)(我大材料的小伙伴也快好好記住這個單詞,相信不就的將來就會成為檢索材料學文獻的熱門關鍵詞),是指將生物大分子快速冷凍后,在低溫環境下利用透射電子顯微鏡對樣品進行成像,再經圖像處理和
冷凍電鏡技術介紹
2017諾貝爾化學獎2017年諾貝爾化學獎授予了理查德·亨德森(Richard Henderson)、約阿希姆·弗蘭克(Joachim Frank)和雅克·杜博歇(Jacques Dubochet),表彰他們在冷凍電鏡技術的發展上做出的卓越貢獻。?分辨率對比??他們將冷凍電鏡技術簡化,并將其應用在生
冷凍電鏡低劑量電子冷凍成像
低劑量電子冷凍成像材料汪都知道一般做TEM、SEM的時候,樣品導電性越好,電子劑量越高,成像質量越好。然而,高劑量電子對生物大分子卻是毀滅性的,因此Richard Henderson教授提出在低溫下用盡量低的電子劑量成像。他與其合作者先后在1975年和1990年重構出了粗糙的(7?)和高分辨率(3.
清華大學發文報道首個完整藻膽體的冷凍電鏡三維結構
2017年10月19日,清華大學生命科學學院隋森芳教授研究組在《自然》(Nature)雜志上以長文(Research Article)形式在線發表題為《海洋紅藻藻膽體的結構》(Structure of phycobilisome from the red alga Griffithsia pac