1. 實驗原理
本實驗采用半導體激光器,以核酸熒光染色及流式細胞術原理分析白細胞。當全血進入白細胞通道后,通過核酸熒光染色、利用流式細胞技術半導體激光的照射形成白細胞散射圖,從而計算出中性細胞、淋巴細胞,單核細脃、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞分類的數量。
2. 標本采集:
2.1 標本種類:新抽取的凝血或手指末梢血
2.2 標本要求:
2.2.1 抗凝劑采用EDTA K2抗凝
2.2.2 用手指末梢血作白細胞檢驗時,最少樣品量為200ul,如手指有凍瘡,則主張采用耳垂血。
3. 標本儲存
2小時內完成檢驗,室溫放置下不超過8小時,4-8℃保存不超過48小時。
4. 標本運輸:室溫運輸
5. 標本拒收標準:污染,凝固標本不能作測定
6. 試劑
6.1試劑名稱:sysmex血細胞分析試劑
6.2 生產廠家:希森美康株式會社
6.3 試劑組成
試劑1:嗜堿細胞溶血素
試劑2:嗜堿細胞溶血素
試劑3:白細胞分類染液試劑4:稀釋液
6.4 試劑儲存條件及有效期:儲存溫度為5-30℃,有效期為一年,開封后的使用期限為60天。
7. 儀器設備
7.1 儀器名稱:sysmex血細胞分析儀
7.2 儀器廠家:日本sysmex株式會社
7.3 儀器型號:XT-2000i
8. 操作步驟
8.1 手工模式:
8.1.1 上下顛倒試管將內容物充分混勻。
8.1.2 輕輕取下蓋子,防止血液濺出。
8.1.3 將試管正確放入手工吸引管,吸引管浸入樣品。
8.1.4 按start鍵,樣品開始吸取。
8.1.5 當ready led 暗(并發出兩聲短音)移開試管。
8.1.6 當ready led再次亮起時,準備下一個樣品,重復上述步驟。
8.2 進樣器模式:
8.2.1 將試管入試管架,將試管架放在進樣器的右側槽中,最多能入5個試管架。
8.2.2 單擊sampler start鍵
9. 結果的分析與判斷:在儀器顯示屏上將顯示結果
10. 質量控制
10.1 三種質量控制品(高、中、低),分別對應三種靶值,做出來的質控品不能超出質控靶值的上下限范圍,否則實驗無效。
10.2 計算方法
當結果出現差異時用下列方法校正
Coll= (Xct/Zct)×Col2
式中: Coll—新質控調整系數
Col2—原質控調整系數
Xct —質控品靶值
Zct—質控品測得值
11.
參考值范圍:白細胞分類(DC):參考值:中性粒細胞0.5~0.70×(50~70%),嗜酸性鑿粒細胞0.005~0.05(0.5%~5%)嗜堿性粒細胞0~0.01(0~1%),淋巴細胞0.2~0.40(20%~40%)和單核細胞0.03~0.08(3%~8%)。
12.
臨床意義:中性粒細胞增多見于急性化膿性細菌感染、粒細胞白血病、急性出血、溶血、手術后和尿毒癥等;其減少見于傷寒和副傷寒、瘧疾、粒細胞缺乏癥、放射性輻照和腫瘤化療。嗜堿性粒細胞增多見于過敏性疾病、寄生蟲病等;其減少見于傷寒和副傷寒等。嗜堿性粒細胞增多見于慢性粒細胞白血病、何杰金氏病和鉛中毒等。淋巴細胞增多見于病毒感染,其減少見于免疫缺陷病。單核細胞增多見于某些細菌感染及單核細胞白血病等。
13. 當檢驗系統(儀器)不能工作時,所采取的補救措施:當檢驗系統(儀器)不能工作時,可聯系廠家,進行緊急修理,如一時不能修好,如別的實驗室有同類儀器,可到別的儀器先檢驗,如別的實驗室無同類儀器,申請廠家送一臺正常的代替。
14. 參考文獻
14.1葉應嫵,王毓三,等,全國臨床檢驗操作規程,第二版,東南大學出版社,1997,169-173
14.2 SySmex XT-2000i中文操作說明書