CasRx在動物體內靶向沉默RNA的應用成果
該研究探索了Cas13d家族蛋白CasRx敲低目的基因的最佳sgRNA組合，通過尾靜脈注射質粒的方式，將CasRx系統和靶向Pten基因的sgRNA導入到小鼠肝臟細胞中，成功在小鼠肝臟中實現了Pten的高效沉默，證實了CasRx系統在成體動物體內也具有靶向沉默RNA的活性，通過增強下游蛋白AKT的磷酸化，影響了糖脂代謝相關基因的表達。 2020年3月18日，《蛋白質與細胞》期刊在線發表了《Cas13d介導的肝臟基因表達下調對代謝功能的調控》的研究論文，該研究由中科院腦科學與智能技術卓越創新中心（神經科學研究所）、上海腦科學與類腦研究中心、神經科學國家重點實驗室楊輝研究組和上海科技大學生命科學與技術學院黃鵬羽研究組合作完成。該研究探索了Cas13d家族蛋白CasRx敲低目的基因的最佳sgRNA組合，通過尾靜脈注射質粒的方式，將CasRx系統和靶向Pten基因的sgRNA導入到小鼠肝臟細胞中，成功在小鼠肝臟中實現了Pten的高......閱讀全文
基因編輯技術：讓細胞“華麗轉型再就業”
青光眼和帕金森病是兩種常見的由神經元細胞死亡而導致的神經退行性疾病，對人類的健康造成巨大威脅。據統計，全球因青光眼導致視神經節細胞死亡致盲的人數超過一千萬；而近一千萬的全球帕金森病患者，有一半在中國。中國科學家日前的一項重要成果為治療包括這兩類疾病在內的神經退行性疾病提供了新思路。 中國科學
RNA干擾（RNA－interference，RNAi）基礎知識(1)
Rnai最近由于RNA 干擾（RNA interference，RNA i）的發現使反義領域的研究增多。這種自然發生的現象最早是在秀麗線蟲中發現的（1），是序列特異性地使轉錄后的基因沉默的有力機制。由于最近兩年在 RNA i領域取得的進步，已經有許多這方面的綜述發表（2-4）。RNA 干擾是
純化RNA實驗——從組織中純化總RNA
實驗材料組織試劑、試劑盒RNA 抽提緩沖液氯仿實驗步驟1. 從動物取下組織，直接進行第 2 步或在液氮中快速冷凍新鮮解剖的組織。冷凍后的組織可以貯存在 -70℃。2. 組織（0.05~0.3 g）在 2.0 ml RNA 抽提緩沖液中勻漿。3. 每管加 200 μl 氯仿，混合均勻，冰浴 15 分鐘
RNA干擾（RNA－interference，RNAi）基礎知識(2)
1RNA i的發現RNA i是在研究秀麗新小桿線蟲（C. elegans）反義RNA （antisenseRNA ）的過程中發現的，由dsRNA 介導的同源RNA 降解過程。1995年，Guo等發現注射正義RNA （senseRNA ）和反義RNA 均能有效并特異性地抑制秀麗新小桿線蟲par
Science聚焦：球形RNA讓RNA療法重獲新生
幾十年來，RNA療法在治療遺傳疾病的道路上走得并不順遂。不過，隨著新型RNA（球形核酸SNA）在人體試驗中取得成功，這一領域似乎煥發出新的活力。Science網站特別撰文介紹了這項重要突破。 RNA療法一般是用反義RNA破壞疾病相關蛋白的生產。在美國化學學會(ACS)上周的一次會議上，研究人員
什么是RNA？RNA的作用是什么？
核糖核酸（縮寫為RNA，即Ribonucleic Acid），存在于生物細胞以及部分病毒、類病毒中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種，即A（腺嘌呤）、G（鳥嘌呤）、C（胞嘧啶）、U（尿嘧啶），其中，U（尿
什么叫做外源性RNA和內源性RNA
核糖核酸（縮寫為RNA，即RibonucleicAcid），存在于生物細胞以及部分病毒、類病毒中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種，即A腺嘌呤、G鳥嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶，其中，U（尿嘧啶）取代了DNA
RNA干擾（RNA－interference，RNAi）基礎知識(3)
SiRNASmall interfering RNA (siRNA)：是一種小RNA分子（~21-25核苷酸），由Dicer（RNAase Ⅲ家族中對雙鏈RNA具有特異性的酶）加工而成。SiRNA是siRISC的主要成員，激發與之互補的目標mRNA的沉默。ShRNAshRNA 短發夾RNAshRNA
RNA加工修飾
中文名RNA加工修飾所屬領域生物學定義RNA加工修飾，主要加工方式是切斷和堿基修飾，真核生物tRNA前體一般無生物學特性，需要進行加工修飾。
Poly(A)+RNA－Isolation
Eukaryotic messenger RNA (mRNA) can be separated from the other RNA species in a total RNA preparation by affinity chromatography by virtue of the
RNA提取原理
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速裂解細胞，抑制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成
RNA－反轉錄
?實驗材料 poly(A)+RNA反轉錄酶鼠源反轉酶 或禽源反轉錄酶試劑、試劑盒 oligo(dT)12-18 lmol LTris-Cl 1mol LTris-Cl lmol LKC1 25 mmol LMgCl2 dNTP 混合物 0.lmol LDTT RNasin實驗步驟 一材料與設備1)p
RNA－isolation－for－Microarray
Description?RNA extraction using TRI REAGENT. This method gives ample amout of RNA.Procedure?It is 3 days procedure.Day 1:1. Harvest the cells and cen
RNA提取原理
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速裂解細胞，抑制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成
