紅細胞計數(red blood cell count)
(一)原理 用等滲稀釋液將全血稀釋至一定倍數，充入血細胞計數池，在光學顯微鏡下計數一定體積內的紅細胞數，經換算求出每升血液中的紅細胞數量。
(二)方法 顯微鏡計數法。
(三)參考值 成年男性 4.05.5×1012/L
成年女性 3.55×1012/L
初生兒 67×1012/L
(四)臨床意義
1.紅細胞減少 指單位容積血液內的紅細胞數和血紅蛋白含量低于參考值的下限。
(1)生理性減少
①嬰幼兒由于生長發育迅速和血容量的增加常導致造血原料的相對不足，如未能注意補充可致貧血。
②妊娠，特別是中、后期妊娠，為適應胎盤血循環的需要，血漿容量明顯增加而導致血液稀釋及造血原料相對不足均可導致貧血。
③某些老年人造血功能減退而出現貧血。
(2)病理性減少見于各種原因尋致的貧血，如造血原料缺乏、骨髓造血功能障礙、紅細胞破壞或丟失過多等。
2.紅細胞增多指單位容積血液內的紅細胞數和血紅蛋白含量高于參考值的上限。
(1)相對性增多見于血漿中水份丟失過多血液濃縮而使其有形成分相對增多。如大面積燒傷、連續多次的嘔吐、腹瀉、多汗、多尿以及消化道惡性腫瘤晚期長期不能進食等。
(2)絕對性增多指由于某些原因引起血液中紅細胞絕對值增加。
①生理性增多 多與機體缺氧、血中促紅細胞生成素水平升高，骨髓加速釋放紅細胞等有關.見于高原生活、胎兒和新生兒、劇烈的體力勞動等。
②病理性增多見于嚴重的先天及后天性心、肺疾患和血管畸形，如先天性法魯四聯癥、嚴重的肺氣腫、肺源性心臟病。肺動－靜脈瘺等。
真性紅細胞增多癥為干細胞疾病，其特點為血容量持續不斷地增加，紅細胞數可達(710)×1012/L，血紅蛋白可高達170250g/L之間。
血紅蛋白測定
(一)原理 血紅蛋白被高鐵氰化鉀氧化成高鐵血紅蛋白，后者與氰結合形成穩定的棕色氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)，HiCN在規定的波長和液層厚度的條件下具有一定的消光系數，據此可求出血紅蛋白濃度。
(二)方法 氰化高鐵血紅蛋白法
(三)參考值 成年男性 120165g/L
成年女性 110150g/L
初生兒 170200g/L
(四)臨床意義 同紅細胞計數。但在各種貧血時紅細胞與血紅蛋白的減低不一定呈平行關系。
染色血涂片成熟紅細胞形態學檢查
各種貧血時，隨著貧血程度的加重成熟紅細胞常可出現大小、形態、染色等形態學方面的改變，這些變化對于推斷貧血的原因有一定參考價值。
(一)紅細胞大小和血紅蛋白含量方面
1.紅細胞大小方面
正常紅細胞(normocyte)平均直徑7.5m
小紅細胞(microcyte)直徑<6m
大紅細胞(macrocyte)直徑>10m
巨紅細胞(megalo cyte)和超巨紅細胞(extra megalocyte)前者直徑>15μm，后者>20m。
紅細胞大小不等(anisocytosis)指紅細胞之間直徑相差懸殊(相差一倍以上)的情況，常見于各種增生性貧血及巨幼細胞性貧血。
2.血紅蛋白含量方面
正常色素性(normochromic)紅細胞經瑞－姬氏染色后呈淡琥珀色，中心1/3處著色較淡為生理性中心淡染區。
低色素性(hypochromic)紅細胞內血紅蛋白含量減低，生理性中心淡染區擴大甚至成為環形紅細胞。
高色素性(hyperchromic)紅細胞內血紅蛋白含量增多或正常，但由于細胞厚度增大其生理性中心淡染區常消失。
嗜多色性(polychromatic)為尚未完全成熟的紅細胞，由于胞質中殘存核糖體和核糖核酸等嗜堿性物質故染色后紅細胞全部或其一部分呈灰藍色.正常人血片中不見，于各種增生性貧血時常易見到。
3.臨床意義
貧血的形態學分類表
貧血類型
常見疾病
正常細胞正常色素性
急性失血、再生障礙性貧血、骨髓病性貧血等
小細胞低色素性
缺鐵性貧血、海洋性貧血等
大細胞正/高色素性
營養性巨幼細胞性貧血
單純小細胞性
慢性病性貧血如尿毒癥、慢性炎癥等
(二)紅細胞形態異常
1.球形紅細胞(即spherpcyte) 紅細胞直徑縮小(常<6m)厚度增大、生理性中心淡染區消失，為一膨臟的球形。球形紅細胞增多見于遺傳性球形細胞增多癥(多>25%)、自身免疫性溶血性貧血時也可見到。
