研究揭示骨骼肌興奮收縮偶聯過程原位結構基礎
中國科學院生物物理研究所孫飛研究組和大連化學物理研究所李國輝研究組共同揭示了高等哺乳動物骨骼肌三聯體介導興奮-收縮偶聯過程的原位結構基礎。相關論文3月20日發表于《先進科學》。在生物體內,骨骼肌的收縮與舒張是受神經系統控制的。神經系統傳遞來的化學信號經過一系列的轉變與傳遞過程最后形成肌肉的機械收縮行為,這個過程被稱為興奮-收縮偶聯。在這一過程中,三聯體上的RyR1是整個興奮-收縮偶聯過程中傳遞興奮信號的重要元件。然而,盡管 RyR1的高分辨率結構已經被解析,仍有一系列關于 RyR1功能的重要科學問題未被解決。在該研究中,孫飛研究組基于前期工作基礎,進一步結合組織原位制樣方法和冷凍電子斷層三維重構技術,系統性地表征了骨骼肌中三聯體的精細原位結構。其中包括:解析了RyR1在骨骼肌16.7 ?分辨率的原位結構,發現在原位環境下RyR1與FKBP12和鈣調蛋白(Calmodulin,CaM)緊密結合;解析了RyR1-DHPR超級復合體的......閱讀全文
原位PCR和原位RTPCR操作規程
(一)、儀器設備 英國Thermo Hybaid原位PCR儀。 (二)、操作流程 1、原位PCR步驟 1)預處理: (1)切片常規脫蠟; (2)0.2mol/L HCl處理10min; (3)5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10m
原位PCR和原位RTPCR操作規程
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術,就是在組織細胞里進行PCR反應,它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點,是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。一、儀器設備英國Thermo Hybaid原位PCR儀。二、操作流程1、原位PCR步驟(1)預處理
熒光原位雜交實驗——熒光原位雜交技術
熒光原位雜交可應用于:(1)動植物基因組結構研究;(2)染色體精細結構變異分析;(3)病毒感染分析;(4)腫瘤遺傳學和基因組進化研究。實驗方法原理用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱
FISH熒光原位雜交實驗(原位雜交)
1. 實驗目的??????? 通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和在生物學、醫學領域的應用。掌握原位雜交技術的操作方法,熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。2. 實驗原理??????? 熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺
基于同步輻射光的催化劑動態結構原位表征裝置通過驗收
12月26日,中國科學院計劃財務局組織專家在山西煤炭化學研究所,對王建國研究員負責的中國科學院科研裝備研制項目“基于同步輻射光的催化劑動態結構原位表征裝置”進行驗收及成果鑒定。 驗收鑒定專家委員會由中科院高能物理所胡天斗研究員、謝亞寧研究員、北京大學劉海超教授、太原理工大學李瑞豐教授、董晉
原位雜交儀—熒光原位雜交相關解釋
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecule
原位電性能測試
?聚焦離子束(Focused Ion beam, FIB)的系統是利用電透鏡將離子束聚焦成非常小尺寸的顯微切割儀器。目前商用系統的離子束為液相金屬離子源,金屬材質為鎵(Ga),因為鎵元素具有低熔點、低蒸氣壓及良好的抗氧化力;典型的離子束顯微鏡包括液相金屬離子源、電透鏡、掃描電極、二次粒子偵測器、5
原位PCR的概念
原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應,它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和 高度特異敏感的PCR技術的優點,是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR是Hasse等于1990年建立的,實驗用的標本是新鮮組織、石蠟包埋組織、脫落 細胞、血細胞等.?
