做western轉膜,用濕轉電泳,還是半干轉電泳好
半干轉要用專門的半干轉膜儀,而濕轉用電泳儀配附件即可;半干轉所需時間較短,但控制不好,中間發熱比較大容易把膜和膠烘壞;而濕轉耗時較長,尤其對大分子量的蛋白轉膜效果較好。相對來講,還是濕法轉膜的實驗室多一些。......閱讀全文
轉膜時間過長,電壓過大會不會對蛋白有影響
確定是轉膜不穩定造成的而不是電泳的問題?電泳后的條帶正常?可能很多原因~轉膜液離子強度不對~轉膜電壓電流不穩定~轉膜儀的問題~一般來說濕轉比半干轉更穩定一些~只不過時間長~
轉膜時間過長,電壓過大會不會對蛋白有影響
確定是轉膜不穩定造成的而不是電泳的問題?電泳后的條帶正常?可能很多原因~轉膜液離子強度不對~轉膜電壓電流不穩定~轉膜儀的問題~一般來說濕轉比半干轉更穩定一些~只不過時間長~
江蘇5年立法112件-推動轉方式和生態建設逾半
記者24日從省委立法工作會上獲悉,省人大常委會2013-2017年立法規劃已獲省委批轉。本屆人大五年共安排立法項目112件,其中安排正式項目59件,力爭在本屆人大任期內完成;安排調研項目53件,作為本屆及下屆人大立法儲備項目。 在全部112件項目中,新制定項目72件,修改
western-blot-電泳液和轉膜緩沖液的配方
5*SDS-PAGE電泳緩沖液 0.125M tris 15.1g, 1.25M glycine 94g,0.5% SDS 5.0g,加入800ml去離子水,攪拌溶解。加去離子水將溶液定容至1L后,室溫保存。用的時候稀釋成1*的就可以了。轉膜緩沖液的配制方法:39mM glycine 2.9g,48
wb轉膜條件公式
wb轉膜條件公式:10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體(例如NC膜)上,通常有兩種方法:毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同,只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易,轉移效率高;而后者適用于大膠的蛋白
企業為何“不想轉”“不敢轉”“不會轉”?
企業“不想轉”“不敢轉”“不會轉”,資源要素支撐相對不足,高端化、智能化、綠色化、融合化水平參差不齊,轉型升級環境尚待優化……7月4日,在“粵商·省長面對面協商座談會”上,關于傳統產業轉型升級的討論熱火朝天。 習近平總書記在二十屆中央財經委員會第一次會議上強調,“堅持推動傳統產業轉型升級,不能
wb轉膜條件公式
wb轉膜條件公式:10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體(例如NC膜)上,通常有兩種方法:毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同,只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易,轉移效率高;而后者適用于大膠的蛋白
wb轉膜條件公式
wb轉膜條件公式:10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體(例如NC膜)上,通常有兩種方法:毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同,只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易,轉移效率高;而后者適用于大膠的蛋白
wb轉膜條件公式
wb轉膜條件公式:10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體(例如NC膜)上,通常有兩種方法:毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同,只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易,轉移效率高;而后者適用于大膠的蛋白
wb轉膜條件公式
wb轉膜條件公式:10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體(例如NC膜)上,通常有兩種方法:毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同,只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易,轉移效率高;而后者適用于大膠的蛋白
半干轉轉膜電源正負極插反會對儀器有損傷嗎
會,正負極插反可能會造成IC燒掉。
凝膠電泳儀-代表產品
電腦三恒多用電泳儀-DYY-12;電腦三恒多用電泳儀-DYY-11;電腦三恒多用電泳儀-DYY-12C;半干式碳板轉印電泳儀(槽);DNA回收電泳儀(槽)DYCP-43B型等。按支持物的物理性狀不同,電泳可分為 (1)濾紙為支持物的紙電泳 (2)粉末電泳: 如纖維素粉,淀粉,玻璃粉電泳 (3)
凝膠電泳儀的代表產品
電腦三恒多用電泳儀-DYY-12;電腦三恒多用電泳儀-DYY-11;電腦三恒多用電泳儀-DYY-12C;半干式碳板轉印電泳儀(槽);DNA回收電泳儀(槽)DYCP-43B型等。 按支持物的物理性狀不同,電泳可分為 (1)濾紙為支持物的紙電泳 (2)粉末電泳: 如纖維素粉,淀粉,玻璃粉電泳
BioRad(伯樂)Western-Blot半干法轉膜的十大注意事項
首先講轉膜儀的清洗:Do not immerse the unit in liquid. Use special care when cleaning the anode plate to avoid scratching or marring the platinum. Do not use
常見的高壓電泳儀/電泳儀
產品名稱:??JY-ECP3000型高壓電泳儀??輸出類型:??恒壓/恒流/恒功率輸出??輸出范圍:??20~3000V?/?1~200mA/1~200W??分辨率:??電壓1V,?電流1mA,電功率1W??定時范圍:??1分鐘~99小時59分鐘??顯示:??帶背光的LCD液晶屏(128×64?像素
一文讀懂蛋白質轉印原理-大分子量蛋白轉印有哪些技巧
通過凝膠電泳分離蛋白后,蛋白質被轉移到固體膜載體上進行后續步驟。有效的轉印依賴于膜的選擇、所使用的轉印設備的類型以及轉印緩沖液的組成。 轉印條件 蛋白的有效轉印依賴于蛋白質從凝膠中遷移出來,也依賴于蛋白在膜上的滯留。像凝膠電泳一樣,轉印步驟將帶負電荷的蛋白轉印到帶正電荷的電極上。轉印效率受所
如何獲得精準的Western-Blot實驗結果
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們,實
如何獲得精準的Western-Blot實驗結果
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們,實
如何獲得精準的Western-Blot實驗結果
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們
如何做出一手漂亮的Western-Blot實驗結果?
