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    NatureMedicine:纖維化病變的治療策略

    在組織受到損傷(比如外傷)的情況下,間質細胞(Mesenchymal)通過分泌胞外基質(extracellular matrix)促進組織修復。這一過程受到TGF-b調節。正常情況下,TGF-b的信號會隨著組織的慢慢修復而逐漸下調,最終使間質細胞分泌基質的能力下調到正常水平。而在組織病變的情況下,局部TGF-b的表達量如果始終維持較高的水平,就會不斷誘導間質細胞分泌大量的胞外基質,最終造成組織器官的纖維化。臨床上纖維化也是組織器官病變的主要形式之一,比如常見的肝硬化,肺纖維化等等。在最新的一項研究中,來自德國Erlangen-Nuremberg大學的J?rg H W Distler研究組發現了一種孤兒核受體 -NR4A1在負向調節TGF-B信號傳遞過程中的作用,相關研究成果發表在最近一期的《Nature Medicine》雜志上。 TGF-b上調NR4A1的表達。首先,作者比較了健康人與患有系統性纖維化(systemic ......閱讀全文

    小鼠βactin基因的克隆表達(3)

    (2)質粒的提取及酶切鑒定分析 ? 質粒的提取按照質粒提取試劑盒的操作步驟進行,然后進行雙酶切鑒定。 ? 管號 ① ② 質粒DNA

    小鼠βactin基因的克隆表達(1)

    動物組織RNA的提取實驗目的:掌握由動物組織中提取總RNA的方法實驗原理:Trizol試劑是一個包含酚、異硫氰酸胍和SDS的單相酸性溶液,其在裂解細胞的同時抑制RNase的活性,隨后加入氯仿,酚會大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下層的氯仿酚溶液中,RNA

    小鼠βactin基因的克隆表達(4)

    實驗步驟:(1)誘導靶蛋白表達分別挑取對照菌和重組菌1~2個菌落,接入5ml含Amp(30μg/ml)的LB培養液,37℃振蕩培養過夜。取5ml過夜培養物接入500ml含Amp(30μg/ml)的LB培養液,37℃振蕩培養2h以上,至對數中期(A550=0.5~1.0)。向誘導管中加入IPTG使其濃

    小鼠βactin基因的克隆表達(2)

    實驗步驟: ? (1)目的基因與表達載體的連接反應: ①表達載體和目的片段的酶切 ? 管號 ① ② pGEX 4T-1

    小鼠纖維肉瘤細胞-WEHI-164細胞

    小鼠纖維肉瘤細胞 WEHI 164細胞??在艾滋病(AIDS)面前,嚙齒動物似乎比人類更為強大。大鼠和小鼠對人體免疫缺損病毒(HIV)具有天生的抵抗能力——這一情況也導致研究人員尋找一種AIDS小型動物模型的夙愿一直無法實現。然而科學家zui近發現,一種經過基因改造的小鼠很容易感染HIV,這就為AI

    PNAS:小鼠模型需慎用,基因表達差異大

    PNAS:小鼠模型需慎用,基因表達差異大  小鼠被廣泛用于模擬人類代謝、疾病和藥物應答,是醫學研究中的一個基本工具。然而斯坦福大學的研究團隊指出,人類和小鼠的基因表達存在著驚人的差異,不論是蛋白編碼基因還是非編碼基因。這項研究發表在十一月十七日的美國國家科學院院刊PNAS雜志上。  Mic

    食物纖維為什么能改善小鼠心臟健康?

