抗核抗體與間接免疫熒光技術
在自身免疫性疾病中,人體組織細胞細胞核的核膜、核內的染色質、非組蛋白,以及核糖核酸(RNA)和相關的蛋白質等都可成為自身免疫反應攻擊的靶子,產生抗核抗體(ANA)。其中有不少抗體因對疾病的診斷有高度的特異性,已成為診斷某一類疾病的血清標志性抗體,如抗雙鏈DNA抗體、抗Sm抗體之于SLE,抗SSB抗體之于SS,抗Jo-1抗體之于多發性肌炎/皮肌炎等等。 間接免疫熒光法是檢測自身抗體的標準技術。其特點是特異性強,通過熒光顯微鏡鏡檢能夠精確地判斷組織或細胞內熒光素的有無或分布,陽性與陰性樣品的信號強度對比明顯。自身抗原的位置決定了其相應抗體的典型的熒光模型,與此典型模型不相關區域的熒光均為檢驗地帶網非特異性熒光。另外基質制備容易,不需要復雜的技術就可生產出冰凍組織、細胞和細菌涂片,也不需要純化抗原,由于保留了原基質的完整抗原譜,因而一塊基質片可同時篩查多種不同的自身抗體,獲得較高的檢測效率。也可以在一個反應區上組合多種基質,類似于馬......閱讀全文
臨床化學檢查方法介紹抗核抗體(ANA)或抗核因子(ANF)介紹
抗核抗體(ANA)或抗核因子(ANF)介紹: 抗核抗體(ANA)是最常出現于自身免疫性風濕病(結締組織病)患者血清中的一組自身抗體的總稱,其靶抗原為真核細胞的核成分,但也包括某些細胞質和細胞骨架成分。核染色質中的抗原有DNA、組蛋白、高活動組(high mobility group,HMG)蛋白、
間接免疫熒光法原理
間接免疫熒光試驗是用特異性抗體與標本中相應抗原反應后,再用熒光素標記的第二抗體(抗抗體)與抗原-抗體復合物中第一抗體結合,洗滌后在熒光顯微鏡下觀察特異性熒光,以檢測未知抗原或抗體。本法比直接法敏感度提高5-10倍,且一種熒光二抗可檢測多種抗原抗體系統,缺點是易產生非特異性熒光。
抗核抗體譜的功能作用
ANA抗體譜檢測能為臨床醫生提供更為豐富的檢驗指標,對病人的潛在疾病做出更好的提示。例如,ENA檢測的Sm抗體雖然是系統性紅斑狼瘡的特異性抗體,但是其陽性率較低,僅為5%~10%,如果使用ANA抗體譜作為檢測試劑,則有核小體,dsDNA,核糖體P蛋白三個特異性指標可以作為系統性紅斑狼瘡的檢測指標
抗核抗體(ANA)的臨床意義
增高見于系統性紅斑狼瘡、混合性結締組織病、硬皮病、類風濕關節炎、干燥綜合征、藥物性狼瘡(如抗心律失常藥物普魯卡因胺、降壓藥肼屈嗪、治癲痛藥物。抗甲狀腺藥物硫脲嘧啶等引起的狼瘡)等。
抗核小體抗體檢測的原理
將高度純化的核小體靶抗原固定于微孔板上,患者血清中的抗核小體抗體可與之結合,通過辣根過氧化物酶(HRP)標記的第二抗體(抗人IgG)反應及酶底物/色原顯色,即可檢測此抗體。
抗核小體抗體的檢測及應用
凋亡細胞是核小體的重要來源,當SLE患者的吞噬細胞對凋亡細胞的清除能力受損或降低,導致核小體在患者體內大量存積,多聚核小體與活化的單核細胞結合后被抗原遞呈細胞呈遞給CD4+Th2細胞,Th2細胞增殖活化,激活B細胞產生抗核小體抗體(AnuA)。 AnuA特異性高,與SLE病情活動性相關,通常采
抗核抗體的檢測及醫學意義
抗核抗體的檢測及醫學意義:抗核抗體的檢測及醫學意義抗核抗體(ANA)是一組將自身真核細胞的各種細胞核成分作為靶抗原的自身抗體的總稱。ANA的性質主要是IgG,也有IgM、IgA和IgD,其無器官和種屬特異性,故該類抗體可與www.med126.com所有動物的細胞核發生反應。迄今已有二十余種抗核內不
抗核抗體陽性意味著什么?
