NatureMethods發布CRISPR新技術：CRISPRX
斯坦福大學遺傳學系，藥理學系的幾位學者合作，開發出了一種為原位蛋白質工程重利用體細胞超突變的新技術—— CRISPR-X ，這將能幫助科學家們創建復雜的原始遺傳突變文庫，分析完善蛋白質工程。 這一研究成果在線公布在10月31日的Nature Methods雜志上，文章的通訊作者是斯坦福大學Michael C Bassik副教授，他曾參與研發多項CRISPR新技術，比如前年研發的SunTag，這是一套分子掛鉤，其能夠將多個拷貝的生物活性分子掛到可用來靶向一些基因或其他的分子的蛋白質支架上，利用SunTag能增加CRISPR的變化。 目前通過定向進化法分析蛋白功能，進行蛋白質工程研究受限于整體誘變，或DNA文庫構建方面的技術問題。這篇文章針對于此，研發出了一種為原位蛋白質工程重利用體細胞超突變的新技術：CRISPR-X。 研究人員催化激活休眠的 dCas9，令其召集攜帶MS2修飾sgRNAs的胞嘧啶脫氨酶(cytidine......閱讀全文
原位分離技術
近幾年來,原位分離技術(in situ product removal,簡稱ISPR)在乳酸發酵中的應用引起了世界范圍內的廣泛關注,溶劑萃取發酵法(油酸、叔胺等為萃取劑)、吸附法(離子交換樹脂、活性炭、高分子樹脂等)、膜法發酵(滲析、電滲析、中空纖維超濾膜、反滲透膜等)等,這些方法的使用都是基于在發
我國科學家研發出活體內蛋白質瞬時原位激活新技術
在活細胞等復雜的生命體系中原位研究蛋白質功能具有重要的科學意義。以往在活細胞內開展的蛋白質原位研究只能在某些特定蛋白家族中應用，如何進一步發展廣泛適用于不同類型蛋白家族的原位研究方法一直是困擾眾多生物學家的科學難題。 在國家重點研發計劃“蛋白質機器與生命過程調控”重點專項“信號轉導過程中蛋白質
原位PCR和原位RTPCR操作規程
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術,就是在組織細胞里進行PCR反應,它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點,是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。一、儀器設備英國Thermo Hybaid原位PCR儀。二、操作流程1、原位PCR步驟（1）預處理
FISH熒光原位雜交實驗（原位雜交）
1. 實驗目的??????? 通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和在生物學、醫學領域的應用。掌握原位雜交技術的操作方法，熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。2. 實驗原理??????? 熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一門新興的分子細胞遺
原位PCR和原位RTPCR操作規程
（一）、儀器設備 英國Thermo Hybaid原位PCR儀。 （二）、操作流程 1、原位PCR步驟 1）預處理： （1）切片常規脫蠟； （2）0.2mol/L HCl處理10min； （3）5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10m
熒光原位雜交實驗——熒光原位雜交技術
熒光原位雜交可應用于：（1）動植物基因組結構研究；（2）染色體精細結構變異分析；（3）病毒感染分析；（4）腫瘤遺傳學和基因組進化研究。實驗方法原理用已知的標記單鏈核酸為探針，按照堿基互補的原則，與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合，形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱
原位雜交儀—熒光原位雜交相關解釋
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH）是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術，以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法，探針首先與某種介導分子（reporter molecule
CASMS分論壇：Topdown蛋白質組學和原位質譜新進展
分析測試百科網訊 美國東部時間2021年8月9日-13日，首屆美國華人質譜學會（CASMS）學術研討會暨展覽會在Gather.Town隆重舉行。在12日“New Advances in Top-down Proteomics and Native Mass Spectrometry”分論壇中，加
原位電性能測試
?聚焦離子束(Focused Ion beam, FIB)的系統是利用電透鏡將離子束聚焦成非常小尺寸的顯微切割儀器。目前商用系統的離子束為液相金屬離子源，金屬材質為鎵(Ga)，因為鎵元素具有低熔點、低蒸氣壓及良好的抗氧化力；典型的離子束顯微鏡包括液相金屬離子源、電透鏡、掃描電極、二次粒子偵測器、5
原位PCR的概念
原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和 高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR是Hasse等于1990年建立的，實驗用的標本是新鮮組織、石蠟包埋組織、脫落 細胞、血細胞等.?