2.橢圓形紅細胞(elliptocyte) 紅細胞長徑增大、橫徑縮小呈橢圓形或長柱形.正常人血片中可見少數.橢圓形紅細胞增多見于遺傳性橢圓形細胞增多癥(常>25%)、巨幼細胞性貧血及惡性貧血時也可見到。
3.口形紅細胞(stomatocyte) 紅細胞周圍深染，中心淡染區呈一狹長裂隙，宛如微張的魚口。正常人血片中口形紅細胞<4%，其增高見于遺傳性口形細胞增多癥，于彌散性血管內凝血及酒精中毒等也可見到。
4.靶形紅細胞(target cell) 紅細胞中心及邊緣處有血紅蛋白著色，二者之間為一乏色素蒼白區，形同射擊的靶心。靶形紅細胞增多主要見于海洋性貧血、某些血紅蛋白病(如HbC、HbE、HbD等)、脾切除術后等。
5.鐮形紅細胞(sickle cell)紅細胞形如鐮刀、柳葉狀等。主要見于鐮狀細胞性貧血(HbS病)。
6.紅細胞緡錢狀形成(elythrocyte rouleau formation)在并不厚的血涂片上成熟紅細胞之間平行疊連呈串狀排列。主要見于高球蛋白血癥（如多發性骨髓瘤、華氏巨球蛋白血癥）、高纖維蛋百原血癥等。
7.紅細胞形態不整(poikilocytosis)指成熟紅細胞形態發生各種明顯變異而言，如三角形、淚滴形、帽盔形、新月形、梨形、棍棒型等。畸形紅細胞增多主要見于較嚴重的巨幼細胞性貧血及DIC時。
(三)紅細胞內出現異常結構
1.嗜堿性點彩(basophilic stippling)指瑞氏染色條件下紅細胞胞質內存在的嗜堿性黑藍色顆粒，實為殘存的核糖核酸等嗜堿性物質。常見于重金屬中毒及較嚴重的增生性貧血等。
2.染色質小體(Howell-Jolly bodies)系位于成熟或幼紅細胞胞質中的紫紅色圓形小體，直徑多為1-2um，可一個或數個，其本質為細胞核的殘余物.常見于巨幼細胞性貧血、溶血性貧血及脾切除后。
3.卡博氏環（Cabot’s ring）為一紫紅色細圈狀結構多位于嗜多色性紅細胞及點彩紅細胞的胞質中，可能為幼紅細胞核膜的殘余物也可能為胞質脂蛋白變性所致。常見于溶血性貧血、較嚴重的巨幼細胞性貧血等。
4.有核紅細胞（nucleated erythrocyte） 由于髓血屏障的存在，正常成人外周血不見有核紅細胞。在溶血牲貧血(包括急、慢性溶血性貧血、巨幼細胞性貧血)及造血系統惡性疾患(如各種類型的白血病及骨髓轉移癌等)等常于外周血中見到數量不等的幼紅細胞。
紅細胞比積(Hematocrit)測定
(一)原理 將定量的經雙草酸鹽抗凝全血灌注于 Wintrobe 分血管中，以一定的速度和時間離心沉淀后，讀取紅細胞層在全血中所占體積的百分比。
(二)方法 溫氏法
(三)參考值 男性 42%49%
女性 37%43%
(四)臨床意義
1.紅細胞比積增高見于
(1)各種原因導致的血液濃縮如大面積燒傷，連續多次的嘔吐、腹瀉、多汗、多尿等。
(2)真性紅細胞增多癥。
(3)新生兒。
2.紅細胞比積減低見于各種貧血。
紅細胞平均數值測定
(一)原理 根據紅細胞計數、血紅蛋白濃度和紅細胞比積，通過公式可分別計算出下列紅細胞平均數值，多參數血液自動分析儀可直接獲得此類參數。
(二)計算方法及參考值
1.平均紅細胞體積(Mean corpuscular volume，MCV)指每個紅細胞的平均體積，以飛升(fl)為單位。
2.平均紅細胞血紅蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin，MCH)指每個紅細胞內所含有的血紅蛋白的平均量，以皮克(pg)為單位。
3.平均紅細胞血紅蛋白濃度(mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC)指平均每升紅細胞中所含血紅蛋白濃度，以克/升(g/L)表示。
每升血液中的紅細胞體積(L)×1015
MCV ＝ ———————————————— ＝ fl
每升血液中的紅細胞數量
參考值 82~92fl
每升血液中血紅蛋白濃度(g)×1012
MCH ＝ ———————————————— ＝ pg
每升血液中紅細胞數量
參考值 27~31pg
每升血液中血紅蛋白濃度(g/L)
MCHC ＝ ———————————————— ＝ g/L
每升血液中紅細胞比積(L/L)
參考值 320~360g/L