在臨床上,常常遇到一些病人在檢查中發現抗核抗體(ANA)陽性,擔心自己是不是得了狼瘡,那么ANA陽性到底說明了什么呢?其實,在我們身體內有一個系統叫免疫系統,這個系統專門產生一些細胞或抗體對抗進犯我們身體的細菌或者病毒,防止機體受到這些微生物的感染。但是,在有些時候,免疫系統也會出錯,產生一些針對自
抗核抗體陽性是什么意思
抗核抗體陽性提示患結締組織病的可能,但仍要結合臨床表現及各結締組織病的診斷標準。抗核抗體陽性,除了自身免疫性風濕病,還可見于各種原因引起的肝硬化、自身免疫性肝病、腫瘤以及少數正常人尤其是老年人。
間接法測抗體所需試劑與儀器
磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4熒光標記的抗人球蛋白抗體:以0.01mol/L,pH7.4的PBS進行稀釋。搪瓷桶三只(內有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)有蓋搪瓷盒一只(內鋪一層浸濕的紗布墊)熒光顯微鏡玻片架濾紙37℃溫箱等。
間接熒光抗體技術的原理和目的
中文名稱間接熒光抗體技術英文名稱indirect fluorescence antibody technique定 義一種免疫標記技術。即應用熒光標記的二抗,通過與第一抗體結合而檢測未知抗原。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)
系統性風濕病的臨床免疫學試驗進展
自身抗體(autoantibodies)是指直接抗細胞內、細胞表面和細胞外成份的抗體。(一)細胞內抗原包括核成份和細胞漿成份,常用于免疫風濕病學臨床試驗診斷的相應抗體有①抗核抗體(antibodies to nuclear antigens, ANAs);②抗細胞漿抗體(antibodies t
簡述抗著絲點抗體的檢查過程
建立一種簡單、方便、準確、特異的方法檢測抗核抗體(ANA)及抗著絲點抗體(ACA)。 方法:比較HRP—SPA免疫組化法與間接免疫熒光法。 結果:患者血清進行ANA及ACA檢測,兩種方法檢測ANA陽性率基本相同,核型略有差異。HRP—SPA免疫組化法檢測ANA正常值滴度定為≤1:80,間接免
抗可提取性核抗原抗體的簡介
可提取性核抗原(ENA)又稱可溶性核抗原,指的是細胞核在鹽水中可以溶解的一部分抗原成分。抗ENA抗體,屬于抗非組蛋白抗體,包括6種抗體,即抗Sm抗體、抗RNP抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體、抗Scl-70抗體和抗Jo-1抗體。常用免疫雙擴散法和免疫印跡法進行檢測。不同的抗ENA抗體在各種彌漫性
抗核抗體ANA陽性是什么意思
很多病人以為抗核抗體是單一抗體,這種觀點是不對的。現在,人們把抗體所針對的體內物質稱為靶抗原,而ANA是一組將真核細胞內各種與細胞核相關成分作為靶抗原的自身抗體的總稱。 ANA存在于血清中,也可存在于胸水、關節滑膜液和尿液中。目前理解,ANA包括五大類,每一類又因不同的抗原特性再分為許多亞類,因
抗核抗體測定ana檢查什么病的
抗核抗體測定ana是檢查免疫系統疾病的,例如結締組織病等,特別是抗核抗體出現高滴度的情況,則提示有可能存在疾病的。但是具體的疾病還是需要根據自身的癥狀,以及檢查的檢查才可以明確。如果抗核抗體滴度較低,并且C反應蛋白、血沉等沒有出現異常情況,并且抗核抗體均為陰性,則可以定期進行觀察。
免疫學實驗抗核抗體(ANA)介紹
抗核抗體(ANA)介紹: 泛指抗各種細胞核成分的抗體,是一種廣泛存在的自身抗體。 抗核抗體(ANA)正常值: 間接免疫熒光法: 小于 1:10(陰性)。 抗核抗體(ANA)臨床意義: 增高:見于系統性紅斑狼瘡、混合性結締組織病、硬皮病、類風濕關節炎、干燥綜合征、藥物
治療紅斑狼瘡,還是治療抗核抗體?