原位PCR實驗相關
所需設備 原位PCR反應是在載玻片的平面上進行，保持水平可以使反應各組分均勻地分布在組織切片上，所以須在原位PCR儀上進行，該儀器不但可以使載玻片保持水平，而且還可以給載玻片進行均勻地加熱，保證擴增反應的順利進行。 探針種類 與原位雜交一樣，檢測原位PCR結果的探針可以是DNA探針，也可以
原位雜交技術
導語我們常說，科學家也是藝術家，在明確真理探索科學的道路上，往往會創造出很多極具美感的藝術作品。所以今天小編為大家介紹的就是能做出美美圖的新技能。先欣賞一下美美的實驗結果圖~---Olson, B. D. and Downes, G. B.?---in situ Hybridization of w
原位型凍干機簡介
凍干腔和冷阱為兩個獨立的腔體，凍干腔中的擱板帶制冷功能，物料置入凍干腔后，物料的預凍、干燥過程無需人工操作。該類型凍干機的制作工藝復雜，制造成本高，但原位型凍干機是凍干機發展方向，是進行凍干工藝摸索的理想選擇，特別適用于醫藥、生物制品及其他特殊產品的凍干。
什么是原位紅外
原位紅外是指測試反應過程中在原位不動下用紅外線掃描機記錄微觀的反應變化。原位紅外主要是測試反應過程中，官能團結構的變化，可以更好的模擬實驗過程，對解釋反應機理很有幫助。在催化劑表征方面，可以模擬出催化劑催化原理。
原位芯片的應用
? ? 原位芯片作為基礎材料，它就像一個支點，可撬動多領域的應用，且與我們生活息息相關。比如，在原位芯片的“助攻”下，電子顯微鏡觀測能力將大幅度提高，能全程高清拍攝每個原子的變化和運動軌跡，借由這項技術，可以研究汽車尾氣、廢水等。由于原位芯片高通量、少樣本量的特性，可滿足超快速體外診斷（如用尿液檢測
原位PCR實驗步驟
原位PCR實驗步驟，原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。一、組織切片和細胞樣品的制備試劑與配置10%福爾馬
什么是原位檢測？
在檢測中，經常聽到原位檢測，常見于巖土工程其實就是：在實地盡量對土體少的擾動，現場進行的一項檢測，以盡可能的取得較為準確的測量數據。
原位進樣原理
原位測序技術的原理和應用點擊次數：664 發布日期：2022-3-23 來源：蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司原位測序 (ISS) 是一種新方法，通過該方法直接在固定組織或細胞樣品的切片中對 mRNA 進行測序。原位測序原理關鍵是測序信息與其位置之間的聯系—在一些情況下，是亞細胞位置。這與傳統測序不
DRIFT原位光譜
散射反射傅立葉變換紅外光譜（Diffuse Reflaxions Infrared Fourier Transformations Spectroscopy, DRIFTS）為化學家提供了研究接近真實反應條件的非均相氣相反應的可能性。借助這種方法可以獲取反應物與催化劑表面相互作用和吸附
原位雜交簡介
原位雜交是在分子生物學領域應用極為廣泛的實驗技術之一，是在研究生物體發育過程中的一種極為重要的分子遺傳學的研究方法。其英文名為in situ hybridization,其中in situ為拉丁文，原義是"in its natural position". 字面的意思理解就是說在其原來的天然的位置處
原位雜交(In－Situ－Hybridization,ISH)與熒光原位雜交（四）
（2）硝酸纖維素濾膜吸印。①將膠切成合適大小，切去右上角作為記號。②將膠放進盛有變性緩沖液（1.5mol/l NaCl, 0.5mol/L NaOH）的盤中輕搖動15min。③換到中和緩沖液（1mol/L Tris·HCl , pH8.0, 1.5mol/L NaCl）中輕搖動30min。④裁一張硝