      一條線索來自腸道里的各種微生物,這些小東西幫助我們加工食物,特別是纖維。也許,某些有益的微生物在某種程度上使不可消化的植物纖維變成了有益“身”“心”健康的物質,但這種聯系是不確定的。  威斯康星大學麥迪遜分校的研究人員已經在高纖維飲食小鼠模型中鑒定了一種特殊脂肪酸的保護機制,這種脂肪酸名叫丁酸鹽

    小鼠心臟成纖維細胞膠原酶濃度

    1mg/ml。小鼠心肌成纖維細胞的組織來源于實驗動物的正常心臟組織,分離時采用二型膠原酶分離,濃度為1mg/ml(用無鈣臺氏液配制),同時酶液里加入牛磺酸,BSA。膠原酶能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構,而不損傷其它蛋白質和組織。

    小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養

    實驗方法原理 將小鼠的胚胎成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料 孕鼠試劑、試劑盒 PBSEDTA胰酶MEF生長培養基FBS高糖DMEM儀器、耗材 眼科直剪眼科直鑷眼科彎鑷玻璃平皿3尼龍濾網離

    小鼠胚胎成纖維細胞傳代培養

    實驗概要小鼠胚胎成纖維細胞傳代培養主要試劑0.05%Trypsin、細胞基礎培養液、DPBS主要設備100 mm培養皿、15 mL離心管、倒置顯微鏡實驗步驟(1)預先37℃溫熱細胞基礎培養液及0.05%Trypsin。(2)用槍頭吸棄培養皿中的培養液,并用DPBS沖洗一遍,然后加入2 mL 0.05

    基因療法治愈小鼠肺纖維化!

      特發性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis)是一種潛在致命疾病,在概念上,激活端粒酶可治療肺纖維化。西班牙國家癌癥研究中心的端粒和端粒酶組(CNIO)首次在活體動物身上證明,通過基因療法延長端粒確實是肺纖維化的有效治療方法。  文章一作Maria A. Blasc

    小鼠胚胎成纖維細胞的原代培養

    實驗概要小鼠胚胎成纖維細胞的原代培養主要試劑75%酒精、0.05%Trypsin、SP、DPBS、細胞基礎培養液?主要設備35 mm培養皿、60 mm培養皿、100 mm培養皿、15 mL離心管、50 mL離心管、凍存管、眼科剪、眼科彎鑷、離心機實驗材料懷孕13.5天【將成年雌、雄小鼠放在同籠中飼養

    提高SIRT6基因表達,能夠延長小鼠模型30%壽命

      生老病死是自然規律,人總會不可避免地衰老,并伴隨著健康狀況下降、能量穩態下降、脆弱性增加。眾所周知,人類整個生命過程中,染色體末端的端粒會隨著細胞分裂而不斷縮短,就像是生命的一個時鐘,當端粒縮短到一定程度,生命也就隨之停止。  就在幾天前,Nature Communications 期刊發表了一

    真菌纖維素酶基因的克隆與表達

    近年來,隨著現代生物技術的迅猛發展,越來越多的真菌纖維素酶基因得到克隆和表達。經過對比發現,不同真菌菌株的同一類型的纖維素酶基因有較高的同源性,但同一菌種不同類型的纖維素酶基因間的同源性相對較低[8]。已知里氏木霉有8個纖維素酶基因得到克隆,包括編碼纖維二糖水解酶的cbh1、cbh2和編碼內切葡聚糖

    真菌纖維素酶基因的克隆與表達

    隨著現代生物技術的迅猛發展,越來越多的真菌纖維素酶基因得到克隆和表達。經過對比發現,不同真菌菌株的同一類型的纖維素酶基因有較高的同源性,但同一菌種不同類型的纖維素酶基因間的同源性相對較低[8]。已知里氏木霉有8個纖維素酶基因得到克隆,包括編碼纖維二糖水解酶的cbh1、cbh2和編碼內切葡聚糖酶的eg

    小鼠胚成纖維細胞的培養和體外分化

    實驗材料?母鼠試劑、試劑盒?PBS胰蛋白酶溶液DNase 溶液儀器、耗材?無菌解剖器械不銹鋼濾網燒瓶培養箱實驗步驟 1. 準備下列試劑和材料:確定懷孕期的母鼠(孕期14至6天)無菌解剖器械(鑷子、剪刀、手術刀片)Cellector 帶收集裝置的不銹鋼濾網,1 mm 直徑篩網內有攪拌棒的 125 ml