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們
如何獲得精準的Western-Blot實驗結果
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們
Western-不同轉膜方法的取舍
轉膜:小分子量的蛋白半干轉效果比較好,大分子量(100KD)以上建議濕轉。具體轉膜條件需要多摸一下。30-80KD半干轉恒流1mA/cm2,1-1.5h 都可以,大分子濕轉100V,2.5h以上應該可以,轉完膜麗春紅染出的條帶比較清楚的話,一般都能有結果。濕轉,Buffer一定要預冷,最好提前一天配
什么是western印跡技術
蛋白質經單向電泳后分離后被轉移到硝酸纖維濾膜上,然后用放射性或酶標記的特異抗體來檢測相應抗原的存在。蛋白質印跡技術是1975年Southern建立了Southern印跡法后,人們用類似的方法對蛋白質進行印跡分析,稱為Western印跡法。Western印跡法是將獲得的蛋白質樣品通過SDS-聚丙烯酰胺
增強化學發光法(ECL)
Ecl 顯色原理:魯米諾在免疫測定中既可用作標記物,也可用作過氧化物酶的底物。在Ecl底物中,含有H2O2和魯米諾,在HRP(辣根過氧化物酶)的作用下,發出熒光來。試驗步驟:1)將兩種顯色底物1:1等體積混合(一般各1ml/membrane)。2)將混合物覆蓋在膜表面,1-2分鐘,搖晃使均勻。3)用
如何獲得精準的Western-Blot實驗結果
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們,實驗做
質檢總局停發美玉米干酒糟許可證:含MIR162轉基因
從玉米延伸到玉米干酒糟,從個別口岸擴展到整個東部漫長的海岸線,含有MIR162轉基因成分的“船貨退運事件”再度升級。 “退運船貨也被要求撤離保稅倉庫。”6月9日,來自青島港的一位貿易商對《華夏時報》記者說:“質檢總局已經停止核發美國玉米干酒糟(DDGS)的進口許可,并要求將之前含有MIR162
Western-Blot詳解(七)
TTT.目的蛋白是一種6KD的分泌性蛋白,RT-PCR就顯示細胞中mRNA表達不高,估計將培養上清凍干濃縮后采用Western Blot還可能檢測不出,但如果用western,是否一定要用0.2μm的膜?用Tris-tricine SDS-PAGE電泳,電泳時分別管制三層凝膠,分離膠用40%
如何獲得精準的Western-Blot實驗結果?(一)
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們
滴定曲線實驗
儀器、耗材 等電聚焦凝膠實驗步驟 按 “載體兩性電解質 pH 梯度等電聚焦” 所述的方法配制 T=5%,C=3% 的等電聚焦凝膠,并進行等電聚焦。為使在第二向電泳時,樣品分子有強的電荷,以便在短時間內完成第二向電泳,保證滴定曲線的精確性以及為使樣品有完整的滴定曲線,一般應選擇寬 pH 范
滴定曲線實驗
儀器、耗材等電聚焦凝膠實驗步驟按 “載體兩性電解質 pH 梯度等電聚焦” 所述的方法配制 T=5%,C=3% 的等電聚焦凝膠,并進行等電聚焦。為使在第二向電泳時,樣品分子有強的電荷,以便在短時間內完成第二向電泳,保證滴定曲線的精確性以及為使樣品有完整的滴定曲線,一般應選擇寬 pH 范圍(pH 3.5