原位雜交(In－Situ－Hybridization,ISH)與熒光原位雜交（二）
5．洗膜 取出塑料袋，用剪刀剪開，小心取出濾膜，立即浸入盛有2×SSC和 0.5%SDS溶液的盤中，室溫下漂洗5min。再將濾膜移入2×SSC和0.1%SDS溶液中，室溫下洗滌15min（輕輕搖動）。然后將濾膜移入 0.1×SSC和0.5%SDS溶液中；68℃輕輕搖動保溫2h，更換緩沖液后繼
原位雜交(In－Situ－Hybridization,ISH)與熒光原位雜交（六）
夾心雜交法可用濾膜和小珠固定吸附探針，使用小珠可更好地進行標準化試驗和更容易對小量樣品進行操作。Dahlen 等利用微孔板進行夾心雜交，可同時進行大量樣品檢測，他們先吸取DNA探針加到凹板中，然后用紫外線照射使其固定到塑料板上。用微孔板進行夾心雜交還可直接用于PCR技術。應用光敏生物標記探針
原位雜交(In－Situ－Hybridization,ISH)與熒光原位雜交（三）
（1）DAN斑點雜交①先將膜在水中浸濕，再放到15×SSC中。②將DNA樣品溶于水或TE，煮沸5min，冰中速冷。③用鉛筆在濾膜上標好位置，將DNA點樣于膜上。每個樣品一般點50μl（2～10μg DNA）。④將膜烘干，密封保存備用。（2）RNA斑點雜交：與上法類似，每個樣品至多加10μg總RNA（
以菌落原位雜交為例介紹原位雜交技術
對分散在若干個瓊脂平板上的少數菌落（100-200）進行克隆篩選時，可采用該方法。將這些菌落歸并到一個瓊脂主平板以及已置于第二個瓊脂平板表面的一張硝酸纖維素濾膜上。經培養一段時間后，對菌落進行原位裂解。主平板應貯存于4℃直至得到篩選結果。將少數菌落轉移到硝酸纖維素濾膜上（1） 在含有選擇性抗生素的瓊
原位雜交(In－Situ－Hybridization,ISH)與熒光原位雜交（五）
⑦60伏電泳過夜。 ⑧取出凝膠，水中浸泡2次，每次5min。 ⑨室溫下將膠浸到50mmol/L NaOH和10mmol/l NaCl中45min，水解高分子RNA，以增強轉印。 ⑩室溫下將膠浸到0.1mol/L Tris·HCl (Ph7.5)中45min，使膠中和。
前列腺原位腫瘤模型的建立實驗——原位種植法
前列腺原位腫瘤模型的建立可以：（1）連續活體監測前列腺癌發生、發展；（2）用于前列腺原位腫瘤生長及治療的研究；（3）研究前列腺癌的生物學行為。實驗方法原理10只BALB/C裸鼠前列腺背側包膜內注入攜帶紅色熒光蛋白（RFP）的前列腺癌PC-3細胞（PR7細胞）懸液20μL，第2、4、6、8周分別用非侵
原位雜交(In－Situ－Hybridization,ISH)與熒光原位雜交（一）
是用標記的核酸探針，使用非放射檢測系統或放射自顯影系統，在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法，具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一，廣泛應用于腫瘤生物學、血液病理學、遺傳、微生物學、細胞和分子生物學、神經內分
新技術實現活細胞內線粒體蛋白質的原位構象和相互作用解析
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/505668.shtm
基于糖苷鍵質譜可碎裂交聯劑的蛋白質復合物原位解析
近日，中國科學院大連化學物理研究所生物技術研究部生物分子高效分離與表征研究組研究員張麗華團隊，研制了一種基于糖苷鍵的質譜可碎裂型交聯劑，顯著地提高了交聯信息的檢索通量和鑒定準確度，同時具有良好的兩親性和生物兼容性，實現了活細胞內蛋白質復合物原位交聯和規模化精準解析。作為生命活動的執行者，蛋白質通過相