北美時間9月1日,賽默飛發布了兩款最新的NGS系統Ion S5 和Ion S5XL,旨在提供更加簡捷的靶向測序流程。10月29日Ion S5測序儀的首批實驗數據產生于阜外醫院。阜外醫院研究人員選用了主動脈基因疾病組合測序,該基因組合包括15個與主動脈疾病相關的致病疾病,研究人員通過文庫構建——模板制備——上機測序三個大步驟最后得出了Ion S5的首批數據。
Ion S5以5“S”為主要特性:Simple-最簡捷的靶向測序流程,Scalability -靈活的通量選擇,Speed-最快的測序速度,Small Sample Input-微量樣本輸入,Streamlined Data Analysis-流暢的數據分析流程。那么Ion S5真實實驗數據如何,研究人員將此批數據與Ion Torrent PGM數據做了比對,結果如下表所示:
該表格最顯眼的就是測序時間、總數據量、平均深度以及總讀數。
(1) 測序時間
Ion S5的第三個“S”為 Speed—最快的測序速度,實驗數據顯示IonS5的測序時間為2.5小時,比Ion Torrent PGM系統所需時間明顯少2小時。
(2) 總數據量
與Ion Torrent PGM不同,IonS5總數據量以G為單位,總數據量為1.15G,為Ion Torrent PGM總數據量的1.4倍左右。
(3) 平均深度
測序的錯誤率和假陽性結果與測序深度息息相關,隨測序深度的提升而下降。IonS5系統平均深度為449,比Ion Torrent PGM高出128,由此可見IonS5系統測序錯誤率和假陽性結果均低于Ion Torrent PGM。
(4) 總讀數
由比對數據可知,IonS5系統總讀長為5995559個 Reads,比Ion Torrent PGM多出472592個Reads。
(5) 信號值、均一性、平均變異位點數目等
無論在信號值、均一性還是平均變異位點數目,IonS5系統均優于Ion Torrent PGM系統。
研究人員還對該系統文庫擴增效果進行了比對。本次試驗中研究人員采用Ion ChefTM 儀器進行自動化測序模板的制備,試劑采用Ion 520TM & 530TM Chef試劑盒,芯片類型是Ion 520(與318芯片通量一致),起始文庫使用量為60pM/25μL。經過與Ion Torrent PGM系統比對,研究人員發現Ion Chef在文庫制備操作上更簡單,針對長片段擴增效率更高。
最終,阜外醫院對IonS5系統的首批數據下了三個結論:
1. Ion Chef在文庫制備操作上更簡單,針對長片段擴增效率更高。
2. Ion S5測序速度和分析速度均比PGM快。
3. Ion S5數據的整體質量優于PGM。
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