免疫酶標技術
免疫酶標技術1) 直接法1.標本固定。2.PBS洗滌2×3分鐘。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制內源性過氧化物,室溫10~20分鐘。4.正常血清(1:10)孵育,室溫20分鐘。5.滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6.PBS洗滌3×3分鐘。7.DAB+H2O2顯色5~10分鐘,鏡下控制染色結果。DAB+H2O2應用前15分鐘配制。8.充分水洗后,復染、脫水、透明、封片、鏡檢。 2) 間接法1.標本固定。2.PBS洗滌2×3分鐘。3.1%H2O2(或1%H2O2 甲醇)抑制內源性過氧化物,室溫10~20分鐘。4.正常血清(1:10)孵育,室溫20分鐘。5.滴加第一抗體,37℃1小時或4℃過夜。6.PBS洗滌3×3分鐘。7.滴加酶標二抗,室溫1小時。8.PBS洗滌3×3分鐘。9.0.04%DAB+0.03 %......閱讀全文
酶免疫技術的分類
酶免疫技術一般分成酶免疫組化技術和酶免疫測定兩大類。酶免疫組化技術與熒光抗體技術相似,酶標記抗體與組織切片上的抗原起反應,然后與酶底物作用,形成有色沉淀物,可以在普通光學顯微鏡下觀察。如酶作用的產物電子密度發生一定的改變,則可用電子顯微鏡觀察,稱為酶免疫電鏡技術。 酶免疫測定根據抗原抗體反應后
免疫酶技術的方法
ACA(抗心磷脂抗體)主要通過抑制血管內皮細胞合成PGI2,干擾血栓調節素、纖溶酶原激活劑和蛋白質C系統的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝狀態,與復發性動靜脈血栓形成、反復自然流產及血小板減少癥關系密切。其主要程序為用純心磷脂的無水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封閉后分別于標本孔和對照孔中加
酶免疫技術的分類
酶免疫技術一般分成酶免疫組化技術和酶免疫測定兩大類。酶免疫組化技術與熒光抗體技術相似,酶標記抗體與組織切片上的抗原起反應,然后與酶底物作用,形成有色沉淀物,可以在普通光學顯微鏡下觀察。如酶作用的產物電子密度發生一定的改變,則可用電子顯微鏡觀察,稱為酶免疫電鏡技術。 酶免疫測定根據抗原抗體反應后
酶免疫技術的概述
酶免疫技術是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法,是標記免疫技術的一種。近年來標記免疫技術飛速發展,應用不同標記物,根據不同原理、不同技術建立起來的檢測方法層出不窮,而方法的創建者往往給同類的方法以不同的名稱。因此確知某一方法屬于哪一類型,對該方法的正確理解有著重要意義。本節先敘述各種標記免疫技
酶免疫技術的介紹
酶免疫技術是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法,是標記免疫技術的一種。近年來標記免疫技術飛速發展,應用不同標記物,根據不同原理、不同技術建立起來的檢測方法層出不窮,而方法的創建者往往給同類的方法以不同的名稱。因此確知某一方法屬于哪一類型,對該方法的正確理解有著重要意義。本節先敘述各種標記免疫技
免疫酶技術應用介紹
免疫酶技術是指在一定的生物反應器內,利用酶的催化作用,進行物質轉化的技術.其應用范圍已遍及工業、醫藥、農業、化學分析、環境保護、能源開發和生命科學理論研究等各個方面。
酶免疫技術中酶和酶作用底物
酶和酶作用底物(一)酶的要求:?一個酶蛋白分子每分鐘可催化10 3 ~10 4 個底物分子轉變成有色產物。用于標記的酶應符合:1.酶的活性要強,催化反應的轉化率高,純度高。2.酶催化底物后產生的產物易于判斷或測量,方法簡單易行、敏感和重復性好。3.作用專一性強 ,酶活性不受樣品中其他成分的影響,受檢
免疫電鏡相關技術實驗——酶標記免疫電鏡技術
實驗方法原理該技術是以酶為抗原—抗體反應的標記物,在不改變抗原抗體的免疫反應特異性,亦不降低酶活性條件下,與相應底物作用后形成不溶性的反應物。在電鏡下形成為電子散射力強的終末產物。用于免疫電鏡標記的酶有辣根過氧化物酶 (HRP)堿性磷酸酶 (AKP 或 ALP)葡萄糖氧化酶(GOP) 等。目前常用的
