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    PCR法檢測支原體

    PCR法是20世紀80年代中期建立起來的一種體外DNA擴增技術,其基本原理是酶促DNA合成反應,即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下,經DNA聚合酶的作用,使DNA 鏈擴增延伸。該方法具有靈敏度高、特異性強、快速的特點,但其對實驗環境的要求嚴格,實驗成本較高,有時還有假陽性的現象出現。1、儀器設備超凈工作臺、PCR儀、電泳儀、凝膠成像分析系統、臺式離心機、旋渦混懸器等。2、實驗試劑選用美國Stratagene公司生產的支原體檢測試劑盒(內有引物、陽性對照、內對照、StrataClean resin、緩沖液),dNTP,TapDNA聚合酶,緩沖液,瓊脂糖,礦物油。3、實驗操作PCR反應的前期操作應在無菌環境中進行。(1)樣品的收集:待測細胞用無雙抗培養基培養7d,用無菌容器取上清液500ul,4℃保存待測。(2)模板的制作:在無菌的條件下,取細胞培養上清100ul于一無菌的0.5ml塑料離心管內,蓋好蓋子,95℃水浴加熱5mi......閱讀全文

    PCRELISA端粒酶檢測法

    端粒是真核生物染色體末端的特異DNA-蛋白結構,端粒DNA是一系列重復的富含G的DNA序列,這一序列在生物進化中有高度的保守性(人重復序列為TTAGGG)。已確認端粒在保護基因組DNA不被降解、防止染色體有害的結合(如染色體末端融合、重排、染色體移位和染色體缺失)中起重要作用。  由于DNA聚合酶不

    PCRELISA端粒酶檢測法

    端粒是真核生物染色體末端的特異DNA-蛋白結構,端粒DNA是一系列重復的富含G的DNA序列,這一序列在生物進化中有高度的保守性(人重復序列為TTAGGG)。已確認端粒在保護基因組DNA不被降解、防止染色體有害的結合(如染色體末端融合、重排、染色體移位和染色體缺失)中起重要作用。由于DNA聚合酶不能復

    PCR法檢測乙肝病毒(HBV)

    多聚酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)是一種模擬天然DNA復制過程,在體外擴增特異性DNA(或RNA)片段的新技術。本實驗是將待檢雙鏈DNA經94℃高溫變性成單鏈作模板,然后加入一對人工合成的寡核苷酸引物,引物分別與待擴增DNA片段的兩端互補,經55℃ 低溫退火,

    PCR法檢測乙肝病毒(HBV)

    PCR法檢測乙肝病毒(HBV)主要用于對病毒性肝炎的診斷、療效觀察及預防研究工作。實驗方法原理多聚酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)是一種模擬天然DNA復制過程,在體外擴增特異性DNA(或RNA)片段的新技術。本實驗是將待檢雙鏈DNA經94℃高溫變性成單鏈作模板,

    PCR法檢測乙肝病毒(HBV)

    多聚酶鏈反應(polymerase chainreaction,PCR)是一種模擬天然DNA復制過程,在體外擴增特異性DNA(或RNA)片段的新技術。本實驗是將待檢雙鏈DNA經94℃高溫變性成單鏈作模板,然后加入一對人工合成的寡核苷酸引物,引物分別與待擴增DNA片段的兩端互補,經55℃低溫退火,

    PCRELISA端粒酶檢測法

    端粒是真核生物染色體末端的特異DNA-蛋白結構,端粒DNA是一系列重復的富含G的DNA序列,這一序列在生物進化中有高度的保守性(人重復序列為TTAGGG)。已確認端粒在保護基因組DNA不被降解、防止染色體有害的結合(如染色體末端融合、重排、染色體移位和染色體缺失)中起重要作用。由于DNA聚合酶不能復

    PCR法檢測乙肝病毒(HBV)

    多聚酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)是一種模擬天然DNA復制過程,在體外擴增特異性DNA(或RNA)片段的新技術。本實驗是將待檢雙鏈DNA經94℃高溫變性成單鏈作模板,然后加入一對人工合成的寡核苷酸引物,引物分別與待擴增DNA片段的兩端互補,經55℃

    PCR法檢測乙肝病毒(HBV)

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 多聚酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)是一種模擬天然DNA復制過程,在體外擴增特異性DNA(或RNA)片段的新技術。本實驗是將待檢雙鏈DNA經94℃高溫變性成單鏈作模板,然后加入一對人工合

    ELISAIgM檢測和被動凝集法檢測肺炎支原體抗體的比較

    一、肺炎支原體感染的特點肺炎支原體(MP)是一種常見的非典型肺炎的病原體,經飛沫和直接接觸傳播,臨床多表現為呼吸道感染綜合征,起病可急可緩,以發熱和咳嗽為主要表現。中高度發熱多見,也可低熱或無熱。MP對大環內酯類抗生素敏感, 但對常規治療肺炎的藥物耐受。早診斷、早治療有利于避免濫用抗生素, 縮短病程

