氣相色譜儀具有高效能、高選擇性、高靈敏度和分析速度快等特點,但僅適合分析蒸氣壓低和沸點低的樣品,在有機物中僅有 20% 的樣品適合于氣相色譜儀分析。高效液相色譜儀彌補了氣相色譜儀的不足,適合分析 80% 的有機物。高效液相色譜儀與氣相色譜儀的差別如下:
一、分離機理:
1、高效液相色譜儀依據吸附、分配、篩析、離子交換與親和等多種原理進行分離,可選用的固定相種類多。
2、氣相色譜儀依據吸附和分配原理進行分離,可選用的固定相種類較多。
二、進樣方式:
1、高效液相色譜儀的樣品需制成溶液。
2、氣相色譜儀的樣品需加熱氣化或裂解。
三、流動相:
1、高效液相色譜儀:
(1)液體流動相可為離子型、極性、弱極性和非極性溶液,可與被分析樣品發生相互作用,并能改善分離的選擇性。
(2)液體流動相動力粘度大,流動相傳輸壓力高。
2、氣相色譜儀:
(1)氣體流動相為惰性氣體,不與被分析樣品發生相互作用。
(2)氣體流動相動力粘度小,流動相傳輸壓力低。
四、色譜柱:
1、高效液相色譜儀的固定相粒度為 5~10um;填充柱內徑為 3~6 mm,柱長為 10~25 cm,柱效為 103~104 塊理論塔板/m;毛細管柱內徑為 0.01~0.03 mm,柱長為 5~10m,柱效為 104~105 塊理論塔板/m;柱溫為常溫。
2、氣相色譜儀的固定相粒度為
0.1~0.5 mm;填充柱內徑為 1~4 mm,柱長為 1~4m,柱效為 102~104 塊理論塔板/m;毛細管柱內徑為 0.1~0.3
mm,柱長為 10~100m,柱效為 103~104 塊理論塔板/m;柱溫為常溫~300℃。
五、檢測器:
1、高效液相色譜儀:
(1)通用型檢測器:ELSD 和 RID。
(2)選擇型檢測器:UVD、PDAD、FD 和 ECD。
2、氣相色譜儀:
(1)通用型檢測器:TCD 和 FID。
(2)選擇型檢測器:ECD、FPD 和 NPD。
六、柱外效應:
1、高效液相色譜儀的溶質在液相中的擴散系數很小,傳質速率慢,柱外效應顯得特別重要。色譜柱以外的死空間應盡量小,以減少柱外效應對分離效果的影響。
2、氣相色譜儀的溶質在氣相中的擴散系數大,柱外效應影響較小,可忽略不計。
七、應用:
1、高效液相色譜儀可分析低沸點和低分子量有機物、高沸點和高分子量有機物、無機離子化合物、熱不穩定化合物和生物活性物質等。
2、氣相色譜儀可分析低沸點和低分子量有機物及永久氣體,配合程序升溫可分析高沸點有機物,配合裂解技術可分析高聚物等。
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