原位PCR實驗相關
所需設備 原位PCR反應是在載玻片的平面上進行,保持水平可以使反應各組分均勻地分布在組織切片上,所以須在原位PCR儀上進行,該儀器不但可以使載玻片保持水平,而且還可以給載玻片進行均勻地加熱,保證擴增反應的順利進行。 探針種類 與原位雜交一樣,檢測原位PCR結果的探針可以是DNA探針,也可以
原位型凍干機簡介
凍干腔和冷阱為兩個獨立的腔體,凍干腔中的擱板帶制冷功能,物料置入凍干腔后,物料的預凍、干燥過程無需人工操作。該類型凍干機的制作工藝復雜,制造成本高,但原位型凍干機是凍干機發展方向,是進行凍干工藝摸索的理想選擇,特別適用于醫藥、生物制品及其他特殊產品的凍干。
原位芯片的應用
? ? 原位芯片作為基礎材料,它就像一個支點,可撬動多領域的應用,且與我們生活息息相關。比如,在原位芯片的“助攻”下,電子顯微鏡觀測能力將大幅度提高,能全程高清拍攝每個原子的變化和運動軌跡,借由這項技術,可以研究汽車尾氣、廢水等。由于原位芯片高通量、少樣本量的特性,可滿足超快速體外診斷(如用尿液檢測
原位雜交技術
導語我們常說,科學家也是藝術家,在明確真理探索科學的道路上,往往會創造出很多極具美感的藝術作品。所以今天小編為大家介紹的就是能做出美美圖的新技能。先欣賞一下美美的實驗結果圖~---Olson, B. D. and Downes, G. B.?---in situ Hybridization of w
原位進樣原理
原位測序技術的原理和應用點擊次數:664 發布日期:2022-3-23 來源:蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司原位測序 (ISS) 是一種新方法,通過該方法直接在固定組織或細胞樣品的切片中對 mRNA 進行測序。原位測序原理關鍵是測序信息與其位置之間的聯系—在一些情況下,是亞細胞位置。這與傳統測序不
原位PCR實驗步驟
原位PCR實驗步驟,原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術,使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞(爬片、甩片或涂片)或組織(石蠟、冰凍切片)上直接對靶基因片段進行擴增,通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。一、組織切片和細胞樣品的制備試劑與配置10%福爾馬
原位雜交簡介
原位雜交是在分子生物學領域應用極為廣泛的實驗技術之一,是在研究生物體發育過程中的一種極為重要的分子遺傳學的研究方法。其英文名為in situ hybridization,其中in situ為拉丁文,原義是"in its natural position". 字面的意思理解就是說在其原來的天然的位置處
什么是原位紅外
原位紅外是指測試反應過程中在原位不動下用紅外線掃描機記錄微觀的反應變化。原位紅外主要是測試反應過程中,官能團結構的變化,可以更好的模擬實驗過程,對解釋反應機理很有幫助。在催化劑表征方面,可以模擬出催化劑催化原理。
DRIFT原位光譜
散射反射傅立葉變換紅外光譜(Diffuse Reflaxions Infrared Fourier Transformations Spectroscopy, DRIFTS)為化學家提供了研究接近真實反應條件的非均相氣相反應的可能性。借助這種方法可以獲取反應物與催化劑表面相互作用和吸附
什么是原位檢測?
在檢測中,經常聽到原位檢測,常見于巖土工程其實就是:在實地盡量對土體少的擾動,現場進行的一項檢測,以盡可能的取得較為準確的測量數據。
原位雜交(In-Situ-Hybridization,ISH)與熒光原位雜交(二)
5.洗膜 取出塑料袋,用剪刀剪開,小心取出濾膜,立即浸入盛有2×SSC和 0.5%SDS溶液的盤中,室溫下漂洗5min。再將濾膜移入2×SSC和0.1%SDS溶液中,室溫下洗滌15min(輕輕搖動)。然后將濾膜移入 0.1×SSC和0.5%SDS溶液中;68℃輕輕搖動保溫2h,更換緩沖液后繼
原位雜交(In-Situ-Hybridization,ISH)與熒光原位雜交(三)
