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    發布時間:2020-09-06 13:20 原文鏈接: lncRNA啟動子DNA甲基化/羥甲基化測序分析綜述

      技術優勢:

      ● 專注非編碼RNA領域,完善的lncRNA啟動子分析流程

      ● 可與lncRNA表達譜芯片聯合應用,實現平臺間無縫對接

      ● 可視化數據展示,提供paper級結果圖表

      ● 優化的IP實驗方法,可信賴的檢測平臺及數據結果

      介紹:

       人類基因組中僅有約2%的DNA序列最終編碼生成蛋白質,其余絕大部分區域轉錄形成長鏈非編碼RNA。隨著lncRNA的生物學功能的發現,這些原先被認為是“junk DNA”的區域的其eferenceseq研究地位上升為“暗物質”。lncRNA的轉錄受到嚴格的調控,其表達譜細胞特異性和組織特異性甚至高于蛋白編碼基因。尋找和發現疾病過程中LncRNA表達變化的原因,了解lncRNA上游調控機制,是lncRNA研究領域重要組成部分,而表觀遺傳學正是從基因組層面研究RNA轉錄調控的重要領域。

       啟動子區域的DNA的甲基化對RNA的轉錄起抑制作用。研究發現,在肝癌以及精神分裂患者樣品中轉錄形成LncRNA MEG3的基因組區域發生DNA甲基化修飾程度的異常改變;食管癌具有特征性lncRNA啟動子DNA甲基圖譜,其區分癌與癌旁組織的效果要優于mRNA啟動子;乳腺癌中高達57.18%的lncRNA發生啟動子DNA甲基化水平的改變,lncRNA啟動子的甲基化程度和lncRNA的表達水平顯著相關。

       康成生物在MeDIP-seq數據中加入lncRNA啟動子DNA甲基化分析,客戶可以同時得到lncRNA,mRNA的DNA甲基化相關數據,可與Arraystar lncRNA芯片聯合應用,實現兩個平臺的無縫對接。lncRNA啟動子分析同樣適用于hMeDIP-seq平臺,可以快速便捷地確定DNA羥甲基化修飾在lncRNA啟動子區域的分布。

       圖1. 甲基化/羥甲基化測序lncRNA啟動子分析流程

      重要數據結果展示:

      1. 兩組/個樣品的lncRNA啟動子差異(羥)甲基化分析

       康成生物使用最新軟件分析兩組/個樣品間的差異(羥)甲基化區域。與傳統的先合并reads,再計算差異富集區,或者先分別計算差異富集區,再合并的方法相比,這種方法更加穩健,能夠更好地利用重復數據內的變異,獲得更好的統計結果。根據基因組坐標,利用UCSC RefSeq數據庫對位于lncRNA啟動子區(TSS -2000 bp到TSS + 2000 bp)的差異(羥)甲基化區域進行注釋。

       表1:lncRNA啟動子差異甲基化區域列表

      2. 與lncRNA表達譜芯片的聯合分析

       甲基化測序/羥甲基化測序數據和lncRNA表達譜數據結合分析,可繪制差異(羥)甲基化情況聚類熱圖。

       圖2. DNA羥甲基化測序與LncRNA 表達譜聯合分析聚類圖

      3. lncRNA啟動子甲基化/羥甲基化可視化分析

       甲基化測序/羥甲基化測序結果中的wig文件能夠上傳到UCSC基因組瀏覽器中,以進行lncRNA啟動子區域信號的可視化。

       圖3. 可視化分析

      參考文獻

       1. Anamaria Necsulea. et al.(2014) Nature 505(7485):635-40 [PMID:24463510]

       2. John P. Thomson. et al.(2013) Nucleic Acids Res 41(11):5639-54[PMID:23598998]

       3. Wenjing Wu. et al.(2013) Gastroenterology 144(5):956-966.e4 [PMID:23333711]

       4. Yongsheng Li. et al.(2015) Scientific Reports 5;5:8790 [PMID:25739977]

      來源:上海康成生物工程有限公司

      聯系電話:800-820-5058,400-886-5058,021-64452021

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      標簽: lncRNA啟動子 甲基化 羥甲基化 測序

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