采用高鹽、低pH值法提取雷蒙德氏棉葉綠體DNA;通過物理剪切法獲得隨機斷裂的DNA片段;剪切片段末端、補平修飾后與pCC1FOS載體連接;
用噬菌體包裝蛋白包裝重組DNA,侵染大腸桿菌EPI300,構建了雷蒙德氏棉葉綠體基因組文庫。
對于葉綠體DNA剪切,以1 mL注射器中等速度吸打18次為最佳參數。