(1)DAN斑點雜交①先將膜在水中浸濕,再放到15×SSC中。②將DNA樣品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。③用鉛筆在濾膜上標好位置,將DNA點樣于膜上。每個樣品一般點50μl(2~10μg DNA)。④將膜烘干,密封保存備用。(2)RNA斑點雜交:與上法類似,每個樣品至多加10μg總RNA(
原位雜交(In-Situ-Hybridization,ISH)與熒光原位雜交(六)
夾心雜交法可用濾膜和小珠固定吸附探針,使用小珠可更好地進行標準化試驗和更容易對小量樣品進行操作。Dahlen 等利用微孔板進行夾心雜交,可同時進行大量樣品檢測,他們先吸取DNA探針加到凹板中,然后用紫外線照射使其固定到塑料板上。用微孔板進行夾心雜交還可直接用于PCR技術。應用光敏生物標記探針
原位雜交(In-Situ-Hybridization,ISH)與熒光原位雜交(五)
⑦60伏電泳過夜。 ⑧取出凝膠,水中浸泡2次,每次5min。 ⑨室溫下將膠浸到50mmol/L NaOH和10mmol/l NaCl中45min,水解高分子RNA,以增強轉印。 ⑩室溫下將膠浸到0.1mol/L Tris·HCl (Ph7.5)中45min,使膠中和。
原位雜交(In-Situ-Hybridization,ISH)與熒光原位雜交(四)
(2)硝酸纖維素濾膜吸印。①將膠切成合適大小,切去右上角作為記號。②將膠放進盛有變性緩沖液(1.5mol/l NaCl, 0.5mol/L NaOH)的盤中輕搖動15min。③換到中和緩沖液(1mol/L Tris·HCl , pH8.0, 1.5mol/L NaCl)中輕搖動30min。④裁一張硝
原位雜交(In-Situ-Hybridization,ISH)與熒光原位雜交(一)
是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛應用于腫瘤生物學、血液病理學、遺傳、微生物學、細胞和分子生物學、神經內分
以菌落原位雜交為例介紹原位雜交技術
對分散在若干個瓊脂平板上的少數菌落(100-200)進行克隆篩選時,可采用該方法。將這些菌落歸并到一個瓊脂主平板以及已置于第二個瓊脂平板表面的一張硝酸纖維素濾膜上。經培養一段時間后,對菌落進行原位裂解。主平板應貯存于4℃直至得到篩選結果。將少數菌落轉移到硝酸纖維素濾膜上(1) 在含有選擇性抗生素的瓊
前列腺原位腫瘤模型的建立實驗——原位種植法
前列腺原位腫瘤模型的建立可以:(1)連續活體監測前列腺癌發生、發展;(2)用于前列腺原位腫瘤生長及治療的研究;(3)研究前列腺癌的生物學行為。實驗方法原理10只BALB/C裸鼠前列腺背側包膜內注入攜帶紅色熒光蛋白(RFP)的前列腺癌PC-3細胞(PR7細胞)懸液20μL,第2、4、6、8周分別用非侵
新型原位光電電子顯微學技術構建太陽能電池結構
近日,東南大學電子科學與工程學院孫立濤教授團隊在原位光電器件研究方面取得重要進展,其研究成果以“'In situ interface engineering for probing the limit of quantum dot photovoltaic devices”為題在最新一期
生物物理所揭示小鼠精子軸絲雙聯微管的原位精細結構
軸絲是生物體中纖毛的基礎結構,在細胞運動、細胞間通訊、感覺接收和胚胎發育等重要生命活動中具有關鍵作用。在運動纖毛中,軸絲由中央對復合體(CPC)和周圍的9組雙聯微管(DMT)組成,通過徑向輻條(RS)、外動力蛋白(ODA)和內動力蛋白(IDA)等組分相互連接,形成典型的"9+2"結構。軸絲各組分
關于熒光原位雜交用于染色體數目與結構異常的介紹
在細胞遺傳學檢在中,重復序列的探針應用最多,包括a衛星DNA探針、β衛星DNA探針和經典衛星DNA (elassic -stllite DNA )探針。a衛星DNA探針主要檢測人染色體的著絲粒。β衛星DNA探針位于頂端著絲粒染色體及染色體的異染色質周圍。經典衛星DNA探針有AATCG短片段重復,
科學家研發可用于器官芯片中原位檢測的膠體晶體微結構
器官芯片是集成干細胞、生物材料、納米加工等前沿技術,在體外構建的器官微生理系統,可模擬人體不同組織器官的主要結構功能特征,在藥物研發和疾病模型構建等領域具有廣泛的應用前景。隨著器官芯片系統發展,微米尺度下的環境構建與調控、檢測反饋等逐漸成為其發展的技術需求。 近日,來自東南大學的研究團隊研發了