(三)臨床意義 根據MCV、MCH、MCHC測定可對貧血進行形態學分類，并對其鑒別診斷也有一定意義。
貧血的形態學分類鑒別表
貧血形態與分類
MCV
(82~92fl)
MCH
(27~31pg)
MCHC
(320~360g/L)*
病因
大細胞性貧血
>92
>31
320~360
缺乏葉酸、維生素B12如
營養性巨幼細胞性貧血、妊娠期巨幼細胞性貧血、惡性貧血等
正常細胞性貧血
82~92
27~31
320~360
急性失血性貧血、急性溶血性貧血、再生障礙性貧血、白血病等
單純小細胞性貧血
<82
<27
320~360
見于慢性感染、中毒等如慢性炎癥、尿毒癥等
小細胞低色素性貧血
<82
<27
<320
慢性失血性貧血、缺鐵性貧血等
*括號內為有關參考值
網織紅細胞計數
(一)原理 網織紅細胞是晚幼紅細胞脫核后但尚未完全成熟的紅細胞,胞質中尚有核糖體、核糖核酸等嗜堿性物質殘存,經煌焦油藍或新亞甲藍活體染包后,胞質中可見藍或藍綠色枝點狀甚至網織狀結構。
(二)方法 活體染色法.近年來還可通過某些血液自動分析儀及流式細胞術檢測法進行網織紅細胞計數。
(三)參考值(活體染色法)
成人 0.5%1.5%
新生兒 2%6%
網織紅細胞絕對值(2484)×109/L
(四)臨床意義
1.網織紅細胞增高
(1)提示骨髓造血功能旺盛 見于各種增生性貧血如缺鐵性貧血、巨幼細胞性(缺乏葉酸、維生素B12)貧血、失血性貧血,尤以溶血性貧血時增加最為顯著,常>10%。
(2)缺鐵性貧血及巨幼細胞性貧血在給予鐵劑、維生素B12、葉酸治療之后,可見網織紅細胞明顯增加。
2.網織紅細胞減低 提示骨髓造血功能低下,見于再生障礙性貧血。
紅細胞沉降率測定
紅細胞的沉降率(erythrocyte sedimentation rate，ESR)是指紅細胞在一定條件下沉降的速度。血流中的紅細胞由于胞膜表面唾液酸所具有的負電荷而使其相互排斥，彼此分散懸浮而下沉緩慢。影響血沉增快的主要因素在血漿、而血沉增快的關鍵是紅細胞之間排斥力減小而導致的緡錢狀形成。已知血漿纖維蛋白原是促進緡錢狀形成的最強有力的因素，而白蛋白則相反，紅細胞大小、形態等也可影響血沉。
(一)原理 將抗凝全血于特制的血沉管中室溫直立于血沉架上l小時，讀取紅細胞下沉后暴露出的血漿段高度。
(二)方法 Westergren法
(三)參考值 成年男性015mm/h
成年女性020mm/h
(四)臨床意義
1.生理性增快
(1)婦女月經期由于子宮內膜的破損及出血血沉多有略有增快。
(2)妊娠三個月以上可由于其生理性貧血及血漿纖維蛋白原的增加而使血沉增快。
(3)老年人特別是60歲以上的高齡者多因纖維蛋白原的增高而血沉增快，可達30mm/h。
2.病理性增快
(1)備種炎癥
①急性細菌性炎癥由于血中急性期反應物質迅速增多，于感染23天即可出現血沉增快。
②慢性炎癥如結核病、結締組織炎癥風濕熱等于活動期每見血沉增快，病情好轉時血沉減慢，非活動期血沉可正常。
(2)組織損傷和壞死 較大手術創傷可致血沉增快如無合并癥多于23周內恢復正常，心肌梗塞時于發病后一周可見血沉增快，并持續23周，而心絞痛時血沉多正常，因此可借血沉對二者加以鑒別。
(3)惡性腫瘤 血沉可作為惡性腫瘤的普查篩選試驗。通常增長迅速的惡性腫瘤血沉每增快.而良性者血沉多正常。惡性腫瘤手術切除或治療較徹底時血沉可趨于正常，復發或轉移時又見增快。
(4)各種原因導致的高球蛋白血癥均可見血沉增快，如系統性紅斑狼瘡、多發性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、亞急性感染性心內膜炎、黑熱病、肝硬化、慢性腎炎等。
(5)稀血癥(貧血) 血紅蛋白低于90g/L時血沉可因紅細胞數量稀少下沉摩擦阻力減小而致增快.因此，明顯貧血的病人測血沉時應進行貧血因素的校正，報告其校正后結果。
(6)高膽固醇血癥患者血沉每見增快。
3.血沉減慢 見于紅細胞數量明顯增多及纖維蛋白原含量嚴重減低時，如相對性及真性紅細胞增多癥及DIC的晚期。
(五)注意事項及方法學評價
1.Westergren法最適溫度為18-25度，并須于采血后二小時內測定完畢。夏季天熱時血沉每增快，須進行溫度校正后報告。
2.抗凝劑與血液比例為 1:4
3.血沉管必須垂直放置，管內徑應符含要求。