1、細胞破碎的非機械法—滲透壓沖擊破碎法(osmotic shock)
滲透壓沖擊是較溫和的一種破碎方法,將細胞放在高滲透壓的溶液中(如一定濃度的甘油或蔗糖溶液),由于滲透壓的作用,細胞內水分便向外滲出,細胞發生收縮,當達到平衡后,將介質快速稀釋,或將細胞轉入水或緩沖液中,由于滲透壓的突然變化,胞外的水迅速滲入胞內,引起細胞快速膨脹而破裂。
2、細胞破碎的非機械法—凍融破碎法(freezing and thawing)
將細胞放在低溫下冷凍(約-15℃),然后在室溫中融化,反覆多次而達到破壁作用。由于冷凍,一方面能使細胞膜的疏水鍵結構破裂,從而增加細胞的親水性能,另一方面胞內水結晶,形成冰晶粒,引起細胞膨脹而破裂。對于細胞壁較脆弱的菌體,可采用此法。
3、細胞破碎的非機械法—酶溶破碎法(enzyme lysis)
酶解是利用溶解細胞壁的酶處理菌體細胞,使細胞壁受到部分或完全破壞后,再利用滲透壓沖擊等方法破壞細胞膜,進一步增大胞內產物的通透性。溶菌酶(lysozyme)適用于革蘭氏陽性菌細胞的分解,應用于革蘭氏陰性菌時,需輔以EDTA使之更有效地作用于細胞壁。 真核細胞的細胞壁不同于原核細胞,需采用不同的酶。
4、細胞破碎的非機械法—化學破碎法(chemical treatment)
采用化學法處理可以溶解細胞或抽提胞內組分。常用酸、堿、表面活性劑和有機溶劑等化學試劑
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高壓均質機是由一個高壓柱塞泵及特殊結構的均質閥組成,需處理的物料在柱塞所造成的高壓條件下進入可調節壓力大小的閥組中,失壓后的物料從可調節限流縫隙中以極高的流速(1000米/秒,最高可達1500米/秒)......
細胞破碎,細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術。細胞破碎分離提純某一種蛋白質時,首先要把蛋白質從組織或細胞中釋放出來并保持原來的天然狀態,不喪失活性。......