（3）什么情況下的樣本OD值被認為是可用的？
處方：只要樣品的OD高于NC的數值，該數據仍可用于計算m6A水平。
（4）重復孔之間差異較大怎么計算？
處方：對于重復孔之間差異較大，我們若是重復孔3個以上的話，我們一般會選擇舍棄其中差異特別特別大的一個值后再進行計算，但是只有2個孔的話，該怎么辦呢？這個時候我們不能隨便舍棄任何一個孔的值，同樣也沒有辦法提供相關的建議。但是需要注意：p-9005比色測定的%CV約為15%。
4.病癥四：稀釋
（1）需要稀釋的試劑組分如何稀釋？
處方：按照說明書上給的配制比例進行稀釋，用TE buffer稀釋，建議即用即配，計算好所需的量再進行稀釋配制。
（2）為什么有些組分稀釋后需要放置在冰上？
處方：使用前應將稀釋的成分（例如PC標準品）放在冰上，以最大程度地減少試劑降解并保持試劑完整性。
（3）稀釋液必須是TE嗎？可以替換成DEPC水或者無RNAase的水嗎？
處方：可以使用DEPC水替代TE buffer，無RNAase的水也可以。
5.其他
（1）所有組分需要放置在室溫條件下回溫嗎？
處方：對于產品組份中的Wash buffer，保存在低溫下可能會有鹽離子等沉淀，在使用前需要將其拿至室溫進行回溫，沉淀即可溶解，這樣可進行正常的實驗。
（2）如何減少復孔間差異？
處方：
【1】在板中垂直而不是水平地加載復制樣品，因為這可以確保同時添加溶液以復制孔，并有助于最小化復制差異。
【2】確保從孔中完全去除洗滌緩沖液，因為任何殘留的緩沖液都會增加背景信號和重復變異性，尤其是在敏感的ELISA中（例如用于甲基化檢測的ELISA）。
【3】使用手動移液器代替典型的板輕拂/傾倒方法，以確保完全去除緩沖液并最大程度減少孔間污染。
（3）有相關的參考文獻嗎？
說道參考文獻，不僅有，而且非常多，還是處于實時更新的狀態，日期都非常的新（https://www.epigentek.com/catalog/epiquik-m6a-rna-methylation-quantification-kit-colorimetric-p-3646.html）：
Tsuruta K. et. al. et. al. (September 2020). RNA N6-methyladenosine demethylase FTO regulates PD-L1 expression in colon cancer cellsBiochemical and Biophysical Research Communications. 530(1)
Chen S et. al. (August 2020). WTAP promotes osteosarcoma tumorigenesis by repressing HMBOX1 expression in an m6A-dependent manner.Cell Death Dis. 11(8):659.
Xu Y et. al. (August 2020). The FTO/miR-181b-3p/ARL5B signaling pathway regulates cell migration and invasion in breast cancer.Cancer Commun (Lond).
Du J. et. al. et. al. (August 2020). N 6-Adenosine Methylation of Socs1 mRNA is Required to Sustain the Negative Feedback Control of Macrophage ActivationDevelopmental Cell.
Zhang S et. al. (August 2020). Pregnancy carbon black nanoparticles exposure-induced neurobehavioral deficits are associated with m6A modification in offspring.
Yang Z. et. al. et. al. (August 2020). RNA N6-Methyladenosine Reader IGF2BP3 Regulates Cell Cycle and Angiogenesis in Colon CancerGeneral Surgery.
Zhu S et. al. (July 2020). Dexmedetomidine Suppressed the Biological Behavior of HK-2 Cells Treated with LPS by Down-Regulating ALKBH5.
Jian D et. al. (July 2020). METTL14 aggravates endothelial inflammation and atherosclerosis by increasing FOXO1 N6-methyladeosine modifications.10(20):8939-8956.
最后，溫馨提示：這個產品p-9005是有配套的中文說明書的，但是還請各位同學們拿到產品后，認真閱讀英文說明書喔，英文說明書為主，中文說明書為輔。
以上就是小編整理的同學們常問的有關這個試劑盒的問題，各位同學若是有以上問題，可以借鑒喲~~