    支原體PCR檢測試劑盒的使用說明以及注意事項

    1:樣品準備:取1毫升細胞培養上清(貼壁和懸浮細胞都可以,最好已培養48小時以上),在16000g離心5分鐘,小心棄去上清,避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少,目視看不到)。將沉淀用無菌PBS重懸,在16000g離心5分鐘,同樣小心棄去上清,如此反復用無菌PBS洗三次。最后將獲得的沉淀用100微升超純水

    肺炎支原體lgM檢測

    實驗方法原理肺炎支原體快速檢測卡可檢測血清中的肺炎支原體lgM抗體。患者的血清樣品分別加入兩個測試孔內,當樣品沿膜擴散時,分別加入3滴抗人lgM堿性磷酸酶復合物、3滴洗液和2滴底物,5分鐘后觀察結果。質控孔為質量控制,固定有人lgM,測試孔固定有肺炎支原體抗原。陽性反應結果為藍色,陰性結果為無色。實

    肺炎支原體lgM檢測

    【原理】?肺炎支原體快速檢測卡可檢測血清中的肺炎支原體lgM抗體。患者的血清樣品分別加入兩個測試孔內,當樣品沿膜擴散時,分別加入3滴抗人lgM堿性磷酸酶復合物、3滴洗液和2滴底物,5分鐘后觀察結果。質控孔為質量控制,固定有人lgM,測試孔固定有肺炎支原體抗原。陽性反應結果為藍色,陰性結果為無色。【材

    細胞中支原體的污染檢測有如下幾種方法

    支原體早發現于1898年,1956年Robinson等*從細胞培養物中分離出支原體,之后國內外關于支原體污染細胞的報道屢見不鮮。它廣泛存在于自然界中,有100余種。現在只要是做細胞培養并發表論文,期刊就要求一定要做支原體檢測。一般要一周測一次支原體。支原體檢測有好幾種方法。藥典規定有培養法和DNA染

    定期進行支原體監測,避免細胞生長環境的污染

    支原體在光學顯微鏡下也無法看見,它被稱為小的細菌。但它沒有細胞壁,形態多樣。它可粘附在細胞表面,汲取細胞培養液和細胞內的各種營養,嚴重影響細胞代謝和基因表達。科研中細胞實驗是chang用的科研手段。由于支原體普遍為人體所攜帶,而且容易在空氣中形成氣溶膠,因此在細胞培養時,常規應至少一周檢測一次支原體

    18-種生物致癌因子檢測-(PCR/MS法)

      國際癌癥研究機構(IARC)2012年確認:有17.8-26%的癌癥是由下列一種人類病毒、 細菌或寄生蟲所引起, 包括: EB病毒、 乙肝病毒、 丙肝病毒、 卡波濟肉瘤皰疹病毒、 人類免疫缺陷病毒、人乳頭狀瘤病毒、 嗜人類T淋巴細胞病毒、 梅克爾細胞多瘤病毒、 中華肝吸蟲和泰國肝吸蟲、 埃及血吸

    PCR-法檢測熒光假單胞菌的簡介

      針對16S rRNA 保守序列設計引物,通過 PCR 擴增,可以將牛奶中嗜冷菌擴增出147bp的 DNA片段,標記后用 ELISA 檢測,得到熒光假單胞菌AH-70 的OD450和菌濃度的方程,分析得此方法和平板計數法的相關系數達到 0.94,可以檢測菌濃度范圍是103-107CFU/mL。PC

    18-種生物致癌因子檢測-(PCR/MS法)

    確認的人類生物致癌因子生物致癌因子與癌癥的關系國際癌癥研究機構(IARC)2012年確認:有17.8-26%的癌癥是由下列一種人類病毒、 細菌或寄生蟲所引起, 包括: EB病毒、 乙肝病毒、 丙肝病毒、 卡波濟肉瘤皰疹病毒、 人類免疫缺陷病毒、人乳頭狀瘤病毒、 嗜人類T淋巴細胞病毒、 梅克爾

    支原體檢查法的概述

      支原體檢查法是檢查人體否受到支原體的感染,為臨床診斷與治療支原體感染患者提供依據的一種檢查方法。支原體只能粘附在呼吸道或泌尿生殖道的上皮細胞表面的受體上,而不進入組織和血液。

    肺炎支原體及其快速培養法

    支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型,它既不同于,也不同于病毒,是介于細菌和病毒之間,能在無活細胞的人工培養基上生長繁殖的最小微生物。它廣泛分布于自然界,與人類、 動植物的疾病有密切的關系。支原體的種類繁多,造成的危害非常廣泛。目前證明對人體有致病作用的支原體有肺炎支原體、 解脲支原體、 人型支原

