ph梯度萃取法的步驟：分離堿性強弱不同的游離生物堿，可用pH由高至低的酸性緩沖溶液順次萃取，使堿性由強到弱的生物堿分別萃取出來。
據不同物質在不同PH下析出沉淀的原理來提純所需物質。如混合黃酮苷元，由于結構中酚羥基的數目和位置不同，各自所呈酸性強弱不同，使溶于有機相，依次用5％碳酸氫鈉，5％碳酸鈉、4％氫氧化鈉的水溶液萃取而達分離的目的。
含義
溶液酸性、中性或堿性的判斷依據是：[H?]和[OH?]的濃度的相對大小。在任意溫度時，溶液[H?]>[OH?]時呈酸性，[H?]=[OH?]時呈中性，[H?]<[OH?]時呈堿性。但是，當溶液中[H?]、[OH?]較小時，直接用[H?]、[OH?]的大小關系表示溶液酸堿性強弱就顯得很不方便。