免疫酶技術的技術原理簡介
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物,與抗體或抗原聯結,與相應的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學技術。 目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗(ELISA),
酶免疫技術抗體的酶標記方法
用于酶免疫技術的酶須具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室溫下穩定;反應產物易于顯現;能商品化生產。目前酶免疫技術檢測中常用的酶為辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)和堿性磷酸酶(AP),其次還有葡萄糖氧化酶、β-半乳糖苷酶、溶菌酶和蘋果酸脫氫酶等。由于辣根過氧化
酶標洗板機
酶標洗板機是全自動處理效果,具備多點定位吸液功能,每孔清洗液殘留量
自動酶標分析儀的技術指標
技術參數 鉆石級酶標儀 DNM-9602G 鉑金級酶標儀 DNM-9602 黃金級酶標儀 DNM-9602A 檢測通道 八光道檢測 八光道檢測 兩光道檢測 檢測范圍 0.001-4.0A 0.001-3.0A 0.001-3.0A 精確度 ±1.0%或±0.01A ±1.0%或±0.01A
多功能酶標分析儀技術參數
波長范圍: 330-1100nm 濾光片配置:10個濾光片位置,標配405nm、450nm、492nm、630nm,選配6定制波長 吸光度范圍:0.000―4.000A 光通道數:8通道光路檢測,另設一個獨立參比通道(選配) 示值穩定性:≤±0.002A或≤0.5%T/10min。 重
酶免疫技術使用的方法
ACA(抗心磷脂抗體)主要通過抑制血管內皮細胞合成PGI2,干擾血栓調節素、纖溶酶原激活劑和蛋白質C系統的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝狀態,與復發性動靜脈血栓形成、反復自然流產及血小板減少癥關系密切。 其主要程序為用純心磷脂的無水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封閉后分別于標本孔和對
關于酶免疫技術的簡介
酶免疫技術是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法,是標記免疫技術的一種。近年來標記免疫技術飛速發展,應用不同標記物,根據不同原理、不同技術建立起來的檢測方法層出不窮,而方法的創建者往往給同類的方法以不同的名稱。因此確知某一方法屬于哪一類型,對該方法的正確理解有著重要意義。本節先敘述各種標記免疫技
酶免疫電泳技術
一,酶免疫電泳技術的原理抗原與抗體在瓊脂糖凝膠中電泳時,在堿性緩沖液的條件下,抗原帶負電,向正極移動。不同分子量或還不同電荷的抗原,在相同條件下,移動距離不等。這些在不同部位的抗原,再與相關抗體經擴散形成免疫沉淀線。酶免疫電泳技術中的抗原與抗體就是酶和它的相應抗體球蛋白。酶抗原與酶抗體形成的免疫復合
免疫酶技術的操作步驟
(1) 用微量移液器分別加待檢血清、陽性對照、陰性對照各100μl于1、2、3孔中,370C水浴箱溫育30min。(2) 用PBS液洗板3次,每次3min,甩干。(3) 每孔加入酶結合物2滴,370C水浴箱溫育30min。(4) 用PBS液洗板3次,每次3min,甩干(5) 每孔分別加入顯色A液、B
酶免疫電泳技術
實驗方法原理抗原與抗體在瓊脂糖凝膠中電泳時,在堿性緩沖液的條件下,抗原帶負電,向正極移動。不同分子量或還不同電荷的抗原,在相同條件下,移動距離不等。這些在不同部位的抗原,再與相關抗體經擴散形成免疫沉淀線。酶免疫電泳技術中的抗原與抗體就是酶和它的相應抗體球蛋白。酶抗原與酶抗體形成的免疫復合物是用底物顯
免疫酶細胞化學實驗技術
免疫酶細胞化學免疫酶細胞化學是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下,借助于酶細胞化學的手段,檢測某種物質(抗原/抗體)在組織細胞內存在部位的一門新技術:即預先將抗體與酶連結,再使其與組織內特異抗原反應,經細胞化學染色
