CAR-T免疫療法
新型抗腫瘤藥一直都是各大藥企的研發重點。目前臨床使用的抗癌藥物大多數為化學藥，這類藥物由于靶向性差導致患者常常會出現嚴重的不良反應以及耐藥性。盡管藥企投入了大量的人力物力，但是不得不承認傳統化學類抗腫瘤藥物的研發遇到了瓶頸。越來越多的科研人員把目光投向了免疫治療，因此嵌合抗原受體T細胞免疫療法（CAR-T）成為科研界的“寵兒”。不幸的是腫瘤表達的大多數抗原不具備腫瘤特異性，因此大多數的CAR都以腫瘤相關性抗原作為靶點，但這往往會導致“脫靶”的可能性。同時對于相關的抗原選擇也需要選擇細胞表面抗原，以避免CAR-T脫靶的可能。因此尋找腫瘤特異性的細胞表面抗原成為CAR-T研究的關鍵。Bryan
W.
Day等人發現受體酪氨酸激酶在多形性膠質母細胞瘤（GBM）病人中EphA3過表達并且通過調節有絲分裂原激活蛋白激酶信號通路減少腫瘤細胞的分化。幸運的是，作者通過量化成像流式技術檢測到EphA3為細胞膜蛋白，這一發現為后續的CAR-T研究提供了潛在的治療靶點。
圖4：由成像流式圖像可以看到標記熒光的EphA3的分布區域，主要在細胞膜上，且在Integrin α6和CD133陽性的細胞中高表達。 對這些細胞進行統計學分析，證實EphA3高表達是有統計學意義的。 |
盡管傳統化學類抗腫瘤藥物的研發遇到了瓶頸，但是由于化學修飾相對簡單方便，并且經化學修飾過的抗原抗體特異性和親和力都會有所提高；因此，在CAR-T的研究中化學修飾依舊有著很大的應用潛力。耶魯大學的Patrick
J. McEnaney等人設計合成了一類被稱為“synthetic antibody mimics targeting prostate
cancer (SyAM-P)”的化合物，這類中等分子量（~ 7000
Da）的化合物同時具有抗體的結合與效應能力，因此可以有效的將免疫細胞和前列腺癌細胞特異性地結合在一起，從而增強免疫細胞對癌細胞的特異性識別和吞噬。這一發現于2014年12月16日發表在化學類的權威雜志JACS上，為CAR-T的研究提供了新思路。
圖5：通過成像流式可區分發生吞噬的細胞，吞噬形成圖（右下）顯示SyAM-P可以幫助免疫細胞識別癌細胞；吞噬完成圖（右上）證明免疫細胞可以吞噬癌細胞。左圖量化分析顯示此結果是有統計學意義。 |
綜上所述，我們不難發現，單一的圖像或者單一的群體統計學數據已經無法滿足科研的需要。尤其是在精準醫療飛速發展的時代，科學家們要獲得質量更高、更為可信的數據，為臨床的診斷和治療提供有力的支持。因此不僅需要科研工作者們將個體數據與群體數據的有機結合，還要通過“眼見為實”的圖像證實所獲得的統計學結果是有意義的。量化成像流式技術將流式細胞檢測與熒光顯微成像結合于一體，既能提供細胞群的統計數據，又可以獲得單個細胞的圖像，從而提供了細胞形態學、細胞結構和亞細胞信號分布的完整信息，這預示著該技術在未來科研領域中無限的應用潛力！