RNA－Isolation－Protocol
Stabilize RNAStart with 15 ml E. coli Culture containing 7.5* 109 cells (OD600= 0.2 Dilute cells or scale up)Pipet 30 ml of RNAProtect Bacteria Reagen
RNA點線雜交
RNA點線雜交（Dot and Slot blotting）·?????????RNA dot blot and slot blot (Beverly Faulkner-Jones)This methods allows the rapid analysis of numerous small sa
RNA微注射
·?????????RNA Injection?(Hoshi Lab)The oocyte is a useful model for the investigation of the function of usr/localious genes and is a widely used syst
前信使RNA
中文名稱前信使RNA英文名稱pre-messenger RNA;pre-mRNA;precursor mRNA定 義未經剪接加工的基因轉錄產物。即初級轉錄物。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞遺傳（二級學科）
RNA點雜交
RNA點雜交1）??純化的RNA的點雜交和狹線雜交安裝印跡裝置1．切一張合適大小的帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標上表示方向的記號。用水把膜簡單弄濕，在20×SSC中室溫泡1 h。2．在膜浸泡期間，先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印跡裝置，再用無菌水洗干凈。3．把兩片厚濾紙用20×SSC浸濕，再放到
Reverse－Transcription－of－RNA
實驗概要The purpose of Reverse transcription of RNA is acquiring cDNA for follow research.實驗原理Reverse ?Transcription (RT reaction) is a process in which s
RNA－Immunoprecipita...
實驗概要Interest in RNA-protein interactions is booming as we begin to appreciate the role of RNA, not just in well-established processes such as tran
DNA－and－RNA－EXTRACTIONS
A protocol / method / schedule /procedure for extraction / isolation of both DNA and RNA from the same material typically plant leaf / leaves(See also
RNA－gel－electrophoresis
實驗概要RNA gel electrophoresis主要試劑DEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37oC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide sol
RNA－gel－electrophoresis
MaterialsDEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37oC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide solutions should also be
純化RNA實驗
從培養的細胞中純化總RNA 從組織中純化總RNA ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
RNA的制備
來源于任何細胞的RNA都可以通過反轉錄酶的作用拷貝成雙鏈DNA并克隆化，獲得相應的于特定細胞來源的cDNA文庫。因此，RNA制備的意義有兩個方面?* 獲得特定細胞來源的cDNA文庫，克隆目的基因?* 分析基因的表達，闡明基因調控的特性，了解從基因轉錄產生RNA的結構，數量，水平及合成的速率抑制RNA
RNA－反轉錄
? ? ? ? ? ? 實驗材料 poly(A)+RNA 反轉錄酶 鼠源反轉酶 ?或禽源反轉錄酶 試劑、試劑盒 oligo
RNA的提取
一、準備試劑：氯仿，異丙醇，75℅乙醇，無RNase的水或0.5℅SDS（溶液均需用DEPC處理過的水配制）。二、操作步驟：1. 勻漿處理：a. 組織 將組織在液氮中磨碎，每50-100mg組織加入1ml TRIzol，用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。b. 單層培養細胞
RNA干涉實驗
RNA 干涉（RNA1） 是指在真核細胞中引入雙鏈 RNA ( doubt-stranded RNA，dsRNA ) 分子從而導致具有序列同源性的基因產生特異件基內沉默（gene silencing ) 的現象。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理當確定了靶基因上的 siRN
RNA－Isolation－Protocol
RNA Isolation Protocol(Revised 5-15-2003)Stabilize RNAStart with 15 ml E. coli Culture containing 7.5* 109?cells (OD600= 0.2 Dilute cells or scale up)