關于免疫酶技術的簡介
免疫酶技術(immunoenzymatic technique) 最早應用的免疫酶技術是免疫酶組織化學染色,即用標記的抗體與標本中的抗原發生特異性結合,當加入酶的底物時,在酶的作用下經一系列生化反應產生有色物質,借助光鏡作出定位判斷。目前,應用最廣泛的是酶聯免疫吸附試驗(enzyme linke
概述免疫酶技術的原理
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物,與抗體或抗原聯結,與相應的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學技術。 目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗(ELISA),
關于免疫酶技術的簡介
免疫酶技術(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫測定,是通過酶標記抗體或抗原來檢測抗原或抗體的方法,其應用范圍極廣。顯示方法是用酶的特殊底物來處理反應后的標本,通過酶催化底物的顯色反應來測定抗原或抗體的存在,以酶標作定量或定性分析。標記酶有辣根過氧化物酶(HRP) 和堿
免疫酶技術的應用介紹
免疫酶技術是指在一定的生物反應器內,利用酶的催化作用,進行物質轉化的技術.其應用范圍已遍及工業、醫藥、農業、化學分析、環境保護、能源開發和生命科學理論研究等各個方面。
酶免疫電泳技術
一,酶免疫電泳技術的原理抗原與抗體在瓊脂糖凝膠中電泳時,在堿性緩沖液的條件下,抗原帶負電,向正極移動。不同分子量或還不同電荷的抗原,在相同條件下,移動距離不等。這些在不同部位的抗原,再與相關抗體經擴散形成免疫沉淀線。酶免疫電泳技術中的抗原與抗體就是酶和它的相應抗體球蛋白。酶抗原與酶抗體形成的免疫復合
免疫酶技術的應用介紹
免疫酶技術是指在一定的生物反應器內,利用酶的催化作用,進行物質轉化的技術.其應用范圍已遍及工業、醫藥、農業、化學分析、環境保護、能源開發和生命科學理論研究等各個方面。
酶免疫技術的技術原理是什么?
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物,與抗體或抗原聯結,與相應的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學技術。 為了檢測抗原可用夾心法。將特異性抗體吸附在固相載體(聚苯乙
酶免疫技術的技術原理是什么?
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物,與抗體或抗原聯結,與相應的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學技術。 為了檢測抗原可用夾心法。將特異性抗體吸附在固相載體(聚苯乙
免疫學檢驗中的酶免疫技術
20世紀中期,以放射免疫技術為代表的標記免疫技術相繼問世,它將某種可微量或超微量測定的物質(如放射性核素、熒光素、酶、化學發光劑等)標記于抗原(抗體)上制成標記物,加入到抗原抗體的反應體系中與相應的抗體(抗原)反應,以檢測標記物的有無及含量間接反映被測物的存在與多少。這些將標記技術與抗原抗體反應
免疫學檢驗中的酶免疫技術
目前,免疫學檢驗中的標記技術主要包括酶免疫技術、熒光免疫技術、放射免疫技術、金免疫技術、化學發光免疫技術等。其中酶免疫技術是以酶標記的抗體(抗原)作為主要試劑,將抗原抗體反應的特異性和酶催化底物反應的高效性和專一性結合起來的一種免疫檢測技術。作為經典的三大標記技術之一,酶免疫技術在檢驗醫學中得到廣
免疫酶技術中常用的酶底物系統
各種免疫酶技術,最終都是以某種顯色反應而揭示待測物質來進行定性和定量分析。不同酶要選擇相應的底物,見下表。免疫酶技術中常用的酶-底物系統酶底物顯色反應測定波長/nm辣根過氧化物酶二氨基聯苯胺深褐色沉淀5-氨基水楊酸棕色449鄰苯二胺橘紅色492/460鄰聯甲苯胺藍色4254-硝基酚磷酸黃色400堿性