    細胞被支原體污染后的清除辦法

    在細胞培養過程中,支原體感染發生率達到63%,因而細胞培養過程中被支原體污染是一個世界性的難題。本文締一生物為您分析細胞被支原體污染后的清除策略。細胞培養中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染,估計細胞培養的同學就開始犯愁了,細胞培養的老手都知道,支原體污染非常不易察

    66家企業,100余款產品助力肺炎支原體檢測(附名單)

      最近一段時間“支原體肺炎”、“發熱”、“阿奇霉素”等詞條沖上熱搜,身邊的同事反饋,得了“支原體肺炎”相比“新冠”陽性更加難受,深深的體驗了一把“太姥拉手”的感覺。  肺炎支原體是什么?  肺炎支原體是人類支原體肺炎的病原體。支原體肺炎的病理改變以間質性肺炎為主,有時并發支氣管肺炎,稱為原發性非典

    Microsart?-AMP支原體試劑盒的驗證測試

    引言作為世界上最小的細菌之一,支原體能夠獨立繁殖。它們屬于柔膜菌綱,生長非常緩慢,且為寄生。細胞培養物的污染仍是一個主要問題。一系列生理和生化參數受細胞培養物中支原體的影響。支原體感染會導致細胞的代謝、生長、活力、大分子合成、形態等發生變化,因此對細胞培養物進行靈敏的常規污染檢測是必不可少的。傳統的

    支原體的檢測實驗_低漲處理地衣紅染色觀察法

    實驗方法原理本法為固定染色法,簡便易行,標本可長期保存,不僅適于檢測支原體,亦可用于檢測真菌和細菌。實驗材料細胞試劑、試劑盒培養液枸櫞酸Carnoy地衣紅冰醋酸酒精儀器、耗材離心機實驗步驟1. ?取材用支持物蓋片培養法或培養液均可;用培養液時,先吸取培養液1 毫升,500~800 轉/分,離心5 分

    細胞如何檢測是否支原體污染?

    我的細胞,居然背著我養“小三”!那“小三”,名叫??支?·?原?·?體?!!!因為這“小三”,我的細胞表現都變了!瞞我這么久,原來這些日子都是假的!就讓BI帶您來了解這位不速之客吧!全球實驗室狀況支原體流行中▲?全球平均有約15~35%細胞實驗室發生支原體污染(65~80%嚴重污染),超過一半實驗室

    支原體的掃描電鏡檢測

    1、原理利用電子顯微鏡的超級放大功能,可直接觀察培養細胞中支原體污染情況。2、操怍方法①細胞傳代至貼有蓋玻片的平皿中;②培養24h取出;③PSB洗滌;④2.5%戊二醛/ PSB固定15min,PSB洗滌;⑤1%鋨酸固定30min,PSB洗滌;⑥乙酸異戊酯脫水;⑦冰點干燥;⑧噴金;⑨掃描電鏡觀察,照相

    支原體檢查法的相關疾病

      支原體感染,小兒支原體肺炎,非特異性尿道炎,小兒肺炎,支原體尿路感染,間質性膀胱炎、局限性外陰炎和脫屑性陰道炎綜合征,妊娠合并支原體感染,老年人支原體肺炎

    關于支原體檢查法的簡介

      支原體檢查法是檢查人體否受到支原體的感染,為臨床診斷與治療支原體感染患者提供依據的一種檢查方法。支原體只能粘附在呼吸道或泌尿生殖道的上皮細胞表面的受體上,而不進入組織和血液。

    生殖支原體感染與女性黏液膿性宮頸炎相關性研究

      目的  建立生殖支原體 Taqman MGB 熒光聚合酶鏈反應 (PCR) 檢測方法,檢測宮頸炎患者生殖支原體感染情況,以期發現生殖支原體感染與女性黏液膿性宮頸炎 之間的相關性。圖片來源于網絡  方法  參照國內、外文獻建立 Taqman MGB 熒光 PCR 檢測技術;采集大連市皮膚病醫院性病

    Real-Time-PCR—Cycleave-PCR法原理

    ■ CycleavePCR法原理 CycleavePCR法是由RNA和DNA構成的雜合Cycling 探針與RNase H組合使用的高靈敏度檢測方法,能夠高效率地檢出目的基因。Cycling 探針內部夾有RNA部分,5′端標記熒光物質,3′端標記淬滅物質,當探針處于完整狀態時,由于熒光淬滅作

    泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現狀和存在問題

    ?解脲脲原體(uu)、人型支原體(MH)、生殖支原體(MG)和沙眼衣原體(CT)都是寄生在泌尿生殖道的病原體,常引起泌尿生殖道疾患。支原體和衣原體感染不但是非淋菌性尿道炎(NGU)的最主要病因(90%以上),且已成為發病率最高的性傳播疾病,已越來越受到重視。但由于技術局限,目前對其檢測仍存在不少問題

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