    小鼠胚成纖維細胞的培養和體外分化

    原代MEF的分離和凍存 MEF滋養板的制備 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 母鼠 試劑

    小鼠胚成纖維細胞的培養和體外分化

    原代MEF的分離和凍存 MEF滋養板的制備 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 母鼠 試劑

    小鼠胚胎成纖維細胞MEF培養相關知識總結

    小鼠胚胎成纖維細胞的富集1、給13-14天的孕鼠注射大約0.5ml阿佛丁。當鼠麻醉后,實施斷頸法處死小鼠。2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮膚向后拉,暴露出腹膜。用消毒過的工具,剪開腹壁以暴露出子宮角。將子宮角移到10cm的皿里。用10ml不含鈣鎂離子的PBS洗三遍。3、用剪刀剪開每一測的胚囊,并將胚胎

    小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗

    胰酶消化法1 胰酶消化法2 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的胚胎成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF

    小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗

    胰酶消化法1 胰酶消化法2 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的胚胎成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF

    小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗

    小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療相關研究。實驗方法胰酶消化法1胰酶消化法2實驗方法原理將小鼠的胚胎成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF生長培養基中培養,使細胞得以生存、生

    小鼠纖維蛋白原(Fibrinogen)ELISA試劑盒

    小鼠纖維蛋白原(Fibrinogen)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗小鼠?Fibrinogen?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?Fibrinogen與單抗結合,加入生物素化的抗小鼠Fibrinogen,形成

    Cell:膳食纖維引發肝癌?小鼠試驗揭示與腸道菌有關

      膳食纖維被營養學界認定為“第7大類營養元素”,與我們的健康有很大的關聯。然而,一項發表在《Cell》期刊的最新研究卻提醒我們:食用精細化膳食纖維需謹慎!科學家們以小鼠為模型發現,精制可溶性纖維的攝入,竟然會引發肝癌!而這背后竟是腸道細菌在“作祟”。  通常,水果、蔬菜等天然食物中含有膳食纖維,對

    小鼠胚胎成纖維細胞MEF培養相關知識總結2

    網友觀點是:1、關于如何確底胚胎期12.5d~13d的小鼠?希望大家能夠介紹一下自己所采用的方法,集思廣益。我所采用的方法是選擇同一天出生的三對小鼠,到成熟(8~10 w)后,分三周合籠,(每周合籠一對),然后待最早合籠的小鼠產崽后,再取另兩個雌鼠的胚胎。不知道這樣行不行,也沒注意別人是怎樣做的。另

    Sema3aCreERT2小鼠用于特異靶向心臟Purkinje纖維

      上個月,中國科學院生物化學與細胞生物學研究所周斌研究組又有新科研成果發表在 Scientific Reports 上啦,題為“Genetic targeting of Purkinje fibres by Sema3a-CreERT2 ”,提供了一種新的遺傳學工具——Sema3a-CreERT2

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    揭示新小鼠巨細胞病毒轉錄激活因子病毒晚期蛋白表達

    ?2020年1月2日,病毒學期刊Journal of Virology 在線發表了中國科學院上海巴斯德研究所錢志康課題組的最新研究“Murine Cytomegalovirus Protein pM49 Interacts with pM95 and Is Critical for Vira

    小鼠成纖維細胞向神經干細胞的定向轉分化

    實驗概要小鼠成纖維細胞向神經干細胞的定向轉分化主要試劑無菌水、DPBS、0.1%明膠、NSC M、0.05%胰蛋白酶胰蛋白酶、0.1 g/mL明膠、細胞基礎培養基、PDL、神經干細胞培養液、Polybrene、PDL、laminin主要設備35 mm培養皿、四孔板(UNIC)、移液槍、口吸管、玻璃管

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