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    發布時間:2019-11-18 15:46 原文鏈接: 植物細胞滲透勢的測定

    實驗方法原理:將植物組織放入一系列不同濃度的蔗糖溶液中,經過一段時間,植物細胞與蔗糖溶液間將達到滲透平衡狀態。如果在某一溶液中細胞脫水達到平衡時剛好處于臨界質壁分離狀態,則細胞的壓力勢ψρ正要下降為零。此時細胞液的滲透勢ψπ等于外液的滲透勢ψπ0 ,此溶液即為該組織的等滲溶液,其濃度即為該組織的等滲濃度。知道了等滲濃度,即可按公式計算出細胞液的滲透勢(ψπ)。實際測定時,由于臨界質壁分離狀態難以在顯微鏡下直接觀察到,所以一般均以初始質壁分離作為判斷等滲濃度的標準。處于初始質壁分離狀態的細胞體積,比吸水飽和時略小,故細胞液濃縮而滲透勢略低于吸水飽和時的滲透勢,此種狀態下的滲透勢稱基態滲透勢。

    實驗材料:

    洋蔥                                                                  

    紫鴨跖草                                                                 

    大蔥鱗莖

    試劑、試劑盒:蔗糖溶液配制

    儀器、耗材:

    顯微鏡                                                                  

    載玻片與蓋玻片                                                                 

    溫度計                                                                 

    尖頭鑷子                                                                 

    刀片                                                                  

    培養皿                                                                 

    試劑瓶                                                                 

    燒杯                                                                  

    容量瓶                                                                  

    量筒                                                                  

    吸水紙                                                                  

    吸管 

    實驗步驟:一、材料、儀器設備及試劑

    1. 材料:洋蔥、紫鴨跖草、大蔥鱗莖。

    2. 儀器設備:顯微鏡;載玻片與蓋玻片;溫度計;尖頭鑷子;刀片;培養皿(直徑5cm);試劑瓶;燒杯;容量瓶;量筒;吸水紙;吸管等。

    3. 試劑及配制:

    1mol·L-1蔗糖溶液配制: 稱取蔗糖34.23g ,溶于蒸餾水中,定容至100 ml。

    0.03%中性紅溶液。

    二、實驗步驟

    1. 系列蔗糖溶液配制

    取9套直徑為5 cm的培養皿,編號,按下表配制成0.30~0.70 mol·L-1的蔗糖溶液。


    加入表中試劑后,充分搖勻,蓋上培養皿蓋備用。

    2. 用鑷子剝取供試材料下表皮,大小以0.5cm2為宜。立即浸入不同濃度的蔗糖溶液中,每一濃度放4~5片。同時記錄室溫。

    為便于觀察,可先將切片于0.03%中性紅染色5 min左右,吸去水分,再浸入蔗糖溶液中,但如不加染色即能區別質壁分離時,仍以不染色為宜。

    3. 表皮細胞在蔗糖溶液中浸泡20~30min,取出放載玻片上,滴一滴相同濃度的糖液,蓋以蓋玻片,在顯微鏡下觀察,確定引起50%以上細胞發生初始質壁分離(即原生質體剛從細胞壁的角隅分離)的濃度,每1制片觀察的細胞不應少于100個。如果在兩個相鄰濃度的切片中,一個沒有發生質壁分離,另一個發生質壁分離的細胞數超過50%,則這兩個濃度的平均值為其等滲濃度。檢查時可先從中間濃度開始。

    三、結果計算

    根據所測得的等滲濃度和室溫,可用下式計算供試溶液的滲透勢(ψπ0),即為細胞的滲透勢(ψπ)。

    ψπ = ψπ0 = -i C R T(Mpa)

    公式中:ψπ0-供試溶液的滲透勢,單位:Mpa(兆帕)

    C -等滲糖液濃度(mol·L-1

    R -氣體常數(0.0083 L·Mpa·mol-1·K-1

    T -熱力學溫度(273+t℃)

    i  -解離系數(蔗糖=1,CaCl2=2.60)


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