生物學檢測又稱生物活性檢測,是根據細胞因子特定的生物活性而設計的檢測法。由于各種細胞因子具有不同的活性,例如IL-2促進淋巴細胞增殖,TNF殺傷腫瘤細胞,CSF刺激造血細胞集落形成,IFN保護細胞免受病毒攻擊,因此選擇某一細胞因子獨特的生物活性,即可對其進行檢測。生物活性檢測法又可分為以下幾類:
1.細胞增殖法許多細胞因子具有細胞生長因子活性,特別是白細胞介素,如IL-2刺激T細胞生長、IL-3刺激肥大細胞生長、IL-6刺激漿細胞生長等。利用這一特性,現已篩選出一些對特定細胞因子起反應的細胞,并建立了只依賴于某種因子的細胞系,即依賴細胞株(簡稱依賴株)。這些依賴株在通常情況下不能存活,只有在加入特定因子后才能增殖。IL-2依賴株CTLL-2在不含IL-2的培養基中很快死亡,而加入IL-2后則可右體外長期培養。在一定濃度范圍內,細胞增殖與IL-2量呈正比,因此通過測定細胞增殖情況(如使用3H-TdR摻入法、MTT法等)鑒定IL-2的含量。除依賴株外,還有一些短期培養的細胞,如胸腺細胞、骨髓細胞、促有絲分裂原刺激后的淋巴母細胞等,均可作為靶細胞來測定某種細胞因子活性。
2.靶細胞殺傷法是根據某些細胞因子(如TNF)能在體外殺傷靶細胞而設計的檢測方法。通常靶細胞多選擇體外長期傳代的腫瘤細胞株,利用同位素釋放法或染料染色等方法判定細胞的殺傷率。
3.細胞因子誘導的產物分析法某些細胞因子可刺激特定細胞產生生物活性物質,如IL-2、IL-3誘導骨髓細胞合成胺、IL-6誘導肝細胞合成α1-抗糜蛋白酶等。通過測定所誘生的相應產物,可反映細胞因子的活性。
4.細胞病變抑制法病毒可造成靶細胞的損傷,干擾素等則可抑制病毒所導致的細胞病變,因此可利用細胞病變抑制法檢測這類因子。
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