一直以來有病友問我一個問題:我的抗核抗體滴度很高呀,如何降低抗核抗體滴度呀?我不得不反復說:我們是治療紅斑狼瘡,但不是治療抗核抗體。疾病才是治療的目標狼瘡的起源狼瘡(Lupus)這一術語最早始于中世紀,它主要是用來與“被狼咬過后的皮膚損傷相似”的糜爛性皮膚改變。而古典時期的紅斑狼瘡始于1846年。當
抗核抗體(ANA)抽血后注意事項
1、抽血后,需在針孔處進行局部按壓3-5分鐘,進行止血。注意:不要揉,以免造成皮下血腫。 2、按壓時間應充分。各人的凝血時間有差異,有的人需要稍長的時間方可凝血。所以當皮膚表層看似未出血就馬上停止壓迫,可能會因未完全止血,而使血液滲至皮下造成青淤。因此按壓時間長些,才能完全止血。如有出血傾向,
抗核周因子抗體檢測的介紹
抗核周因子的靶抗原存在于頰粘膜上皮細胞核周胞漿內,是上皮細胞的中等纖維結合蛋白或其前體,它是一種不溶性蛋白質。抗核周因子主要為IgG,也含有IgM及IgA成分。
ANA抗核抗體檢測的臨床應用
1957年Holborow等建立間接免疫熒光法(indirect immunofluorescence,IIF)檢測ANA,對ANA檢測的臨床應用具有里程碑意義。臨床上ANA常見于系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)等系統性(非器官特異性)A
抗核抗體(ANA)有哪些注意事項
一、抽血前的注意事項: 1、抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 2、體檢前一天的晚八時以后,應禁食,以免影響第二天空腹血糖等指標的檢測。 3、抽血時應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮,增加采血的困難。 二、抽血后應注意: 1、抽血后
活細胞間接免疫熒光法
一.實驗器材:1.??器材:40孔塑料板、40孔板離心機、微量加樣器、振蕩器、蓋玻片、熒光顯微鏡等2.??試劑:單抗隆抗體(單抗)、熒光標記抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、疊氮鈉(NaN3)等二.方法(微量法)1.??將分離好的單個核細胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分鐘
間接免疫熒光試驗檢查過程
(1) 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。 (2) 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min)。 (3) 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS
自身免疫性肝病抗體測定的參考值
抗線粒體抗體2型抗體IgG:免疫印跡法:陰性 抗肝腎微粒體抗體-1型抗體:免疫印跡法:陰性 抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗體:陰性 抗平滑肌抗體:間接免疫熒光法:陰性 抗核抗體檢測:間接免疫熒光法:
疫熒光技術間接法測抗體實驗步驟
間接法測抗體⑴基本原理染色程序分為兩步,第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗原抗體充分結合,然后洗滌,除去未結合的抗體。第二步,加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應,標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的
抗核抗體(ANA)或抗核因子(ANF)的注意事項及檢查過程
注意事項 一、抽血前的注意事項: 1、抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 2、體檢前一天的晚八時以后,應禁食,以免影響第二天空腹血糖等指標的檢測。 3、抽血時應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮,增加采血的困難。 二、抽血后應注意:
抗核抗體(ANA)或抗核因子(ANF)的注意事項及檢查過程
注意事項 (1)用IIF法檢測ANA,正確診斷的前提是對每份待測血清同時用Hep-2細胞和肝細胞做抗原片進行平行測定,選用何種細胞為抗原片,抗原片的固定方法,熒光抗體的特異性、效價、親和力,熒光顯微鏡的質量等都對測定的結果有不容忽視的影響,因此,每個實驗室都應進行嚴密的室內檢驗質量控制,每次試
抗核抗體(ANA)或抗核因子(ANF)的正常值及臨床意義
正常值 免疫熒光定性法陰性。 免疫熒光滴度法
抗核抗體(ANA)或抗核因子(ANF)的臨床意義及注意事項
臨床意義 ANA見于多種自身免疫病(尤其是自身免疫性風濕病)患者,例如全身性紅斑狼瘡(SLE)、藥物誘導的狼瘡、混合性結締組織病的檢出率都可達100%;干燥綜合征(Sjgren綜合征)、進行性全身性硬化癥檢出率可達70%~85%;其他如類風濕性關節炎、多發性肌炎及皮肌炎、慢性活動性肝炎、潰瘍性